超高压力对流感病毒生物活性的影响

目的研究超高压力对流感病毒影响。方法通过血凝素、感染性和RP-PCR等检测不同压力处理后流感病毒的变化。结果250MPa处理1h病毒感染力下降了4～5log10TCID50／ml，血凝效价变化不大；350MPa以上，病毒感染性完全消失，血凝效价也明显降低。但400MPa压力下仍可扩增出流感病毒组。结论流感病毒在250MPa压力下血凝素抗原损伤小，基因耐高压能力较强。

人巨细胞病毒pp65在脑胶质瘤中的表达

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)pp65在脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的相关性。方法手术获取64例脑胶质瘤标本(低级别胶质瘤27例,高级别胶质瘤37例),免疫组织化学方法检测肿瘤组织中HCMV pp65蛋白表达,ELISA法检测高级别胶质瘤患者和正常人各20例外周血中HCMV-IgG抗体水平。结果 pp65在高级别胶质瘤中的阳性表达率明显高于低级别胶质瘤(97.3%和22%),强阳性表达率以胶质母细胞瘤最高;高级别胶质瘤患者血清HCMV-IgG水平明显高于正常人群。结论 HCMV pp65在不同级别的脑胶质瘤中均有表达,且表达水平与肿瘤恶性程度相关。

Ⅱ型登革病毒DNA疫苗在小鼠体内免疫保护作用与性别相关性的研究

目的探讨Ⅱ型登革病毒DNA疫苗pVAX1-D2ME对不同性别小鼠的免疫保护效果的差异。方法利用pVAX1-D2ME质粒分别免疫雄性和雌性小鼠,每次免疫前及末次免疫后取其血清,检测体液免疫应答的各项指标;并于末次免疫后两周攻毒,观察小鼠的生存率。结果不同性别小鼠对该疫苗均产生良好的免疫应答,免疫应答具有Th1趋向性;且免疫后不同性别小鼠均可抵抗致死量病毒的攻击,生存率为100%。结论小鼠性别对免疫应答和免疫保护无明显影响,pVAX1-D2ME免疫小鼠能够诱导产生良好的免疫应答和免疫保护作用。

基孔肯亚病毒垂直传播的研究进展

基孔肯亚病毒(chikungunya virus,CHIKV)是一种由埃及伊蚊和白纹伊蚊传播的蚊媒病毒,属于披膜病毒科甲病毒属。从2005年起,CHIKV在非洲、亚洲和美洲多次发生大规模疫情,其感染率较高,能引起发热性疾病,常伴有关节炎,关节炎症状可维持数月甚至数年,对患者生活和社会生产造成极大影响。除了蚊媒传播,妊娠期母体感染CHIKV还可通过垂直传播引起胎儿或新生儿感染,甚至造成新生儿严重神经系统后遗症。本文将从垂直传播案例、临床表现、可能的方式及机制、动物模型、诊断、预防和治疗等方面进行综述,以期为CHIKV及其垂直传播的深入研究提供帮助。

登革2型病毒与整合素β3相互作用机制的研究

目的观察登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)感染后及转染DV2病毒蛋白的质粒后,EA.hy926细胞中整合素β3表达规律及表达量的变化,以初步明确DV2与整合素β3的相互作用的可能机制。方法经噬斑法测定DV2在EA.hy926中的增殖规律,并通过间接免疫荧光染色检测DV2感染后及病毒蛋白质粒转染后整合素β3表达量的变化。结果 DV2能够在EA.hy926细胞中增殖,在感染复数为1的条件下,最高病毒滴度为105pfu/ml,出现在感染后第5天,以后随着感染时间延长病毒滴度逐渐下降。DV2感染后整合素β3的表达量增高,且随感染时间的延长有渐增趋势;转染DV2E蛋白可诱导整合素β3的表达,且E蛋白与整合素β3有明显的共存,而DV2的其他病毒蛋白无明显诱导整合素β3表达的作用,且与之无明显共存。结论 DV2感染可诱导EA.hy926细胞整合素β3的表达,而E蛋白可能是DV2与整合素β3相互作用、进而介导病毒进入细胞的重要分子。

登革热病毒SCID-LO2人鼠嵌合模型的建立与评价

目的构建登革热病毒(DENV)感染的小动物模型,为阐明其致病机制提供实验材料。方法向严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人正常肝细胞(LO2)构建"人鼠嵌合体"动物模型,进而腹腔注射DENV,通过检查病毒在体内分布和主要器官的组织学改变,对DENV感染的动物模型进行评价。结果 SCID小鼠成功移植LO2,并且嵌合小鼠感染DENV后出现病毒血症及严重的器官损伤等表现,但无后肢麻痹等无关症状。结论成功构建了SCID-LO2人鼠嵌合模型,嵌合小鼠能够支持DENV复制,并表现出部分人类感染DENV的临床症状,该小鼠感染模型为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料。

登革病毒共有序列候选DNA疫苗的免疫原性和保护性研究

目的研究登革病毒(Dengue virus,DENV)共有序列候选DNA疫苗pVAX1-cE80在小鼠体内的免疫原性及其保护作用。方法首先利用pVAX1-cE80 DNA免疫BALB/c小鼠,通过ELISA和噬斑减少中和试验(plaque reduction neutralization test,PRNT)分别检测免疫后小鼠血清中抗登革病毒的4种血清型(dengue virus serotype 1-4,DENV1-4)IgG抗体和中和抗体(neutralizing antibody,nAb)效价;利用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测小鼠脾细胞分泌DENV1-4特异性Th1/Th2型细胞因子的能力;通过攻毒试验评价疫苗对DENV1-4感染的保护作用。结果接种疫苗的小鼠可产生针对DENV1-4的四价抗体,其中抗DENV2抗体水平最高,IgG抗体和nAb效价分别为1∶1086和1∶120;免疫后小鼠脾细胞在DENV1-4抗原刺激下均可分泌较高水平的IFN-γ和IL-4;疫苗免疫可为小鼠提供针对DENV1-4的部分保护作用。结论单一共有序列登革病毒候选DNA疫苗可诱导小鼠产生四价体液免疫反应和细胞免疫反应,并为小鼠提供部分保护作用,为登革病毒共有序列疫苗的研发奠定了基础。