山茱萸环烯醚萜苷对APP/PS1/tau小鼠脑内阿尔茨海默病样病理变化的作用机制

目的阿尔茨海默病(AD)最典型的病理变化是β-淀粉样蛋白(Aβ)在脑部沉积形成的老年斑和过度磷酸化的tau蛋白聚集导致的神经纤维原缠结(NFT),同时伴随氧化应激、神经炎症、突触损伤、神经元变性或死亡等。本研究利用APP/PS1/tau三转基因(3x Tg)模型小鼠,观察山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对小鼠脑内多种病理变化的影响。方法 16月龄3x Tg模型小鼠每天灌胃给予CIG 100或200 mg·kg-1至18月龄。采用刚果红染色法观察3x Tg小鼠海马中老年斑沉积;Western蛋白印迹法检测tau蛋白在Thr212和Thr217位点的磷酸化水平;免疫组化法观察小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和分布;实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)检测小鼠BDNF转录水平;尼氏染色法观察小鼠海马中尼氏小体的变化。结果 18月龄模型组小鼠与对照组相比,Aβ淀粉样斑块沉积明显增加,而给予CIG 100或200 mg·kg-1均能不同程度降低脑内斑块负荷。模型组小鼠tau蛋白在Thr217位点的磷酸化水平明显升高,而在Thr212位点的磷酸化水平无明显升高;CIG治疗组能明显拮抗tau蛋白在Thr217位点的过度磷酸化。模型组小鼠海马BDNF蛋白和m RNA的水平均降低,CIG能够明显恢复BDNF蛋白和m RNA表达;模型组小鼠海马内尼氏小体数量减少,染色变浅,排列散乱,CIG有增高尼氏体数量的趋势。结论 CIG能够减少Aβ在脑内的沉积和tau蛋白异常过度磷酸化,恢复BDNF在脑内的表达,并且保护神经元。

山茱萸环烯醚萜苷对APP/PS1/Tau三转基因小鼠脑内病理变化的影响

目的利用APP/PS1/Tau三转基因(3×Tg)模型小鼠,观察山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycoside,CIG)对小鼠脑内多种病理变化的影响。方法 16月龄3×Tg模型小鼠灌胃给予100或200 mg·kg^-1·d^-1CIG至18月龄。采用刚果红染色法观察3×Tg小鼠海马中老年斑沉积情况;Western blotting方法检测Tau蛋白在Thr212及Thr217位点的磷酸化水平;应用免疫组织化学法观察小鼠海马中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)的表达和分布;并采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组小鼠BDNF转录水平变化;应用尼氏染色法观察小鼠海马中尼氏小体的变化。结果 18月龄模型组小鼠与对照组相比,Aβ淀粉样斑块沉积明显增加,而给予CIG 100或200 mg·kg^-1·d^-1均能不同程度降低脑内斑块负荷;模型组小鼠Tau蛋白在Thr217位点的磷酸化水平明显升高,而在Thr212位点的磷酸化水平无明显升高,CIG治疗组能明显拮抗Tau蛋白在Thr217位点的过度磷酸化。模型组小鼠海马BDNF蛋白及mRNA的水平均降低,CIG能够明显恢复BDNF蛋白及mRNA的含量;模型组小鼠海马内尼氏小体数量减少、染色变浅、排列散乱,CIG有增高尼氏体数量的趋势。结论 CIG能够减少Aβ在脑内的沉积,Tau蛋白异常过度磷酸化,恢复BDNF在脑内的表达,并且保护神经元。

钙蛋白酶参与tau蛋白过度磷酸化及截断机制研究进展

阿尔茨海默病(AD)是最常见的神经退行性疾病之一,临床表现为认知和记忆功能障碍。从神经病理学的角度来看,这种疾病的特征是细胞外老年斑的积累以及tau蛋白过度磷酸化导致的神经纤维缠结,局部神经元功能障碍和树突的退化。除了上述特征之外,近几十年的研究表明,钙蛋白酶(calpain)在细胞中广泛地被激活,钙蛋白酶的紊乱也是引起AD病理中tau蛋白过度磷酸化的一个重要原因。本文就钙蛋白酶生理特性和在发病过程中钙蛋白酶对蛋白的病理调控机制进行综述。

MicroRNA-181b在多种疾病中的作用机制研究进展

MicroRNA是一大类非编码的小分子RNA，miR．181b是miR．181家族中四个成员之一。近年来的研究发现，miR．181b与多种疾病的发生发展密切相关，有可能作为生物标记物及干预治疗的潜在靶点。现对miR-181b在精神分裂症、神经系统疾病、心血管疾病、恶性肿瘤等疾病中的表达水平及其作用机制的研究进展作一综述，以帮助学者全面了解miR．181b在疾病中的作用，为疾病的临床诊疗提供新的思路和方法。

山茱萸环烯醚萜苷对冈田酸拟阿尔茨海默病细胞模型PP2A催化亚基C磷酸化及其调节酶Src的影响

微管相关蛋白tau的异常过度磷酸化是阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的重要发病机制之一,蛋白磷酸酯酶2A(protein phosphatases 2A,PP2A)能够促进tau蛋白的去磷酸化。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)是本室从山茱萸中提取的主要有效部位。本实验的目的是研究CIG对PP2A活性及其相关调节酶的影响,应用PP2A抑制剂冈田酸(okadaic acid,OA)与人神经母细胞瘤细胞株(SK-N-SH细胞)孵育制备拟AD细胞模型;采用PP2A试剂盒测定细胞内PP2A的活性;应用Western blot方法检测tau蛋白磷酸化、PP2A催化亚基C(PP2Ac)和Src的表达。结果显示:OA与SK-N-SH细胞孵育6 h后,显著增高tau蛋白的磷酸化水平,降低PP2A活性,增高PP2Ac和Src的磷酸化水平。CIG与细胞预孵育24 h能够明显抑制OA模型细胞tau蛋白在Ser 199/Ser 202位点和Ser 396位点的过度磷酸化,恢复PP2A活性,抑制PP2Ac在Tyr 307位点的过度磷酸化和Src在Tyr 416位点的过度磷酸化。提示CIG通过抑制Src在Tyr 416位点的磷酸化降低其活性而抑制PP2Ac的磷酸化,从而恢复PP2A活性,促进tau蛋白的去磷酸化,最终抑制tau蛋白异常过度磷酸化。结果说明CIG可能有利于治疗AD。