以患者为中心的门诊检验流程优化及其实践

随着我国医疗卫生改革日渐深入,医院的生存和发展面临新的挑战和机遇,为了适应新时代发展、满足新形势下患者的需要,切实有效地缓解患者看病难,需要大型综合性医院＂以患者为中心＂不断增强主动服务意识[1-3]。门诊检验流程是门诊就医流程重要环节之一[4-5]。近年来。

临床检验样本生物信息数据库和管理平台的建立与应用

目的探索目标人群检验样本生物信息数据库及管理平台的建立和应用。方法建立血清／DNA检验样本标准化冻存库和冻存管理流程体系，建立样本对应的生物信息数据库和软件管理平台。结果初步建立了3000多位健康或／和亚健康目标人群连续两年血清和DNA样本冻存库和样本对应生物信息数据库；特殊疾病人群的血清／DNA样本冻存库和对应样本的生物信息数据库和管理平台的建立。结论临床检验样本生物信息数据库及管理平台的建立是科学高效使用宝贵生物学资源的良好途径和有力保证。

消化道不同恶性肿瘤患者血清锌α-2-糖蛋白水平检测及临床意义

目的对脂肪降解中起重要作用的脂质降解因子锌α-2-糖蛋白(zinc-α-glycoprotein,ZAG)在消化道不同恶性肿瘤患者血清中的表达进行了研究,旨在探讨这些肿瘤患者的脂质代谢状态与ZAG的关系。方法实验采集了不同消化道恶性肿瘤患者、相应良性病变及正常健康人血清样本,每种疾病及正常血清样本各6例,检测了所有样本的脂代谢相关指标。采用蛋白免疫印迹的方法对血清中锌α-2-糖蛋白(zinc-α-glycoprotein,ZAG)的含量进行了半定量鉴定。结果在各疾病组中,总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)在血清中的含量在健康对照组、良性组、恶性组间差异无统计学意义。在胃病组、结肠疾病组、直肠疾病组中,锌α-2-糖蛋白(ZAG)在恶性、良性和正常组中的表达不具有统计学意义(P=0.589,P=0.618,P=0.864)。而ZAG在肝癌患者血清中的表达与正常健康人、良性组相比,差异具有统计学意义(P=0.013,P=0.008),但正常健康人与良性组患者比较,差异无统计学意义(P=0.804)。结论锌α-2-糖蛋白(ZAG)在消化道不同肿瘤患者血清中的表达差异有统计学意义,肝癌组相对于胃癌组、结直肠癌组的表达具有临床诊断意义。与总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)相比,它在评价肝癌患者脂代谢状态方面更加灵敏。

重症监护病房细菌性血流感染监测中C反应蛋白和降钙素原的临床意义

目的探讨C反应蛋白（CRP）和降钙素原（PCT）在重症监护病房细菌性血流感染监测中的临床意义。方法回顾性分析北京世纪坛医院重症监护病房进行血液培养的154例患者临床资料，根据血培养结果分为阳性组（n=78）和阴性者（n=76）；血培养采血当日测定CRP和PCT结果，并对两组数据进行比较。血培养阳性组按革兰阳性菌（n=17）与阴性菌（n=61）再次分组，并对两小组患者的CRP和PCT水平进行比较。结果血培养阳性组CRP[中位数124（11-217）mg／L]显著高于阴性组[中位数62．3（7．39-200）mg／L，Z=-5．394，P〈0．01]；阳性组PCT[中位数6．59（0．21～100）μg／L]亦显著高于阴性组[中位数0．44（0．07-60．34）μg／L，Z=-8．896，P〈0．01]。革兰阳性菌组CRP[中位数119（34．8～217）mg／L]与革兰阴性菌组[中位数126（11～205）mg／L]差异无统计学意义；但革兰阴性菌组PCT[中位数6．99（1．55～100）μg／L]显著高于革兰阳性菌组[中位数2．04（0．21～46．69）μg／L，Z=-2．663，P〈0．053。结论在重症监护病房细菌性血流感染的监测CRP和PCT具有一定参考价值；与革兰阳性菌血流感染相比，革兰阴性菌血流感染的PCT值更高。

临床分离肺炎克雷伯菌中整合酶基因的检测分析

近年来肺炎克雷伯菌已成为医院感染的重要病原菌，同时院内分离的肺炎克雷伯菌往往有较高的产超广谱G-内酰胺酶（ESBL）率并呈现多重耐药性。在肠杆菌科细菌耐药机制中，整合子起着非常重要的作用，通过位点特异性基因重组机制使细菌耐药基因盒（gene cassette）整合在一起，

Kininogen 1在非小细胞肺癌体液和组织中的表达及临床意义

目的通过检测非小细胞肺癌患者血浆、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、尿液及组织中激肽原1(kininogen 1,KNG1)的表达,了解其在非小细胞肺癌中的临床意义。方法收集40例非小细胞肺癌患者和20例肺良性疾病对照者的血浆、BALF和尿液标本,通过酶联免疫方法检测血浆、BALF和尿液中KNG1的含量,应用免疫组织化学法检测40例非小细胞肺癌及其癌旁对照标本KNG1的表达。结果非小细胞肺癌患者血浆、BALF和尿液中KNG1浓度显著高于对照组(P均<0.001)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析显示KNG1在血浆、肺泡灌洗液和尿液中的曲线下面积分别为0.79、0.89和0.87,差异均有统计学意义(P<0.05),各标本的KNG1均具有一定诊断非小细胞肺癌能力,诊断界值分别为血浆为1653.6 mg/L,BALF为52.1 mg/L,尿液为2.3 mg/L,尿液的一致性最高(Kappa=0.59),尿液诊断效果优于血浆和BALF。在40例非小细胞肺癌和邻近正常组织中的免疫组织化学染色结果显示非小细胞肺癌组织中KNG1表达高于癌旁正常组织。结论KNG1在非小细胞肺癌患者的血浆、肺泡灌洗液、尿液和组织中是高表达的,在体液诊断尤其是尿液中具有一定诊断非小细胞肺癌的能力。

