首都医科大学实验动物学科建设10年回顾

本文以首都医科大学实验动物学科建设的历程为主线,着重阐述了医学院校开展实验动物学科建设的必要性和优势条件,展示了实验动物学科建设内容和十余年的建设成果,为医学院校开展实验动物学科建设提供有益参考。

实验动物质量控制对医学院校教学和科研的保障作用

实验动物是医学院校教学和科研的必要支撑条件,良好的实验动物质量控制是教学和科研的重要保障。目前国内医学院校和开展生物医学相关教学及研究的综合院校在实验动物质量控制方面呈现的水平参差不齐,这从一定程度上反映了其教学和科研的质量及综合实力。本文将主要介绍实验动物质量控制的核心内容,以期为医学院校教学及科研工作者提供参考。

医学实验技术专业动物学教学实践

目的为医学实验技术专业动物学课程的教学提供借鉴经验。方法从教学内容、教学方法和考核方式等方面总结近五年的动物学教学实践。结果根据医学实验技术专业特点,设置了更符合本专业要求的动物学教学内容,运用了多种教学方法和实验教学改革措施,激发了学生学习热情,取得了良好教学效果。结论这些经验对医学实验技术专业动物学教学具有参考价值。

医学实验动物学专业毒理学教学实践

目的为医学实验动物学专业毒理学课程的教学提供借鉴。方法从教学内容、教学方法和考核方式等方面总结近10年的实验动物毒理学教学实践。结果设置了较合理的医学实验动物毒理课程的教学内容,实践了多种教学方法,并提出PBL(Problem Based Learning,PBL)教学模式和实验教学改革措施,取得了良好效果。结论这些教学经验对实验动物毒理学教学有参考价值。

医学实验动物专业教育和培训在医疗健康产业中的意义

医疗健康产业是中国未来国家发展战略的核心力量之一，人才是医疗健康产业发展的重要资源。医学实验动物专业人才是医疗健康发展中人才资源的重要组成。医学实验动物专业教育和培训将为医疗健康发展提供人力资源储备。因此认识医学实验动物专业教育和培训的重要性在未来医疗健康产业发展中具有重要意义。

医学实验技术专业实验动物伦理学教学改革初探

目的为医学实验技术专业《动物伦理学》课程的教学提供借鉴。方法从教学内容和教学方法等方面总结本学系近12年《动物伦理学》的教学实践。结果设置合理的动物伦理学课程的教学内容,通过多种教学方法的实践,取得良好的教学效果。结论这些教学经验对《动物伦理学》教学具有参考价值。

研究生实验动物学实验课的教学体会

实验动物学吸纳了生物学、医学、兽医学、遗传学等诸多学科的知识，是一门具有很强的综合性和交叉性的学科。人们普遍认为实验动物是生物医学乃至整个生命科学研究的重要支撑条件之一，在新技术革命蓬勃发展的当今世界中占有重要地位，因而也受到了各个医学院校的高度重视，成为许多学校本科生的选修课和研究生的必修课。实验动物学实验课作为理论知识的验证和补充，也受到学校和学生的高度重视。但由于师资、经费和教学条件的限制，多数学校只能选择性地面向研究生开设实验课。

实验动物外科手术学个性化教学方法初探

实验动物外科手术技术是实验动物科技工作者必须掌握的最常用基本技术。为了使学生打下坚实的外科手术基本功底,熟练掌握手术的基本技术和常用动物实验手术方法,培养具有创新精神和创新能力的高素质人才,我们根据外科手术学的特点和教学内容,运用个性化教育的理论,开展了个性化教学方法尝试。该教学方法的实施不仅极大地激发了学生的自主学习热情,收到良好的教学效果,而且对大学生创新型人才培养具有借鉴作用。

北京市场供应部分实验动物饲料检测与分析

目的检验北京市场供应的实验动物配合饲料是否符合国家实验动物配合饲料的标准及其质量的稳定性。方法抽取A公司生产的大小鼠饲料、犬饲料、猴饲料各2批次,B公司生产的猪饲料、兔饲料各1批次,严格按照GBT 14924.9-2001操作,对各批次饲料进行粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、灰分、水分、钙、磷等含量检测。结果大小鼠饲料、犬饲料基本合格,猪饲料、猴饲料和兔饲料存在不足。A公司产品质量较为稳定。

高校实验动物中心档案建设与管理

对实验动物档案的分类和内容进行了探讨,阐述了建设和管理实验动物档案的意义和作用,并提出了建设和管理实验动物档案的措施。

封闭群实验用小型猪遗传标准的建立

目的建立封闭群实验用小型猪遗传质量标准和遗传质量检测方法。方法根据群体遗传学理论,参照实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制(GB 14923-2001),在查阅大量文献资料的基础上,建立封闭群实验用小型猪遗传标准。检测方法采用微卫星标记分析技术。从GeneBank中挑选出的100个猪微卫星位点进行PCR扩增和条件优化,通过琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳和STR扫描三级筛选,根据位点在染色体分布情况和等位基因数目、多态性等优化出适于封闭群实验用小型猪遗传检测的微卫星位点组合,建立检测方法。结果初步建立了封闭群实验用小型猪遗传质量标准和检测方法。

