实验性脾虚证雄性大鼠生殖系统形态与细胞化学改变的研究

目的:观察脾虚证雄性大鼠生殖系统形态与细胞化学的改变。方法:成年雄性 Wistar 大鼠,分对照组和实验性脾虚组。脾虚组用大黄浓煎荆灌服致脾虚。对两组大鼠的睾丸和附睾进行组织学与细胞化学的对比观察。结果:脾虚组雄性大鼠生殖系统出现以下变化:(1)精母细胞减少;(2)各级生精细胞均出现 ACP 和 ATPase 活性的变化;(3)睾丸间质细胞3-β HSDH 活性轻度增强;(4)附睾管头段细胞游离面纤毛呈杂乱状;(5)附睾管各段细胞 SDH活性有明显变化;(6)附睾管尾段3-β HSDH 活性减弱。结论:脾虚证不仅表现为消化系统功能低下,生殖系统也有病理改变。

小鼠原始生殖细胞体外增殖与分化的研究

目的探讨小鼠原始生殖细胞(PGC)的体外增殖与分化。方法将PGC与睾丸支持细胞(SC)共培养进行PGC的体外增殖。用原代PGC悬浮培养获取类胚体(EB),将EB贴壁培养,观察自然分化的结果。结果PGC与SC共培养可获得大量PGC集落。组织化学与免疫组织化学法显示,PGC集落碱性磷酸酶(AKP)和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)均呈阳性表达。将PGC悬浮培养可获得EB,EB贴壁生长后,可自然分化形成上皮样细胞、成纤维样细胞和神经样细胞。结论小鼠PGC与SC共培养能在体外大量增殖。并保持干细胞特性。PGC可形成EB,EB自然分化后大多数形成神经样细胞、其次是上皮样细胞和成纤维样细胞。

中草药促排卵汤对小鼠卵巢及子宫内膜作用的组织化学研究

昆明系雌性小鼠在生育期服用相当于人剂量的中草药促排卵汤５ｄ后，取出其卵巢和子宫，制成冰冻切片，均用油红０法显示脂类（Ｌ），用Ｌｏｊｄａ法显示３－β－羟基甾体脱氨酶（３－β－ＨＳＤＨ），用亮氨酰－β萘酰胺法显示氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ），用偶氮偶联法显示碱性磷酸酶（ＡＫＰ），对子宫还用ＰＡＳ法显示糖原（ＧＬｙ）。结果表明，与对照组相比，无论是动情前期或动情后期，服用中草药的小鼠卵巢其卵泡内膜层及颗粒层细胞和黄体细胞的胞浆内３－β－ＨＳＤＨ活性和脂类明显增高；子宫内膜上皮细胞及间质内的糖蛋白和脂类明显增高。对结果的讨论说明中草药促排卵汤确有促进卵巢卵泡和黄体的甾体激素分泌，并可增强子宫内膜营养的作用，这些都会有利于胚泡的着床及发育。

人子宫内膜细胞外基质在月经周期中变化的研究

本实验对人正常子宫内膜细胞外基质随月经周期的变动状况进行了观察，目的是进一步探讨为接受胚泡着床，子宫内膜的准备状态。子宫内膜标本利用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法对细胞外基质的Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型胶原蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白在月经周期中的变化进行了观察。结果显示胶原蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白主要分布在上皮组织的基膜中。胶原蛋白和纤维粘连蛋白总量在分泌早期明显减少。而层粘连蛋白总量在分泌期，特别在分泌中期明显增多。结果表明，细胞外基质随月经周期变化而明显变化。提示子宫内膜细胞外基质的周期变化对胚泡着床可能有着重要的作用。我们认为，细胞外基质是否能伴随月经周期而进行周期性变化是检查是否有正常月经周期的指标之一。本研究对着床、抗着床机理及某些不孕症的治疗将提供新方向。

药物流产后子宫刮出物的组织病理学和免疫细胞化学研究

为探讨药物流产后阴道出血和子宫内膜中胎盘残留组织的关系，用组织病理学和免疫细胞化学方法，对药物流产后刮出组织（２０例）和正常流出组织（１０例）进行了研究。组织病理学显示：刮出内膜组织中都含有残留蜕膜组织，后者多数蜕膜细胞变性坏死，蜕膜和内膜都有大量炎性细胞浸润，并具有不同步发育的腺体和间质。免疫细胞化学方法显示：正常流出或刮出组织的毛细血管内皮因子Ⅷ相关抗原和胎盘碱性磷酸酶（ＰＡＬＰ）呈阳性反应。残留的蜕膜组织中可见结构和功能正常的毛细血管。提示：子宫内膜中的炎细胞浸润，内膜不同步发育，残留蜕膜的某些部位因正常血液供应而继续生长，可能是药物流产后出血的原因。

