调肝颗粒剂防治大鼠肝癌前病变的病理研究

目的观察肝癌前病变的病理形态学特点,并探讨调肝颗粒剂的防治效果。方法本实验用黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌前病变模型,取肝组织进行病理组织形态及超微结构的观察,并对调肝颗粒剂阻断肝癌前病变的作用进行分析。结果调肝颗粒剂能明显减少模型鼠肝细胞异型性增生灶,对肝细胞核的变异及内质网脱颗粒等有一定的防止或阻断作用。结论调肝颗粒剂对大鼠肝癌前期病变形成有较明显的抑制作用。

医学专业英语教学模式改革的几点建议

医学英语是针对目前国际医学界形式开设的一门重要医学教育课程,探讨了医学英语教学过程中存在的一些问题,同时借鉴PBL教学理念,提出以小课为单位进行专题式教学,以英文综述为评估手段对医学英语教学模式进行改进的建议。

兔不稳定斑块的^(18)F-FDG PET/CT显像及其病理学检测

目的探讨18氟标记的脱氧葡萄糖(18F-FDG)PET/CT无创检测不稳定斑块的可行性。方法用新西兰雄性大白兔建立动脉粥样硬化模型,注射18F-FDG后行腹主动脉PET/CT成像,离体动脉数码照相,测定动脉片段的放射强度,选取不稳定和稳定斑块各30块,比较其放射强度,采用免疫组化方法观察斑块中的巨噬细胞和平滑肌细胞并计数。结果PET/CT活体成像可见实验组沿腹主动脉走行的不均匀的放射性分布,与离体动脉的斑块分布基本一致;不稳定斑块组的靶-非靶比值和巨噬细胞数明显高于稳定斑块组(P<0.01),而平滑肌细胞数明显降低(P<0.01);靶-非靶比值与斑块中的巨噬细胞数呈正相关(r=0.815,P<0.01),而与平滑肌细胞数呈负相关(r=-0.684,P<0.01)。结论18F-FDGPET/CT无创检测实验性不稳定斑块具有一定的可行性。

实验性急性出血坏死性胰腺炎早期肺损伤的超微病理学研究

目的:通过观察实验性急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)早期肺组织的超微病理变化,探讨AHNP肺损伤的发生机制。方法:雄性大鼠,胰胆管内逆行注射5.0%Na-Tc溶液,建立AHNP模型,随机分为3组(给药后30 min、3h、6 h),光镜和电镜下观察AHNP早期肺组织的病理变化。结果:光镜下,实验大鼠胰胆管内注射Na-Tc后30 min出现肺水肿、炎细胞浸润及局灶性肺不张;给药后3 h肺小血管管腔内有血栓形成;给药后6 h可见大片肺不张及炎细胞浸润增多。电镜下,给药后30 min可见肺泡毛细血管内皮细胞线粒体肿胀,管腔内红细胞瘀滞,以及Ⅱ型肺泡上皮细胞板层小体排空和肺泡腔显著狭窄;给药后3 h肺泡毛细血管内皮细胞线粒体严重肿胀,管腔内可见微血栓形成;给药后6 h肺泡腔内可见红细胞和肺泡巨噬细胞,Ⅱ型肺泡上皮细胞板层小体排空明显增多。结论:AHNP实验大鼠肺泡毛细血管内皮细胞广泛受损并诱发血管内微血栓形成是导致肺微循环障碍、引起早期肺损伤的重要原因。