微卫星DNA分析国内24个近交系小鼠遗传状况

目的利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。方法用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点,合成荧光标记引物,对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增,经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。结果在24个近交系小鼠品系中,有16个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性,可初步对不同品系进行鉴别区分。其余品系内个别动物存在多态性。结论所选位点可以参考用于近交系小鼠遗传质量检测分析,并进行初步品系检测鉴定。

阿尔茨海默病致病基因突变相关的啮齿类动物和非人灵长类动物模型

我国现有阿尔茨海默病(AD)患者800-1000万,患者数量随着人口老龄化逐年增加,目前尚无有效治疗或者逆转AD的药物和方法。过去基于啮齿类动物模型筛选出的用于治疗AD的药物在人体试验中均疗效差或有严重的副作用,这与啮齿类动物模型和AD患者病理及行为特征差异大有直接关系。非人灵长类动物与人的大脑和神经系统高度相似,建立AD非人灵长类动物模型意义重大。AD病因复杂,但是致病基因突变是其已知的明确病因,应该重视利用基因修饰或者基因筛选等技术建立AD非人灵长类动物模型。本文将着重介绍AD致病基因突变相关的转基因小鼠模型和非人灵长类动物模型的特点和现状。

HEY基因家族在哺乳动物心血管发育中的作用

哺乳动物的HEY基因家族与果蝇Hairy基因具有相似的螺旋-环-螺旋结构,二者均为转录因子,是目前发现的Notch信号通路中为数不多的靶基因之一。本文旨在通过对HEY基因家族结构与功能的特点分析,阐释它们在心血管发育中的重要作用,从而为揭开HEY基因家族对心血管发育的作用机制及分子调控机制提供理论基础。

一例老年恒河猴消化系统疾病诊断

本实验室人工饲养的一只老年恒河猴出现以腹泻、排脓样便、消瘦为主要体症的急性疾病。为研究老年恒河猴消化器官病变的发生情况并进行诊断,本实验采用临床体征结合常规HE染色对其消化系统进行组织学观察,结果发现恒河猴的消化系统组织存在不同程度的病变,包括各种炎性细胞浸润,杯状细胞减少及黏液分泌减少,消化道黏膜的变性、坏死,消化腺的萎缩等,诊断该老龄猴为生理性衰老。

基于Cre/Loxp系统Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶转基因小鼠的建立

目的采用大肠杆菌β-半乳糖酶基因LacZ作为报告基因,建立Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶含有loxp位点的转基因小鼠。与不同组织特异性Cre小鼠杂交,获得时空性表达Tyro3、Axl的转基因小鼠,为研究其在各个组织中的功能奠定基础。方法构建含有loxp位点的Tyro3、Axl受体酪氨酸激酶质粒,测序正确后,通过显微注射法将插入CAG启动子下游的Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3基因的转基因载体注射入BDF1供体鼠受精卵,移植受精卵至ICR受体鼠,待产仔后,通过双引物PCR鉴定F0以及Fn代小鼠的基因型,RT-PCR,X-gal染色观察小鼠组织中LacZ基因,运用WB(Western Blot)检测转基因小鼠和野生型小鼠体内目的蛋白表达的差异。结果获得了含有目的基因的转基因阳性小鼠;通过RT-PCR对阳性小鼠证明LacZ基因的存在;对存在LacZ基因的小鼠进行X-gal染色,在Geo-STOP-msTyro3的脑、睾丸、胸腺中观察到蓝色沉淀,在Geo-STOP-msAxl的脑、心、肾中观察到蓝色沉淀,间接说明目的基因能表达的组织和器官;对双阳性的Geo-STOP-msTyro3、Geo-STOP-msAxl转基因小鼠和野生型小鼠,WB检验证实Tyro3、Axl基因的表达没有差异,说明在加入stop序列之后,Tyro3基因确实存在,而且表达受到抑制。结论成功建立Geo-STOP-msAxl及Geo-STOP-msTyro3酪氨酸受体转基因小鼠。

