重组人表皮生长因子联合玻璃酸钠治疗白内障术后中重度干眼的临床研究

目的研究重组人表皮生长因子(rhEGF)联合玻璃酸钠治疗白内障术后中重度干眼的临床疗效。方法将收治的84例白内障术后中重度干眼患者按随机数字表法分为对照组和联合组各42例。对照组采用单纯玻璃酸钠滴眼液治疗,联合组于对照组基础上增加rhEGF治疗,连续治疗4周后,比较两组疗效及治疗前后眼表功能指标[泪膜破裂时间(BUT)、泪液分泌试验(SchirmerⅠ试验)、中央泪河高度(TMH)、角膜荧光素染色评分(FL)]、炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,并比较两组不良反应。结果治疗后,联合组治疗总有效率较对照组更高(P<0.05);BUT、SchirmerⅠ试验及TMH较对照组更高,而FL较对照组更低(P<0.05);IL-6、TNF-α水平较对照组更低(P<0.05)。两组不良反应总发生率无显著差异(P>0.05)。结论rhEGF联合玻璃酸钠治疗白内障术后中重度干眼的疗效确切,可有效改善患者眼表功能,减轻眼部炎症反应,且不会明显增加不良反应,用药安全性良好。

三焦点人工晶体与可调节人工晶体术后像差的研究

目的探讨三焦点人工晶体与可调节人工晶体术后像差的变化。方法选取60例白内障患者随机分为A、B组各30例。A组患者给予植入三焦点人工晶体(ATLISAtri839MP),B组患者给予植入非球面可调节人工晶体(Tetraflex?HD),A、B组均行白内障超声乳化吸除联合人工晶体植入术。人工晶体均选用SRK-II计算度数,术后预留-0.50D。术后3个月使用iTrace波前像差仪测量2组眼内总高阶像差(totalhigh-er-order aberrations,t-HOA)、总球差(total spherical,TS)、总彗差(total coma,TC)、总三叶草(total trefoil,TT)的均方根值(rootmean square,RMS)。结果A组患者术后3个月最佳矫正视力(best correc-tedvisual acuity,BCVA)高于B组患者,但差异无统计学意义(P>0.05)。A组患者眼内总高阶像差(t-HOA)、总球差(TS)、总彗差(TC)均低于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。2组总三叶草(TT)无显著差异。结论三焦点人工晶体眼与非球面可调节人工晶体眼术后3个月最佳矫正视力(BCVA)无显著差异,2种人工晶体均可显著提高白内障患者术后视力。三焦点人工晶体不仅可以使患者获得远、中、近3段清晰视力范围,且有效降低术后像差。植入三焦点人工晶体的患者术后视觉质量良好,可获得较高的满意度。

超抗原SEB活化耐受性NKT细胞亚群的研究

目的:探讨超抗原SEB活化的效应细胞参与免疫耐受的NKT细胞亚群及分化特征。方法:采用C57BL/J小鼠脾细胞经SEB诱导,收集体外扩增10d的淋巴细胞为效应细胞,与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养3d,测定效应细胞对刺激剂的应答反应能力。在正常小鼠淋巴细胞与上述刺激剂反应的同时添加效应细胞,3d后测定效应细胞抑制正常淋巴细胞对刺激原的应答反应能力。用MTT染色方法记录细胞增殖的A值。以ConA活化的淋巴细胞做参照,用流式细胞术(FCM)解析了耐受性效应细胞中NKT细胞亚群并显示分化来源与功能的相关性。结果:与正常淋巴细胞对抗原应答反应能力相比,SEB活化的效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低,细胞生长的A值从正常组的0.80±0.04、0.60±0.03和0.55±0.07下降到0.60±0.05、0.30±0.05及0.27±0.04(P<0.01,n=3)。效应细胞抑制正常淋巴细胞对上述抗原的应答反应,尤其抑制ConA活化的T淋巴细胞的应答反应;A值分别由正常值降低到0.26±0.002、0.48±0.04及0.34±0.02(P<0.01,n=3)。效应细胞中CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+/NK1.1+NKT细胞亚群显著增加(P<0.05和P<0.01,n=4)。ConA活化的淋巴细胞是T淋巴细胞并包括CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论:超抗原SEB活化的耐受功能与CD4+NK1.1+、CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+NKT细胞亚群有关,它们由T细胞分化而来。CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞没有参与耐受性调节。