功能性子宫出血子宫内膜血管变化的研究

目的 探讨内分泌功能紊乱和避孕药具引起的功能性子宫出血(DUB)病理变化的共同点。方法 应用组织学、免疫组织化学方法对DUB的子宫内膜进行组织形态学、血管内皮细胞CD34和基膜层粘连蛋白(LN)的比较研究。结果 避孕药具引发的出血为弥散性,内膜发育受抑制;而内分泌紊乱引发的出血为局灶性,内膜发育呈不同步状态。2组共同点是出血部位的血管呈断裂像,血管内皮细胞中CD34 和血管基膜中LN的阳性表达都明显减弱。结论 不同诱因的DUB导致子宫出血的直接因素均是毛细血管内皮细胞中CD34和基膜中LN的减少。

实验性脾虚证大鼠睾丸形态学与细胞化学的研究

对实验性脾虚证和对照组大鼠的睾丸进行常规组织学与细胞化学的对比观察。结果显示：脾虚组睾丸体积明显缩小，曲细精管呈不规则状，管径缩小，管壁变薄，细胞间质水肿明显。细胞化学观察显示各级生精细胞中ＳＤＨ、ＡＬＰ、ＡＣＰ和ＡＴＰａｓｅ活性有明显变化，睾丸间质细胞３－β－ＨＳＤＨ活性有轻度增强。研究结果表明脾虚证不仅表现为消化系统功能低下，生殖系统也有病理学改变。

Norplant使用者子宫内膜血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子及转移生长因子β_1的研究

为探讨Norplant使用者子宫不规则出血的相关因素,对使用Norplant月经规律和有不规则子宫出血者的子宫内膜与正常子宫内膜的形态、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转移生长因子β1(TGFβ1)进行比较观察。结果显示:Norplant使用者子宫内膜无典型的周期特点,子宫内膜VEGF比正常子宫内膜减少,尤其是不规则出血组减少更为明显,但bFGF及GFβ1无明显差异。提示Norplant使用者子宫异常出血与子宫内膜VEGF的减少有关。

Norplant使用者子宫内膜形态与性激素受体变化的研究

为探讨Ｎｏｒｐｌａｎｔ埋植后不规则出血的内膜与性激素受体的相关性，对正常月经周期和Ｎｏｒｐｌａｎｔ埋植６个月、１年有不规则出血的人子宫内膜进行形态学与免疫组织化学ＥＲ和ＰＲ的观察。结果证明不规则子宫出血的内膜无典型周期性变化；部分内膜血管断裂，雌激素受体（ＥＲ）和孕激素受体（ＰＲ）有不同程度的减少。提示Ｎｏｒｐｌａｎｔ可抑制子宫内膜ＥＲ和ＰＲ的生成，从而抑制了雌激素（Ｅ）和孕激素（Ｐ）的生物活性。

层粘连蛋白及纤维粘连蛋白与药流后子宫出血关系的研究

为探讨层粘连蛋白 (LM)及纤维粘连蛋白 (FN)在米非司酮药物流产 (以下简称药流 )后子宫持续出血时的表达 ,对 2 0例米非司酮 +米索前列醇药物流产后子宫出血 (出血组 )的刮出组织及 1 0例人工流产负压吸宫术吸出的组织 (对照组 ) ,用HE及免疫组织化学方法染色并观察标本。结果 :出血组的刮出组织中 4 5%可见滋养细胞或绒毛 ,90 %发现蜕膜组织。 2组蜕膜组织的血管及腺上皮基膜、蜕膜细胞周围和一部分蜕膜细胞胞质内都含有较丰富的LM与FN ,并且 2组间比较 ,FN与LM含量表达无明显差异 (P >0 .0 5)。说明残留蜕膜中含有能分泌大量LM与FN的蜕膜细胞和血管 ,致使蜕膜组织与子宫壁牢固地结合而不易脱落 ,影响内膜发育而引起出血。

培养原始生殖细胞的新方法——Sertoli细胞的应用

为探讨睾丸支持细胞 (sertolicell,SCs)对原始生殖细胞 ( primordialgermcell,PGCs)的增生与生长是否有明显的促进作用。用SCs和同源生殖嵴成纤维细胞分别与PGCs共培养。结果发现 :与SCs共培养的PGCs集落多于与同源生殖嵴成纤维细胞共培养的PGCs集落 ,传代次数也多于同源生殖嵴成纤维细胞。提示

实验性脾虚证大鼠甲状腺及甲状旁腺形态学与细胞化学研究

对实验性脾虚证大鼠的甲状腺与甲状旁腺进行了形态学与细胞化学观察。形态学显示：脾虚证大鼠甲状腺滤泡变得不规则，滤泡上皮呈低立方状，滤泡间隙变宽；甲状旁腺变化不明显。细胞化学显示甲状腺滤泡细胞酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和滤泡液的ＰＡＳ反应明显减弱（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。甲状旁腺碱性磷酸酶（ＡＬＰ）增强（Ｐ＜０．０５），而ＡＣＰ减弱（Ｐ＜０．０１）。

