基于登革病毒prME序列mRNA候选疫苗的构建与评价

目的利用mRNA结合脂质纳米颗粒(lipid nanoparticle,LNP)包裹递送技术,设计构建mRNA疫苗,以期为登革热疫苗研发提供新思路。方法以DENV1 Hawaii株prME序列为靶基因,体外合成D1ME-mRNA,利用流式细胞术及免疫荧光染色鉴定其在细胞内表达后,用LNP包裹mRNA,制备D1ME mRNA-LNP候选疫苗;利用C57BL/6小鼠模型,肌肉注射10μg进行二剂次免疫接种,评价疫苗的保护作用及免疫原性。结果流式细胞术及免疫荧光检测证实D1ME-mRNA在细胞内高效表达;经颅内注射DENV1攻毒后,疫苗组小鼠体重下降幅度明显小于对照组,且无明显临床症状;疫苗组小鼠的中和抗体平均效价为1∶20,高于对照组;疫苗组小鼠的脾淋巴细胞经特异性抗原刺激可分泌高水平的Th1细胞相关的细胞因子IFN-γ、TNF-α。结论本研究成功构建了针对DENV1的mRNA-LNP疫苗,二剂次免疫接种可诱导小鼠产生DENV1特异性的、以Th1型细胞免疫为主的免疫应答,并可为小鼠提供保护作用以抵抗DENV1的感染。