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α-突触核蛋白通过上调内吞蛋白Rab5B促进海马神经元膜表面NMDA受体内在化
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作者 陈敏 于文娇 +3 位作者 李昕 杨巍巍 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期863-867,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptors,NMDA)受体的调控及机制。方法在原代海马神经元,通过细胞外添加基因重组α-Syn和基因过表达α-Syn方法实现细胞内α-Syn含量增高,... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptors,NMDA)受体的调控及机制。方法在原代海马神经元,通过细胞外添加基因重组α-Syn和基因过表达α-Syn方法实现细胞内α-Syn含量增高,基因敲减技术抑制Rab5B,Western blotting法分析NMDA受体NR1亚单位和Rab5B表达。结果神经元内α-Syn含量增高可以使Rab5B表达上调,并降低膜表面NR1的水平;抑制Rab5B表达可有效反转α-Syn所致的膜表面NR1水平下降。结论α-Syn通过上调Rab5B促进NMDA受体的内在化。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 NMDA受体 内在化 Rab5B 海马神经元
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α-突触核蛋白促进原代神经元及转基因小鼠神经细胞表面NMDA受体的内在化
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作者 陈予东 杨巍巍 +3 位作者 李昕 王鹏 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第5期596-600,共5页
目的在原代培养神经元及转基因动物水平上,研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对神经细胞表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的影响及其机制。方法免疫荧光标记法和Western blotting测定NMDA受体(NMDA recept... 目的在原代培养神经元及转基因动物水平上,研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对神经细胞表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的影响及其机制。方法免疫荧光标记法和Western blotting测定NMDA受体(NMDA receptor,NMDAR)和Rab5B质量分数。Rab5B反义寡核苷酸抑制Rab5B基因表达。以原代培养神经细胞及转基因小鼠为模型,观察α-Syn蛋白增多对细胞膜NMDAR质量分数的影响以及Rab5B的作用。结果在细胞及动物水平,α-Syn明显上调Rab5B表达,促进NMDAR的内在化。而抑制Rab5B表达可消除α-Syn致NMDAR的内在化。结论α-Syn通过上调Rab5B的表达促进NMDAR的内在化。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 转基因小鼠 原代神经元 N-甲基-D-天门冬氨酸 内在化
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α-突触核蛋白通过Rab5B下调海马神经元膜表面NMDA受体含量及其介导的Ca^(2+)内流和内向电流 被引量:2
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作者 于文娇 杨巍巍 +3 位作者 李昕 李旭冉 陈敏 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期868-873,共6页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对原代海马神经元膜表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体含量和功能的影响及其机制。方法细胞外添加基因重组α-Syn,使其进入原代培养神经元细胞内,观察敲减Rab5B基因... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)对原代海马神经元膜表面N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体含量和功能的影响及其机制。方法细胞外添加基因重组α-Syn,使其进入原代培养神经元细胞内,观察敲减Rab5B基因前后神经元膜表面NMDA受体(NMDAR)和Rab5B表达的变化;NMDA激活NMDAR,活细胞工作站测定神经元Ca^(2+)内流变化,全细胞膜片钳记录内向跨膜电流变化。结果α-Syn增加神经元Rab5B的表达,减少膜表面NMDAR含量,并因而抑制NMDA引起的Ca^(2+)内流及内向跨膜电流;敲减Rab5B可逆转α-Syn对NMDAR的下膜作用及功能的影响。结论α-Syn通过上调Rab5B而下调海马神经元膜表面NMDAR含量及其介导的Ca^(2+)内流及内向电流。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 NMDA受体 Rab5B 神经元 海马