实验性脾虚证大鼠内分泌腺形态学与细胞化学研究

成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠２０只，分对照组和实验组。实验组用大黄煎剂灌服４２天致实验性脾虚证。对两组睾丸，肾上腺和甲状腺进行常规形态学与细胞化学观察。形态学显示：睾丸，肾上腺和甲状腺的组织和细胞均有不同程度的损伤。细胞化学显示：各内分泌腺均表现酸性磷酸酶（ＡＣＰ）减弱，个别内分泌腺细胞显示琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ），三磷酸腺苷酶（ＡＴＰａｓｅ）和ＰＡＳ反应的变化。结果证明脾虚证不仅消化系统功能低下。

实验性脾虚证大鼠附睾形态学和细胞化学的研究

对实验性脾虚证和对照组大鼠的附睾进行组织学与酶细胞化学的对比观察。组织学观察显示脾虚组大鼠附睾管断面不规则，管壁变薄，附睾管之间水肿。细胞化学观察也显示附睾上皮细胞中部分酶活性有不同程度改变。较明显的有附睾管头段：ＬＤＨ、ＳＤＨ活性增强；中段：ＳＤＨ和３βＨＳＤＨ活性增强；尾段：ＳＤＨ和３βＨＳＤＨ活性减弱。结果说明脾虚证大鼠附睾结构及细胞代谢均有改变，这些改变可能对精子生理性成熟有影响。

显示微血管功能状态技术方法的比较研究

目的 为子宫血管生物学的研究提供形态学指标的依据。 方法 人增殖期子宫内膜 10例。应用免疫组织化学方法 ,对与血管功能密切相关的各种因子进行标记表达。 结果 不同标记物在同一组织、同一切面上 ,微血管的形态与密度呈现了明显的差异。

颗粒子宫腺细胞的分离、纯化与细胞化学研究

胰蛋白酶消化小鼠子宫腺细胞区，制成单细胞悬液，滴片后进行细胞学及细胞化学研究。结果：有多种类型细胞存在于悬液中，其中中等大小细胞（直径２０μｍ左右）大部分为颗粒子宫腺细胞（ＧｒａｎｕｌａｔｅｄＭｅｔｒｉａｌＧｌａｎｄＣｅｌｌｓ，ＧＭＧｃｅｌｌｓ）。ＧＭＧ细胞约占所有细胞的５０％。利用Ｐｅｒｃｏｌｌ非连续性密度梯度离心可以提高ＧＭＧ细胞的纯度，使之达８０％以上。细胞化学研究显示ＧＭＧ细胞含ＡＣＰ，ＮＳＥ，ＬＮＡｓｅ及糖蛋白成份。

睾丸支持细胞促进体外培养神经元生长的研究

目的 探讨睾丸支持细胞 (SC)对体外培养神经元生长发育的促进作用。 方法 将SCs制备成饲养层和SCs条件培养液 (SCM)后与神经元共培养 ,观察培养细胞的存活数和突起数 ,并应用图像分析仪观察细胞的面积。 结果 SCs饲养层及SCM培养神经元的存活数、突起数和胞体面积明显高于对照组 (P <0 0 1)。 结论SCs对体外培养的神经元具有显著的促生长作用。

成年与胚胎大鼠卵泡细胞的体外研究

将胚胎、成年和妊娠Ｗｉｓｔａｒ大鼠的卵泡细胞进行冷冻保存、复苏后在ＲＰＭＩ６４０培养液中培养，观察各自的生长发育情况。形态学显示：冷冻复苏的各组卵泡细胞均有贴壁增殖生长的能力，培养初期胚胎与成年卵泡的贴壁生长速度快，而妊娠卵泡细胞贴壁生长发生的较晚；但培养至４ｄ后，胚胎卵泡细胞贴壁生长能力逐渐减弱并消失。组织化学显示：培养３ｄ后的胚胎卵泡细胞３β羟甾脱氢酶（３βＨＳＤＨ）呈阴性，酸性磷酸酶（ＡＣＰ）和ＰＡＳ反应也弱于成年卵泡细胞。结果提示：胚胎卵泡细胞可能是未完全成熟。

小鼠胚胎及生后发育的肾上腺皮质的组织学与组织化学研究

胚龄１３日小鼠肾上腺结构尚未形成，在肾附近可见两群细胞。１５日两群细胞融合，呈一新月形小体，外包被膜，内含两类细胞，一类胞体较大，染色较深，另一类胞体较小，染色浅。１７日，胞体大染色深的细胞形成团索状，发育成皮质细胞；另一类细胞则迁移至中央，形成髓质。组织化学研究显示，胎龄１５日及以后的肾上腺皮质细胞３β－羟甾体脱氢酶（３β－ＨＳＤＨ）、脂类、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、亮氨酸氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ）均为阳性。以上一些酶活性的出现提示１５日及其后胚鼠，生后１～６０天小鼠的肾上腺皮质都有分泌甾体激素之功能。