虹膜组织力学特性研究的实验方法探索

创建了将眼瞳孔水密缝合后,在不破坏其正常功能作用的几何形态条件下,模拟眼内前后房压强差,对虹膜整体进行加压的实验方法。首次使眼虹膜整体力学特性的认识成为可能。本方法的实验结果将另文报道。

基于定量瞳孔阻滞力仿真实验的虹膜组织生物力学特性分析

目的分析瞳孔阻滞力作用下的虹膜特性,探讨虹膜生物力学特性参量与瞳孔阻滞力和前后房压强差的关系。方法利用设计的瞳孔阻滞力仿真装置模拟瞳孔阻滞力,用液体加压装置模拟前后房压强差,对实验动物的虹膜进行整体加压,定量分析瞳孔阻滞力作用下的虹膜面应变、曲率半径的变化与前后房压强差的关系,以及不同大小的瞳孔阻滞力与前后房压强差的关系。结果获得了与临床现象相近的实验模型,与前期实验工作的方法相比,该实验方法更接近生理状态。得出分别以面应变、虹膜膨隆最高点的曲率半径与前后房压强差关系表达的方程,虹膜面应变δ与前后房压强差ΔP成以下规律:ΔP=b0eb1δ(b0=3.3373,b1=30.3909);虹膜曲率半径r与前后房压强差ΔP关系:r=e(b0+b1/ΔP)(b0=0.4761,b1=21.6604)。初步完成了虹膜特性和瞳孔阻滞力的定量研究,描述了不同大小的瞳孔阻滞力与前后房压强差的关系。结论实现了软组织小力学量的定量测量。面应变和曲率半径是可量化的虹膜形变特性参量,能够敏感的反映前后房压强差的变化,虹膜膨隆最高点的曲率半径是临床上容易测量的指标,对其的测量将帮助人们更好的进行早期临床诊断和治疗。

激素性青光眼房水排出阻力增加的机制探讨

目的:本研究通过观察经地塞米松处理前后培养的人小梁细胞的变化,探讨激素性青光眼房水排出阻力增加的机制。方法:将人类小梁细胞培养至接近体内的高分化状态,用地塞米松处理后,观察细胞形态的变化,并检测以下蛋白的分布和表达:(1)myocilin/TIGR蛋白;(2)纤连蛋白;(3)肌动蛋白交联网的形成;(4)血清淀粉样物质A蛋白。结果:人小梁细胞经地塞米松处理后(1)胞体变大,排列不规则,边界模糊,呈"融合"状;(2)细胞内外myocilin/TIGR蛋白表达均明显增加,其胞外表达与纤连蛋白位置一致,提示相互作用;(3)纤连蛋白表达增加;(4)CLANs形成,细胞间连接增强;(5)血清淀粉样物质A蛋白表达增加。结论:人类小梁细胞经地塞米松处理后形态发生变化,可能与应力纤维变化及myocilin蛋白在细胞内积聚有关。细胞间边界不清,与细胞外基质蛋白过度表达、沉积有关。小梁细胞外基质沉积以及异常的细胞间连接等改变与房水排出阻力增加的病理过程有关。

