B族链球菌表面蛋白LrrG的分段表达及其免疫原性和功能研究

目的研究LrrG蛋白不同片段的免疫原性及保护功能，为B族链球菌（GBS）蛋白疫苗及组分疫苗的研究奠定基础。方法采用生物信息学的方法预测LrrG蛋白的抗原表位，结合该蛋白的一级结构特征构建3个多肽片段（Gn、Gr、Gc）并重组表达；通过免疫动物及萃取组织液检测其免疫原性；体外调理吞噬试验检测各多肽片段的保护功能。结果成功构建和表达纯化了Gn、Gr、Gc多肽片段，且3个多肽片段均可在小鼠血清诱导产生较高水平的特异性IgG抗体，Gn免疫原性好于Gr、Gc。Gr、Gc30腭剂量的免疫原性均好于其10μg和50μg剂量。除了Gr在肺、直肠组织产生的IgA抗体有较明显升高外，Gn、Gc对黏膜及血清IgA无明显刺激作用。体外调理吞噬试验表明3个多肽片段的抗体均具有促进吞噬细胞对GBS的吞噬功能。Gr、Gc的调理吞噬活性高于Gn，与B细胞表位预测结果相符。结论重组多肽片段均具有较强的免疫原性，在一定免疫剂量范围内，血清特异性IgG水平呈剂量依赖关系；皮下免疫对黏膜免疫影响不大；调理吞噬作用可能是LrrG蛋白具有保护作用的机制，3个多肽片段均具有潜在保护作用，支持将其作为GBS蛋白疫苗及组分疫苗的候选成分。