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蛋白磷酸酶2A活力增高减轻α-突触核蛋白引起的SK-N-SH细胞凋亡 被引量:2
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作者 杨巍巍 杨慧 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第6期835-839,共5页
目的观察蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)活力在α-突触核蛋白(α-Syn)引起的细胞凋亡中的作用。方法在SK-N-SH细胞中瞬时转染空载(myc)和α-Syn质粒,免疫荧光化学方法鉴定基因表达情况。Western blotting法和PP2A酶活力检... 目的观察蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)活力在α-突触核蛋白(α-Syn)引起的细胞凋亡中的作用。方法在SK-N-SH细胞中瞬时转染空载(myc)和α-Syn质粒,免疫荧光化学方法鉴定基因表达情况。Western blotting法和PP2A酶活力检测试剂盒检测PP2A磷酸化水平及酶活力。TUNEL染色和MTT法检测各组细胞死亡情况。结果过表达α-Syn可致磷酸化PP2A(pPP2Ac)水平显著增高及活力降低,同时导致细胞凋亡增多和细胞活力降低。PP2A激动剂C2-ceramide可显著逆转α-Syn所致细胞凋亡。结论 PP2A活力增高可减轻α-Syn过表达引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 蛋白磷酸酶2A 帕金森病 凋亡
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食蟹猴脑与结肠中寡聚化和磷酸化α-突触核蛋白的增龄性变化的相关性分析
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作者 杨巍巍 李昕 +1 位作者 李旭冉 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期874-878,共5页
目的研究寡聚化和磷酸化α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)在食蟹猴结肠和脑中的增龄性变化及其相关性。方法ELISA方法检测寡聚化和磷酸化α-Syn在不同年龄段食蟹猴结肠与脑中不同部位含量的变化,分析结肠和脑中寡聚化和磷酸化α-Syn... 目的研究寡聚化和磷酸化α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)在食蟹猴结肠和脑中的增龄性变化及其相关性。方法ELISA方法检测寡聚化和磷酸化α-Syn在不同年龄段食蟹猴结肠与脑中不同部位含量的变化,分析结肠和脑中寡聚化和磷酸化α-Syn含量变化的相关性。结果寡聚化与磷酸化α-Syn含量随年龄增加而增加,其中老年猴与青年及中年猴比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结肠中的寡聚化和磷酸化α-Syn水平与颞叶、海马、纹状体和丘脑中的水平有相关性。结论食蟹猴结肠和脑中寡聚化和磷酸化α-Syn含量随老化而增加,结肠和脑中寡聚化和磷酸化α-Syn含量变化呈正相关。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 结肠 食蟹猴 老化
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不同亚型的帕金森病及多系统萎缩患者血浆α-突触核蛋白寡聚体浓度分析 被引量:6
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作者 宋启晗 李旭冉 +3 位作者 李昕 杨巍巍 李伟 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第2期212-216,共5页
目的比较不同亚型帕金森病(Parkinson's disease,PD)和多系统萎缩(multiple system atrophy,MSA)患者血浆促进α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的能力。方法选择性别与年龄匹配的健康受试者(Control)、震颤为主型PD(tr... 目的比较不同亚型帕金森病(Parkinson's disease,PD)和多系统萎缩(multiple system atrophy,MSA)患者血浆促进α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)寡聚体形成的能力。方法选择性别与年龄匹配的健康受试者(Control)、震颤为主型PD(tremor dominant,PD-TD)、姿势不稳与步态困难为主型PD(postural instability gait difficulty,PD-PIGD)、小脑萎缩型MSA(MSA of cerebellar type,MSA-C)和混合型MSA(MSA between cerebellar and parkinsonism type,MSA-C+P)患者各10例,抽取血浆,与重组人α-Syn振荡孵育。Western blotting法和ELISA法检测各组α-Syn寡聚体形成量。结果PD和MSA组α-Syn寡聚体形成量显著高于对照组(P<0.05)。虽然PD组α-Syn寡聚体形成量略高于MSA组,但差异无统计学意义。亚型分析显示,α-Syn寡聚体形成量在PD-PIGD组高于PD-TD组(P<0.05),在MSA-C组高于MSA-C+P组(P<0.05)。结论PD与MSA及其不同亚型患者血浆促进α-Syn寡聚体形成的能力不同。 展开更多