在小鼠异基因骨髓细胞移植中超抗原SEB诱导的耐受特征

目的: 研究在异基因骨髓细胞移植中葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导的耐受强度和细胞学特征.方法: 选用C57BL/J小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体.所有受体小鼠在接受6×107骨髓细胞前均接受6.0Gy 60Coγ射线的照射,随机分成3组: 组1为只接受6.0Gy 60Coγ射线照射的对照组(照射对照组,RI);组2为照射后注射生理盐水(移植对照组,Tran.); 组3为照射后注射60 μg SEB(SEB组).180 d后由组2和组3实验鼠获得两组C57BL/L-BALB/c嵌合体小鼠.用流式细胞术分析移植后30～180d受体小鼠体内CD4+ T、 CD8+ T、 CD3+/NK1.1+ NKT淋巴细胞亚群的数量和MHC H-2Kb、 H-2Kd抗原表达的百分率,用MLR方法测定嵌合体小鼠淋巴细胞对ConA和异源性抗原的反应性.结果: (1)接受大剂量骨髓细胞移植后,注射SEB和注射生理盐水的两组小鼠均可存活180 d以上,SEB组小鼠呈现出BALB/c供体小鼠的颜色特征(白色);Tran.组小鼠呈现出其灰白色.(2)SEB组嵌合体小鼠对ConA的反应性明显低于RI组和Tran.组;对异源性抗原的应答高于Tran.组.(3)SEB组小鼠外周血中CD4+ T细胞的数量在移植后30～60 d明显下降,随后增加; CD8+T细胞的数量不变.CD3+/NK1.1+ NKT细胞的数量,从接受移植后30 d开始增加,随着时间的延长而递增,到180d达到5.71%.存活180 d的嵌合体小鼠,体内供体小鼠特有的MHC H-2Kd抗原的表达率高达80.95%,自体MHC H-2Kb抗原表达的百分率只占1.45%.(4)与SEB组相反,Tran.组小鼠CD8+ T细胞的数量持续下降; CD3+/NK1.1+NKT细胞的数量的增加只在移植后180 d上升达到5.07%.结论: 在异基因骨髓细胞移植中,SEB诱导的耐受性比单纯骨髓移植诱导的耐受性强.SEB诱导的耐受性与移植早期特异性CD4+ T细胞数量的减少和NKT细胞数的持续增加有关.反应性的降低表现为T细胞对ConA反应性的下降.

虹膜组织力学特性及瞳孔阻滞力定量分析的实验装置设计

目的设计一种在不破坏虹膜形态结构和正常功能的前提下能用于虹膜组织力学特性及瞳孔阻滞力定量分析的仿真装置。方法用不锈钢制作瞳孔阻滞力仿真装置,用负压吸附虹膜,体外模拟瞳孔阻滞现象;依据连通器原理制作加压装置,模拟前后房压强差对虹膜整体进行加压。结果用此装置可以体外模拟完全瞳孔阻滞现象,经过动物试验获得的实验模型与临床现象相近,可以实现定量瞳孔阻滞力作用下的虹膜生物力学特性参量的测量。结论此装置是一种用于虹膜特性分析和瞳孔阻滞力定量分析的理想装置,实验给出了一种适用面较宽的小力学量、大曲率准球状腔体类生物软组织力学特性研究的实验方法。

石斛散对体外培养人视网膜细胞的作用

目的观察中药方剂石斛散及单味药对人视网膜细胞的增生以及谷氨酸损伤的保护作用,探讨其在视网膜细胞损伤或变性类疾病方面的作用及机理,为临床治疗同类疾病提供依据。方法体外培养人视网膜细胞,通过四甲基偶氮唑盐实验观察石斛散复方以及各单味药对视网膜细胞增生的影响。另用Rhodamine123标记培养的视网膜细胞,通过激光共聚焦扫描显微镜动态观察和记录不同药物作用下细胞的线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化。结果体外培养人视网膜细胞贴壁、伸展以及生长良好。四甲基偶氮唑盐实验:石斛散组1.58g·L-1和0.50g·L-1以及石斛组5.00g·L-1对人视网膜细胞活性分别增加21.8%、14.2%和13.4%。MMP实验:石斛散轻度升高MMP,增加约13.5%,同时它可以抵抗谷氨酸损伤细胞后引起的MMP下降,由降低46.4%减少为16.2%。结论石斛散能够影响人视网膜细胞线粒体功能、促进细胞活性、抵抗谷氨酸对人视网膜细胞损伤作用。可作为临床治疗视网膜变性类疾病的一种选择。

严重视神经损伤失明者行开颅手术治疗的探讨

目的 评价开颅视神经减压开放术在治疗严重视神经损伤失明病人的效果。方法 应用额部开颅视神经减压开放术治疗术治疗术前完全失明 (无光感 )患者 31例 ,全程开放视神经管及视神经鞘膜 ,并取出眶尖的碎骨片。结果 术后恢复视力 16例。有效率 5 1 5 %。结论 开颅视神经减压开放术是唯一能彻底减压视神经的手术方式。

