山茱萸环烯醚萜苷对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及脑组织病理变化的影响

目的观察山茱萸环烯醚萜苷对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和脑组织病理变化的影响,探讨其相关机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组和山茱萸环烯醚萜苷低、中、高剂量组。采用永久性双侧颈总动脉结扎(2VO)手术造模,术后6 h开始灌胃给药,每日1次,共3个月。Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力,物体识别实验评价大鼠识别记忆能力。免疫组化染色检测脑组织存活神经元和胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达。结果永久性2VO术后3个月,模型组大鼠逃避潜伏期延长,识别指数降低,海马和大脑皮层Neu N阳性神经元存活数减少,ChAT表达降低;与模型组比较,山茱萸环烯醚萜苷各剂量组大鼠逃避潜伏期缩短,识别指数升高,海马和大脑皮层Neu N阳性神经元存活数增多,海马ChAT表达升高。结论山茱萸环烯醚萜苷通过保护神经元和促进ChAT表达从而改善VD大鼠的认知功能障碍。

PEG-胆固醇双重修饰PBCA纳米粒脑靶向机制

目的中枢神经系统疾病目前存在的主要问题是血脑屏障(BBB)通透性的问题,本实验期望通过制备PEG-胆固醇双重修饰PBCA纳米粒,提高难透过BBB的中枢神经系统疾病的治疗及早期诊断药物的治疗作用,并对其经过BBB进入脑组织的机制进行探讨。方法采用乳化聚合法制备双重修饰PBCA纳米粒并对其理化特性进行评价。(1)双重修饰PBCA纳米粒体内药动学及脑组织分布研究:实验前12小时大鼠进行颈静脉插管手术。实验时于插管处给予原药溶液,胆固醇单修饰及PEG-胆固醇双重修饰PBCA纳米粒。给药后不同时间点取血200μL,化学/发光分析仪测定血液中香豆素-6的含量。大鼠尾静脉分别给予原药溶液、胆固醇单修饰及PEG-胆固醇双重修饰PBCA纳米粒。给药后不同时间点处死大鼠,取脑组织测定香豆素-6的含量。(2)双重修饰PBCA纳米粒体外细胞摄取及转运机制研究:采用b End.3细胞模型(永生化小鼠脑内皮细胞株)评价了载体及纳米粒的体外细胞毒性,同时选用了巨胞饮介导的内吞作用(细胞松弛素D),网格蛋白介导的内吞作用(氯丙嗪),小窝蛋白介导的内吞作用(染料木素),胆固醇耗竭(MβCD和制霉菌素),高尔基体抑制剂(布雷菲德菌素A)和耗能(叠氮钠)等七种细胞摄取抑制剂来研究载药纳米粒的细胞摄取及转运机制。结果 (1)制备的纳米粒粒径为(191.1±1.22)nm、载药量约为1.97%,包封率大于98%。同时双重修饰PBCA纳米粒在体外具有更明显的缓释效果。(2)双重修饰PBCA纳米粒在体内具有更高的血药浓度及缓释效果,能持续释放12 h,而胆固醇单修饰纳米粒仅释放8 h,原药溶液仅4 h内能检测到药物。脑组织分布研究结果表明,双重修饰PBCA纳米粒静脉给药后脑组织中药物含量显著增高且成缓慢释放的过程,说明具有成为脑靶向制剂的研究潜力。(3)载体及载药纳米粒细胞安全性良好,纳米粒在实验范围内没有明显的细胞毒性,具有较好的安全性。选择不同类型的摄取和转运抑制剂研究了载药纳米粒的细胞摄取及转运机制。结果表明,参与细胞转运和摄取的机制可以是不同的,而胆固醇-PEG双修饰PBCA纳米粒在b End.3细胞中的转运机制,是一个包括巨胞饮介导、耗能、同时需要胆固醇参与等多种机制介导的复杂过程。结论本实验制备的PEG20000-胆固醇双重修饰PBCA纳米粒,可解决中枢神经系统疾病的治疗及诊断药物体内BBB通透率低、安全性差、缓释性差等瓶颈问题,具有重要应用前景。

多发性硬化症的潜在治疗靶细胞——髓系细胞

多发性硬化症(MS)在病理生理学方面的讨论主要集中在适应性免疫应答的T细胞和B细胞上,而较少涉及在MS发病机制中也起着重要作用的天然免疫系统的髓系细胞(树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞和小胶质细胞)。这些髓系细胞群在神经炎症中起着抗原提呈细胞和效应细胞的作用,其与T细胞相互作用的恶性循环可使病情持续恶化。目前对于MS治疗药物的研究主要在适应性免疫系统方面,而对髓系细胞的研究重视不够。本文综述了髓系细胞的亚型和功能,它们在MS患者和动物模型中的变化以及一些药物的作用,以期为MS治疗药物的研发寻求新的靶点和策略。

多发性硬化症的潜在治疗靶细胞——髓系细胞

多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)在病理生理学方面的讨论主要集中在适应性免疫应答的T细胞和B细胞上,而较少涉及在MS发病机制中也起着重要作用的天然免疫系统的髓系细胞(树突状细胞、单核细胞、巨噬细胞和小胶质细胞)。这些髓系细胞群在神经炎症中起着抗原提呈细胞和效应细胞的作用,其与T细胞相互作用的恶性循环可使病情持续恶化。目前对于MS治疗药物的研究主要在适应性免疫系统方面,而对髓系细胞的研究重视不够。本文综述了髓系细胞的亚型和功能,它们在MS患者和动物模型中的变化以及一些药物的作用,以期为MS治疗药物的研发寻求新的靶点和策略。