rTg4510转基因小鼠与阿尔茨海默病患者脑内Tau病变特征异同的比较

目的本研究拟为选择rTg4510转基因小鼠用于磷酸化Tau蛋白代谢、AD相关致病机制及药物筛选等研究提供参考和理论依据。方法利用免疫荧光染色通过S396、4G8、IBA1等抗体检测了rTg4510转基因小鼠与AD患者脑内磷酸化Tau蛋白、β淀粉样蛋白(Aβ)斑块和小胶质细胞,利用CaseViewer、IPWIN Application和GraphPad Prism 8软件对三者进行了分析,比较了rTg4510转基因小鼠与AD患者脑内磷酸化Tau蛋白聚集的表达、分布、类型以及小胶质细胞病变、Aβ斑块等特征的异同。结果与AD患者大脑皮质及海马中磷酸化Tau蛋白(S396)的表达显著高于健康对照组的特征相似(P<0.001),rTg4510转基因小鼠大脑皮质及海马中磷酸化Tau蛋白(S396)的表达显著高于野生对照小鼠(P<0.001)。与AD患者大脑皮质中磷酸化Tau蛋白(S396)表达显著高于相同面积内海马区磷酸化Tau蛋白(S396)表达的特征相近(P<0.001),rTg4510转基因小鼠大脑皮质中磷酸化Tau蛋白(S396)表达相对于相同面积内海马区磷酸化Tau蛋白(S396)的表达也有类似趋势。与AD患者相似,rTg4510转基因小鼠脑内过度磷酸化Tau蛋白(S396)聚集均可见type1类型和type2类型。与AD患者相似,rTg4510转基因小鼠脑内小胶质细胞(IBA1)对过度磷酸化Tau蛋白(S396)识别敏感。与AD患者脑内过度磷酸化Tau蛋白(S396)伴随出现Aβ斑块(4G8)异常表达不同的是,rTg4510转基因小鼠脑内过度磷酸化Tau蛋白(S396)未伴随出现Aβ斑块(4G8)异常表达。结论rTg4510转基因小鼠将是用于研究AD相关磷酸化Tau蛋白致病机制和药物研发等方面可用的动物模型。

ELISA法检测野生和驯养长爪沙鼠携带病毒情况

目的检测野生长爪沙鼠和驯养长爪沙鼠的病毒携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学检测北京市地方标准提供依据。方法制备兔抗长爪沙鼠IgG抗体并用辣根酶标记。分别采集银川市、呼和浩特周边地区的野生长爪沙鼠以及长期驯养的长爪沙鼠血清,用间接ELISA进行流行性出血热、淋巴细胞脉络丛脑膜炎等人兽共患病毒及仙台病毒、鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒等啮齿类动物烈性传染病病毒抗体检测,并计算检出率。结果兔抗沙鼠的IgG抗体ELISA法效价1∶64 000以上,满足血清学检测要求。银川地区野生长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体阳性(6.0%),而呼和浩特和驯养的则未检出;但呼和浩特地区的野生长爪沙鼠有淋巴脉络丛脑膜炎病毒抗体检出(13.3%),而银川和驯养长爪沙鼠则没有。仙台病毒抗体的检出率为呼和浩特地区的最低(40.0%),宁夏和驯养动物相等(53.3%)。结论两地区野生长爪沙鼠和人工驯养长爪沙鼠病毒抗体的检出种类和检出率有所不同,在制定北京市地方标准时要综合考虑。

维生素E对TCDD染毒小鼠白细胞介素和T细胞亚群的影响

为研究维生素E(VE)对2,3,7,8四-氯代二苯并-对-二噁英(TCDD)染毒雄性小鼠白细胞介素(IL)和T细胞亚群的影响,我们设计了5个实验组,将40只小鼠随机分为5组,5组动物给予TCDD和维生素E的水平依次为:TCDD 0 ng/kg和VE0 mg/kg、TCDD 100 ng/kg和VE0 mg/kg、TCDD 100 ng/kg和VE20 mg/kg、TCDD 100ng/kg和VE100 mg/kg、TCDD 100 ng/kg和VE500 mg/kg。灌胃7周后取其血液和脾脏,用酶联免疫法测小鼠血清IL的水平,用流式细胞仪法测定脾脏T淋巴细胞亚群的变化。结果表明:TCDD染毒组小鼠血清IL-1α水平明显高于对照组;VE20 mg/kg和100 mg/kg的两组,其血清IL-1α水平均明显低于染毒组;而VE500 mg/kg组,其血清IL-1α水平与染毒组间差异没有统计学意义;TCDD染毒组小鼠血清IL-2水平明显低于对照组;VE100 mg/kg和500 mg/kg两组,其血清IL-2水平明显高于染毒组;TCDD染毒组CD4+T淋巴细胞百分比明显低于对照组;给予VE的三组,其脾CD4+T淋巴细胞百分比与TCDD染毒组相比有升高的趋势,但没有统计学意义;TCDD染毒组小鼠脾CD8+T淋巴细胞百分比明显高于对照组;VE为100 mg/kg组,其脾CD8+T淋巴细胞百分比明显低于染毒组和VE20 mg/kg两组;VE500 mg/kg组,其脾CD8+T淋巴细胞百分比明显低于染毒组。表明TCDD能导致机体白细胞介素分泌的紊乱以及脾脏T淋巴细胞亚群的变化,而适当剂量的VE对TCDD所致的毒性有拮抗作用。