关键词 帕金森病 多系统萎缩 Α-突触核蛋白 寡聚体 血浆
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α-突触核蛋白和硝基化α-突触核蛋白在不同年龄段食蟹猴结肠中的表达 被引量:3
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作者 杨斌 杨巍巍 +2 位作者 李昕 刘承伟 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2014年第2期214-218,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)及硝基化α-突触核蛋白(nitratedα-synuclein,n-syn)在不同年龄段食蟹猴结肠中的表达。方法免疫组织化学方法检测α-syn和n-syn在不同年龄段食蟹猴结肠中的表达。免疫荧光双标观察α-syn和n... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)及硝基化α-突触核蛋白(nitratedα-synuclein,n-syn)在不同年龄段食蟹猴结肠中的表达。方法免疫组织化学方法检测α-syn和n-syn在不同年龄段食蟹猴结肠中的表达。免疫荧光双标观察α-syn和n-syn的共定位。结果α-Syn和n-syn在食蟹猴结肠中存在共定位。α-Syn和n-syn在不同年龄段食蟹猴结肠中均有表达,但α-syn和n-syn在老年食蟹猴表达量最高,在青年食蟹猴表达量最低。结论α-Syn和n-syn在食蟹猴结肠中存在共定位,且在老年猴中表达最高。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 硝基化α-突触核蛋白 食蟹猴
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α-突触核蛋白和葡糖脑苷脂酶在食蟹猴不同脑区的表达 被引量:2
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作者 弥娜 刘光伟 +2 位作者 李昕 李尧华 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第1期110-114,共5页
目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)及葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GCase,GBA)在食蟹猴不同脑区的表达。方法 Western blotting方法及免疫组织化学法检测α-Syn和GBA在食蟹猴纹状体和小脑皮质的表达。酶活性分析法检测GB... 目的研究α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)及葡糖脑苷脂酶(glucocerebrosidase,GCase,GBA)在食蟹猴不同脑区的表达。方法 Western blotting方法及免疫组织化学法检测α-Syn和GBA在食蟹猴纹状体和小脑皮质的表达。酶活性分析法检测GBA活性。免疫荧光双重标记法观察α-Syn和GBA的共定位。结果α-Syn和GBA在胞质和神经末梢中存在共定位。α-Syn、GBA在纹状体和小脑部位均有表达,但α-Syn在纹状体表达量高于小脑,而GBA在纹状体表达量低于小脑。此外,纹状体的GBA酶活性低于小脑。结论不同脑区α-Syn、GBA表达量不同,α-Syn表达量与GBA表达量呈反向关系。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 葡糖脑苷脂酶 食蟹猴
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糖尿病患者血浆减少α-突触核蛋白的磷酸化和寡聚化 被引量:1
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作者 郑凇杨 李昕 +4 位作者 杨巍巍 李旭冉 李旭颖 于文娇 于顺 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第6期879-883,共5页
目的研究2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)磷酸化和寡聚化聚集的影响。方法收集首都医科大学宣武医院内分泌科T2D住院患者70例,另收集年龄和性别与之匹配的健康志愿者70例作为对照组。采集... 目的研究2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)患者血浆对α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)磷酸化和寡聚化聚集的影响。方法收集首都医科大学宣武医院内分泌科T2D住院患者70例,另收集年龄和性别与之匹配的健康志愿者70例作为对照组。采集抗凝血,并分离血浆。将基因重组人α-Syn在患者和对照志愿者血浆中振荡孵育,ELISA法检测各组人群血浆中寡聚化和磷酸化α-Syn形成量。结果 T2D患者血浆中寡聚化和磷酸化α-Syn形成量较对照组均有显著降低(P<0.05),且其与年龄有相关性。结论 T2D患者血浆以年龄依赖的方式减少寡聚化和磷酸化α-Syn的形成。 展开更多
关键词 Α-突触核蛋白 2型糖尿病 血浆 磷酸化 寡聚化
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