脑动静脉畸形血管壁病理特点及血管内皮素-1在其中的表达

目的观察脑动静脉畸形(arteriovenous malformations,AVMs)血管壁病理结构特点,半定量检测AVMs血管壁中内皮素-1(endothelin-1,ET-1)以探讨其与AVMs破裂的关系。方法对31例AVMs患者(未破裂型15例,破裂型16例)手术切除的畸形血管内壁进行Masson常规病理染色,观察对照组(其他颅脑手术中切除的正常血管组织)、未破裂型和破裂型AVMs血管壁结构及内皮完整度情况。应用免疫组织化学染色方法半定量分析血管壁内ET-1分布.比较三组之间的差异。结果 AVMs未破裂组血管壁内皮细胞受损,中膜层平滑肌细胞减少,胶原纤维增生;AVMs破裂组血管壁内皮受损严重,平滑肌明显减少,几乎均为胶原纤维所替代。对照组、未破裂组和破裂组的ET-1平均灰度值依次为0.167±0.004、0.196±0.007和0.231±0.012,破裂组ET-1含量高于未破裂组(P=0.019)和对照组(P<0.001).未破裂组ET-1含量高于对照组(P=0.001)。结论 AVMs血管壁存在损伤,破裂型AVMs血管壁损伤更为严重。ET-1在破裂型AVMs血管壁中高表达。

血浆同型半胱氨酸水平对非ST段抬高急性冠脉综合征患者围术期心肌梗死及预后的影响研究

背景冠状动脉慢复流(CSRF)/无复流(no-RF)是经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的重要并发症,而目前对其发病机制及临床预后研究较少。目的观察血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平对PCI术中CSRF/no-RF现象、围术期心肌梗死(PMI)及预后的影响。方法选取2013年1月—2015年5月在首都医科大学附属复兴医院心内科及中国医学科学院附属阜外医院冠心病中心择期行PCI治疗的非ST段抬高急性冠脉综合征(NSTE-ACS)患者269例。根据血浆Hcy水平将所有患者分为Hcy正常组(<15μmol/L,n=172)和Hcy升高组(≥15μmol/L,n=97)。比较两组CSRF/no-RF、PMI发生率及PCI术后1年内主要不良心血管事件(MACE)发生率、全因死亡率。结果两组性别、年龄、吸烟率、高血压发生率、糖尿病发生率和总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平及阿司匹林、氯吡格雷/替格瑞洛、β-受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)/血管紧张素受体拮抗剂(ARB)、他汀类药物使用率间差异无统计学意义(P>0.05),而冠状动脉病变情况间差异有统计学意义(P<0.05)。Hcy升高组CSRF/no-RF、PMI发生率均高于Hcy正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组单支病变MACE发生率间差异无统计学意义(P>0.05);而Hcy升高组双支病变、多支病变及总体MACE发生率高于Hcy正常组,差异有统计学意义(P<0.05);Hcy升高组总体全因死亡率高于Hcy正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高血浆Hcy水平对NSTE-ACS患者术中CSRF/no-RF、PMI和预后有较为重要的影响。

大鼠脑血栓模型的实验研究

目的:通过实验建立能快速评价溶栓药疗效并与临床接近的实验动物模型。方法:应用导管从大鼠颈外动脉逆行至颈总动脉,注入已形成血栓。于手术后3、6、10、18h观察行为障碍并评分,分别取脑观察梗死灶及脑组织病理改变。结果:该模型行为障碍和脑梗死体积较为恒定,光镜下6h脑组织神经细胞开始肿胀,10h、18h病变严重。结论:该模型简便易行,对动物损伤小,重复性较好,可为脑缺血发病机制研究及临床脑血栓的治疗研究提供一种有效手段。