激光共聚焦显微镜法分析载药微球的结构

目的 验证激光共聚焦显微镜 (CL SM)可否作为研究微球结构的工具 ,并用以获取微球内部结构的信息。方法 微球用复凝聚法制备 ,牛血清白蛋白 (BSA)为模型蛋白药物和聚合物 (明胶与阿拉伯胶 )为成球材料 ,在制备微球前均共价标记了荧光物。应用 CL SM将微球在不同荧光通道下呈像 ,并将微球切割成一系列平行切面分别成像 ,对微球进行三维重建和图像分析。结果 在 CL SM下微球中 BSA与聚合物均呈均匀分布 ,加入BSA不影响聚合物的分布。结论 CL SM可观察载药微球的内部结构 ,而不需事先破坏样品即可获得被包裹药物的定位和成球材料所构成微球的结构资料。

复方中药制剂抑制成纤维化增生作用的实验研究△

目的观察复方中药制剂对结膜成纤维细胞增生的抑制作用,为临床防治增生性玻璃体视网膜病变提供新的治疗方法。方法以体外培养的兔结膜成纤维细胞作为研究对象,对照组用地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松处理,实验组用丹苓(颗粒)冲剂及其君药(丹参、石决明)处理。48h后,用MTT法观察成纤维细胞增生情况及其细胞形态变化特点。结果丹苓(颗粒)冲剂和丹参在一定浓度范围内可抑制成纤维细胞增生,且成剂量依赖关系;石决明对成纤维细胞增生未见明显抑制作用。5-氟尿嘧啶、氢化可的松在一定浓度范围内可明显抑制成纤维细胞增生;地塞米松在低浓度时轻度刺激成纤维细胞增生,但在高浓度时抑制成纤维细胞的增生。丹苓(颗粒)冲剂和丹参作用48h后,部分成纤维细胞未能贴壁且收缩成圆形。结论丹苓(颗粒)冲剂可有效抑制成纤维细胞增生,有望成为防治增生性玻璃体视网膜病变的新药物。

弱视遮盖治疗对双眼视觉的影响

目的观察弱视患儿遮盖疗法对双眼视觉的影响。方法对42例双眼矫正视力相差2行以上的屈光不正性和屈光参差性弱视儿童行遮盖治疗,治疗前后检测其立体视锐度及三级功能。结果遮盖治疗前后具有黄斑中心凹立体视锐度的人数比例分别为0、26.19,黄斑立体视锐度的比例分别为30.95、59.52,差异均有统计学意义(χ2=12.598,P=0.000;χ2=6.920,P=0.009)。遮盖前后具有正常融合范围的人数比例分别为26.20、57.14,具有定性远立体视觉的分别为54.76和88.10,差异均有统计学意义(χ2=8.278,P=0.024;χ2=11.433,P=0.029)。结论弱视经遮盖治疗后对双眼视觉的发育影响可能性小。随着视力的提高,立体视锐度、融合功能和远立体视觉也有显著的改善。

热休克蛋白72对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞损伤的保护作用

目的探讨热休克蛋白72(heat shock protein,HSP 72)对大鼠急性高眼压性视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的保护作用。方法右眼前房内灌注平衡盐溶液制作大鼠急性高眼压性 RGC 损伤模型;用热休克反应或腹腔内注射硫酸锌诱导模型大鼠 RGCs 中 HSP 72表达,观察 HSP72表达以后,模型大鼠 RGC 密度的改变情况,并与未处理的模型大鼠 RGC 密度相比较。结果正常大鼠 RGC 密度为2 504±181个/mm^2;急性高眼压模型大鼠 RGC 密度为2 015±111个/mm^2。热休克反应组和硫酸锌注射组 RGC 密度分别为2207±200个/nm^2和2262±155个/mm^2,显著高于模型组(P_(热体克)=0.036,P_(硫酸锌)=0.019);HSP 72阴性对照组与模型组 RGC密度差异无显著意义(P_(槲皮黄酮+热休克)=0.260,P_(槲皮黄酮+硫酸锌)=0.748)。结论热休克反应和腹腔内硫酸锌注射在急性高眼压模型大鼠 RGCs 中诱导产生的 HSP 72;可能对急性高眼压性 RGC 损伤具有保护作用。