气体信号分子硫化氢和一氧化氮在代谢综合征大鼠心脏保护中的相互作用

目的研究硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系和一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系在代谢综合征(MS)大鼠心脏功能损伤中的作用及相互关系。方法 41只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、模型+H2S供体组、模型+CSE抑制剂组、模型+NOS抑制剂组、模型+NO供体组。对照组普通饲料喂养16周,其余5组高脂饲料喂养16周复制MS动物模型,随后4周对照组和模型组注射生理盐水、其余4组分别注射硫氢化钠(56μmol/kg)、炔丙基甘氨酸(37.5 mg/kg)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(18 mg/kg)、L-精氨酸(500 mg/kg)进行干预后,测定肥胖指标、血糖、血脂;采用生物信号采集系统检测心功能;比色法检测血浆、心肌H2S及NO含量,心肌CSE、结构型NOS(cNOS)及诱导型NOS(iNOS)活性;RT-PCR方法检测心肌CSE及内皮型NOS(eNOS)表达的变化。结果与对照组相比,模型组各时间点血糖、血脂及肥胖指数升高,心功能降低(P<0.05);血浆和心肌H2S、NO含量,心肌CSE、cNOS活性,CSE、eNOS表达降低,心肌iNOS活性升高(P<0.05)。与模型组相比,模型+CSE抑制剂组血浆、心肌NO含量,心肌cNOS、iNOS活性增加,eNOS表达增强(P<0.05);模型+H2S供体组心肌cNOS、iNOS活性和eNOS表达均降低(P<0.01),心功能改善(P<0.05);模型+NOS抑制剂组血浆、心肌H2S含量,心肌CSE表达均升高(P<0.05);模型+NO供体组心肌CSE活性、CSE表达降低(P<0.05),心功能改善(P<0.05)。结论 H2S/CSE和NO/NOS体系在MS大鼠心脏中呈相互负性调节作用。外源性补充H2S和NO对MS大鼠心脏功能有一定保护作用。

同型半胱氨酸与冠状动脉慢血流的相关性

目的分析冠状动脉慢血流(CSF)患者同型半胱氨酸(Hcy)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)的水平及其相关性。方法60例因胸痛就诊,行冠状动脉造影(CAG)显示慢血流但冠状动脉未见明显狭窄患者为CSF组,另将60例同期行CAG未见明显狭窄且血流正常的患者作为对照组。检测两组Hcy、hs-CRP水平及其相关性。结果 CSF组Hcy及hs-CRP水平均明显高于对照组(P<0.01);冠状动脉校正的心肌梗死溶栓治疗(TIMI)血流分级(CTFC)与血清Hcy水平呈正相关(r=0.328,P<0.05)。结论CSF患者Hcy呈较高水平,可能与CSF的发生机制相关。

缺氧后处理中CYP2J3/EETs系统对心肌凋亡的影响

目的:观察缺血后处理中心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)对心肌细胞凋亡的调节作用机制。方法:取Wistar乳鼠(12-24 h)心脏做原代心肌细胞培养。实验分为7组:对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处理组、CYP2J3转染组、空质粒组、6-(2-炔丙基氧苯基)己酸(PPOH,一种CYP2J3抑制剂)组、二甲基亚砜(DMSO)溶剂组。除对照组外,其它各组均进行缺氧/复氧处理。用MTT法检测心肌细胞活力,高压液相色谱法检测心肌细胞培养液中11,12-EET浓度,Western blotting检测心肌细胞中caspase-3蛋白的表达,caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3蛋白的活性。结果:缺氧后处理组心肌细胞活力和11,12-EET浓度明显高于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组比后处理组明显增高(P<0.01),PPOH组比后处理组明显下降(P<0.01)。后处理组caspase-3蛋白的表达及活性低于缺氧/复氧组(P<0.01),CYP2J3转染组caspase-3蛋白表达及活性低于后处理(P<0.01),而PPOH组caspase-3蛋白表达及活性高于缺氧后处理组(P<0.01)。结论:在缺氧后处理中CYP2J3/EETs可能通过抑制caspase-3蛋白的表达及活性来影响细胞凋亡,从而对心肌起保护作用。

锝标记抗D-二聚体单克隆抗体对兔早期股静脉血栓的放射免疫显像研究

目的通过动物实验探讨锝标记抗D-二聚体单抗在早期股静脉血栓放射免疫显像中的应用。方法选取新西兰大白兔8只,制成股静脉血栓模型。静脉注射[99mTc]标记的抗D-二聚体单抗4D30,进行活体γ显像。分别观察血栓部位和对侧相应部位的放射性分布,计算放射性比值。显像完毕后取血栓及周围肌肉组织,称重后测定单位质量的放射性计数及比值;取心、肝、脾、肺、肾及膀胱组织,观察病理学改变。结果股静脉血栓形成6h内,注入显像剂后10min,血栓开始显像,30min时血栓显像清晰。血栓/血液和血栓/周围肌肉单位质量放射性比值分别为252±026,520±065。各器官均未见明显病理学改变。结论[99mTc]-4D30用于早期血栓性疾病的放射免疫显像有一定的可行性。

缺血/再灌注损伤对大鼠心肌内源性可溶性糖基化终末产物受体分泌的影响

目的观察在体大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)及离体培养心肌细胞单纯缺氧(hypoxia,H)或缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤时,血浆或培养基中可溶性糖基化终末产物受体(soluble receptor for advanced glycationend-products,sRAGE)含量的变化,了解缺血/再灌注对内源性sRAGE的影响。方法采取结扎冠状动脉左前降支的方法复制在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,分别测定缺血前10 min(BI-10)、缺血45 min时(I-45)、再灌注60 min时(R-60)、再灌注120min时(R-120)和再灌注180 min时(R-180)的左室功能指标,包括心率(heart rate,HR)、左室收缩末压(left ventricular end systolicpressure,LVESP)、左室内压最大上升/下降速率(the maximum rate change of left ventricular pressure,±LVdp/dtmax);采用TTC染色法测定心肌梗死范围;采用酶联试剂盒测定血浆sRAGE浓度。培养乳鼠心肌细胞,复制缺氧/复氧损伤(H/R)模型,测定培养基sRAGE浓度和应用比色法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活力。结果与假手术(sham)组相比较,I/R组I-45、R-60、R-120、R-180各时间点的HR、LVESP、±LVdp/dtmax均降低;在I/R组内,与BI-10相比,I-45、R-60、R-120、R-180各时点的sRAGE含量均降低。与control组相比,离体心肌细胞H(H/R)组的sRAGE含量差异无统计学意义。结论 I/R损伤血浆sRAGE含量降低,这可能与心肌缺血/再灌注损伤有关;而内源性sRAGE改变可能不是心肌细胞源性的。

11,12-EET心脏保护过程中NOS及ERK的交互作用

目的观察胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase 1/2,ERK1/2)抑制剂对11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acid,11,12-EET)引起的结构型一氧化氮合酶(structural nitric oxide synthase,sNOS)变化的影响,了解NOS与ERK1/2在11,12-EET心脏保护中的作用方式。方法采用冠状动脉缺血60 min再灌注30 min的方法复制大鼠心肌缺血/再灌注模型。实验分为4组:缺血再灌注组(ischemia/reperfusion,I/R);假手术组(Sham);11,12-EET缺血再灌注组(EET+I/R);11,12-EET缺血再灌注加PD098059组(EET+I/R+PD)。观察缺血60 min再灌注30 min时心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+dp/dt max)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-dp/dt max);采用化学比色法观察大鼠心肌组织sNOS活性。结果 I/R组的±dp/dtmax均低于Sham组及EET+I/R组(P<0.01);EET+I/R+PD组均低于EET+I/R组的±dp/dt max(P<0.01)。I/R组心肌sNOS低于Sham组(P<0.01)及EET+I/R组(P<0.01);EET+I/R组高于EET+I/R+PD组(P<0.01)。结论 11,12-EET对心功能的保护作用可能通过上调ERK进而增加sNOS的表达来实现。

槲芪散对小鼠酒精性肝损伤的干预作用

目的观察高度白酒和红葡萄酒对肝脏的不同作用;分别从能量代谢和氧化应激两个方面阐述高度白酒可引起小鼠的酒精性肝损伤;同时探讨槲芪散治疗酒精性肝损伤的药理学机制。方法将昆明种雄性小鼠随机分为4组,正常组、红葡萄酒组、白酒模型组和槲芪散治疗组。造模14 d后,取血,采用酶标仪比色法测定血清中丙二醛(malondialdehydehyde,MDA)的含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性;取肝组织,进行HE染色,过碘酸-雪佛氏染色(schiffperiodicacidshiff,PAS染色);酶组织化学染色法检测葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P)、琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)以及ATP酶(adenosinetriphosphatase,ATPase)的活性。结果白酒模型组MDA含量显著升高(P<0.05),抗氧化酶类SOD和CAT的活性显著减低(P<0.05);能量代谢的相关酶类ATPase、SDH以及G-6-P活性下降;红葡萄酒组HE染色显示红葡萄酒对肝脏无损伤。槲芪散能够显著降低因高度白酒造成的血清MDA含量(P<0.05),提高抗氧化酶SOD(P<0.05)和CAT(P<0.05)的活性;同时能量代谢相关酶的活性提高以及肝糖原储备增加。结论实验表明长期大量酒精摄入能够造成酒精性肝损伤,而红葡萄酒对肝脏无损伤;槲芪散对酒精性肝损伤有明显的干预作用。