成人视网膜神经细胞的原代培养和初步鉴定

目的建立成人视网膜神经细胞培养系统，为深入研究视网膜细胞及观察药物作用提供基础。方法采用组织块培养法，以含100g·L^-1 FBS的IMDM作为细胞培养液，培养成人视网膜细胞，对培养7—10d的细胞进行初步细胞鉴定。结果体外培养成人视网膜细胞原代培养可达80d左右，早期培养的细胞中视网膜神经细胞占65％左右，其中可见多数带有外节段的感光细胞。结论这种培养方法提供的视网膜细胞早期主要以神经细胞为主，可用于视网膜神经细胞的药物作用研究。

单条兜带式后巩膜加固术治疗病理性近视患者的护理

总结62例(65眼)病理性近视的患者行单条兜带式后巩膜加固术的护理经验。术前做好心理护理,使患者积极配合治疗;术后密切观察病情,做好眼部伤口观察、眼肌功能训练、疼痛和呕吐观察与护理的同时,注重心理护理;积极做好出院指导,反复向患者强调手术不提高裸眼视力,以控制或延缓眼轴延长为目的,术后近视度数仍有继续加深的可能,以及出院后定期复查的重要性。本组患者术后视力稳定,眼轴未再延长,效果满意。

致病性镰刀菌的体外药敏实验研究

目的：测定几种抗真菌药物对致病性镰刀菌的最小抑菌浓度，了解镰刀菌对这几种药物的敏感性，为临床治疗提供依据。方法：实验菌株为北京大学真菌和真菌病研究中心保存的23株镰刀菌和同仁医院眼科研究所提供的临床分离的68株镰刀菌。将受试镰刀菌株在PDA上25℃培养7-10d后，参照NCCLS M38-P方案，用两性霉素B、伊曲康唑、那他霉素、特比萘芬等4种抗真菌药物对91株临床分离的致病性镰刀菌进行MIC测定。结果：两性霉素B和那他霉索对茄病镰刀菌和串珠镰刀菌的MIC相对较低，伊曲康唑对茄病镰刀菌和串珠镰刀菌的MIC均较高，而特比萘芬对茄病镰刀菌的MIC值高于串珠镰刀菌。结论：两性霉素B与那他霉素对茄病镰刀菌和串珠镰刀菌体外抑菌作用相对较强。而伊曲康唑和特比萘芬不够敏感。

使用Moria2一次性90刀头LASIK术后长期效果分析

目的:观察Moria 2一次性90刀头制作角膜瓣的LASIK术后长期视力及干眼的变化。方法:选取使用一次性90刀头LASIK患者48例(94眼),常规130金属刀头LASIK患者34例(68眼)做对照,比较两组术后3,6mo;1,3a的裸眼视力及反应泪膜稳定性的指标BUT试验。结果:术后视力两组在术后3,6mo;1,3a差异均不显著。反应泪膜稳定性的指标BUT试验,两组在术后3mo时差异显著,在6mo;1,3a时差异均不显著。术后3,6mo;1,3aBUT与术前相比差异均显著。结论:使用Moria 2一次性90刀头LASIK长期效果安全稳定。

珍芪滴眼液治疗慢性结膜炎的实验研究

目的通过动物实验探讨珍芪滴眼液对慢性结膜炎的治疗作用。方法新西兰白兔30只,随机分为5组,每组6只12只眼。用球结膜下埋线法制作家兔慢性结膜炎模型,分别用低、中、高剂量的珍芪滴眼液(含生药6.55、13.1、26.2mg/ml)治疗,以珍珠明目滴眼液为阳性对照,珍芪滴眼液溶媒为阴性对照。每日点眼3次,共3周。每日手电肉眼及荧光染色裂隙灯观察、记录眼部炎症变化,每周照外眼像1次。结果连续给药1周,各治疗组与阴性对照组间差异无显著性意义(Hc=9.2972,P=0.0541);连续用药2周,治疗组与阴性对照组间的差异有非常显著性意义(Hc=15.580,P=0.0036),疗效由弱到强排列依次为珍芪低剂量组、中剂量组、阳性对照组、珍芪高剂量组;连续用药3周,除阴性对照组外,各组基本恢复正常(Hc=24.802,P=0.001),疗效由弱到强排列依次为珍芪低剂量组、阳性对照组和珍芪中剂量组、高剂量组。结论珍芪滴眼液对慢性结膜炎有明显的治疗作用,而且无刺激性、无毒性,无过敏反应,有望成为一种治疗慢性结膜炎的新药用于临床。