尿激酶免疫脂质体对肺栓塞家兔的靶向溶栓治疗作用

目的:以鼠抗人纤维蛋白D-二聚体单克隆抗体(DDmAb)为靶向装置,制备尿激酶(UK)的血栓靶向脂质体即尿激酶免疫脂质体,并在兔急性肺动脉栓塞模型上观察其早期溶栓效果。方法:新西兰大白兔40只,随机分为5组:TBS组(TBS缓冲液,阴性对照组)、UK组(15×104IU/kgUK,阳性对照组)、Lip组(5×104IU/kgUK的Lip-UK)、Ab组(5×104IU/kgUK的Ab-Lip-UK)和2Ab组(5×104IU/kgUK但DDmAb用量为Ab组2倍,2Ab-Lip-UK)。各组成功建立急性肺动脉栓塞模型后,分别以TBS缓冲液、UK、Lip-UK、Ab-Lip-UK和2Ab-Lip-UK各30mL经股静脉输入,进行兔体内溶栓实验,并观察右心室收缩压(RVSP)和右心室舒张压(RVDP)在1h内随时间变化的情况。实验结束后,处死动物并取材,观察肺动脉内残留栓子数及心、肝、肾的肉眼和组织学变化。结果:TBS组RVSP在溶栓后1h内无显著变化,UK组、Lip组、Ab组、2Ab组RVSP分别于溶栓后30min、40min、30min、20min后显著下降。TBS组、UK组、Lip组、Ab组、2Ab组肺内残留栓子数分别为:(4.0±0,2.4±0.9,3.1±0.6,2.4±0.9,1.9±0.6)个。各组肺均有不同程度的淤血、水肿表现。HE染色除UK组心、肝、肾有出血外,其余组未见出血。结论:以2Ab-Lip-UK这种具有双重靶向作用的药物进行溶栓治疗是肺动脉栓塞的一种理想溶栓方式,可缩短有效溶栓时间,疗效好且安全。

Notch和NF-κB信号通路与心肌重塑相关性研究进展

心肌重塑是心血管疾病的共同病理过程,可见于高血压、动脉粥样硬化、心肌缺血、心肌病、心力衰竭等,是心血管疾病发生、发展和维持的病理基础。研究发现有多重因素参与心肌重塑的发生发展,同时这些因素相互促进,共同维持心肌重塑的发展。 Notch信号通路由一组在进化上高度保守的细胞膜配体、受体及下游分子组成。细胞间受体配体作用可激活Notch信号转导过程,从而直接调节基因转录,使细胞基因表达受相邻细胞调控。

pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体的构建及在大鼠心肌细胞的表达

目的克隆大鼠CYP2J3基因,与pcDNA3.1(+)真核表达质粒载体连接,转染大鼠心肌细胞检测其表达。方法提取大鼠肝脏组织总RNA,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和重叠延伸聚合酶链式反应(OE-PCR)的方法扩增大鼠CYP2J3基因,与双酶切的pcDNA3.1(+)连接,构建pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体。转染大鼠心肌细胞,用RT-PCR的方法鉴定其在大鼠心肌细胞的表达。结果得到CYP2J3基因全长序列和真核表达载体pcDNA3.1(+)-CYP2J3。RT-PCR结果显示,转染pcDNA3.1(+)-CYP2J3后的大鼠心肌细胞CYP2J3基因有稳定表达。结论克隆大鼠CYP2J3基因、pcDNA3.1(+)-CYP2J3真核表达载体构建及在大鼠心肌细胞的表达均获成功,为进一步研究CYP2J3基因在细胞中的功能奠定了基础。