北京世纪坛医院亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌院内感染流行病学调查

目的探讨临床分离亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌菌株间同源性关系及耐药菌可能的传播途径,为临床该类菌的传播控制提供依据。方法常规进行临床样本采集及细菌培养;同时对ICU病房医护人员手表面及患者床旁物品表面采样并做细菌计数及培养;细菌鉴定及药敏测定采用VITEK-2COMPACT全自动细菌鉴定/药敏分析系统;细菌同源性测定采用肠杆菌科基因组内重复序列聚合酶链反应(ERIC-rep-PCR)法。结果 2011年1月至2013年12月临床共分离到642株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌,菌株来源为ICU 389株(60.59%);呼吸内科72株(11.21%);神经内科53株(8.26%);心血管科41株(6.39%);外科31株(4.83%);消化内科11株(1.71%);肾脏内科5株(0.78%);急诊科17株(2.65%);其他科室23株(3.58%)。ICU物体表面分离到1株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌。642株临床菌株中含8个主要克隆,该8个克隆菌合计394株,占全部菌株的61.37%,其余248株菌为单一克隆。结论亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌在该院确实存在单克隆流行,接触传播可能是此类感染的传播途径。

铜绿假单胞菌院内感染分布及耐药性分析

目的对该院分离的铜绿假单胞菌进行药敏分析,为该院铜绿假单胞菌的耐药控制提供可靠依据。方法收集该院2006年8月至2010年12月分离的5797株铜绿假单胞菌,采用VITEK-2全自动药敏鉴定分析仪对菌株进行鉴定及药敏实验,WHONET5.3软件进行药敏结果分析,各种药物敏感率比较分析采用卡方检验。结果 2006～2010年铜绿假单胞菌占院内分离的革兰阴性杆菌的41.7%。各年间菌株来源构成比差异无统计学意义,均主要分离自痰样本。2006～2010年药敏结果显示,对头孢他啶、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、庆大霉素的耐药率逐年升高。泛耐药菌的检出率从2006的1.86%增加到2010年的4.03%。结论本院革兰阴性杆菌感染中以铜绿假单胞菌为主,主要来源于痰标本。

高脂血症人群的血清游离脂肪酸水平调查

目的探索血清游离脂肪酸(FFA)在高脂血症人群和血脂正常人群中不同年龄及性别之间的差异。方法选择912例健康体检者(健康对照组)和1 061例高脂血症者,分别测定血清游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和体质量指数(BMI),用协方差分析探讨不同性别、年龄组之间FFA的差别,多元相关分析探讨高脂血症患者FFA与各项血脂指标的关系。结果高脂血症中年女性、中年男性、青年男性的FFA水平较相应对照组明显升高;高脂血症青年女性的FFA水平低于高脂血症其他人群;在血脂正常人群中,老年组的FFA水平明显高于中青年组。结论不同性别、不同年龄高脂血症人群之间的FFA水平有差异。

白色假丝酵母菌院内感染分布及耐药性分析

目的分析首都医科大学附属北京世纪坛医院2009~2011年分离的白色假丝酵母菌标本来源分布及耐药情况。方法收集该院2009年1月至2011年12月各类临床标本中分离的白色假丝酵母菌,采用科玛嘉培养基进行菌株鉴定,采用ATB Fungus 3进行药物最低抑菌浓度（MIC）检测。比较3年白色假丝酵母菌标本来源分布及耐药情况。结果 2009~2011年白色假丝酵母菌标本来源无明显变化,痰液标本均占70%以上,其次为尿液标本约占10%。对5-氟胞嘧啶、两性霉素敏感度高。对氟康唑耐药率小于1.0%,对伏立康唑耐药率为1.0%,对伊曲康唑耐药率约为3.5%。结论本地区白色假丝酵母菌主要来源为痰液与尿液,对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑敏感度均较高。

高脂血症人群血清超氧化物歧化酶的变化趋势

目的探讨血清超氧化物歧化酶在高脂血症人群中不同性别、不同年龄的变化趋势,为评价机体抗氧化的能力提供客观依据。方法选择811名血脂正常者和803例高脂血症者,分别测定血清超氧化物歧化酶、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇,t检验分析探讨不同性别、年龄组之间血清超氧化物歧化酶的差别。结果高脂血症青年男性、高脂血症中年男性、高脂血症老年男性的血清超氧化物歧化酶含量较相应血脂正常组明显升高;高脂血症老年男性的血清超氧化物歧化酶含量较高脂血症中青年男性明显降低。高脂血症青年女性、高脂血症中年女性、高脂血症老年女性的血清超氧化物歧化酶含量较血脂正常对照组明显升高;高脂血症老年女性的血清超氧化物歧化酶含量较高脂血症中青年女性明显降低。高脂血症女性各年龄组的血清超氧化物歧化酶含量明显低于同年龄组的高脂血症男性。结论不同性别、不同年龄的高脂血症人群之间,差异有统计学意义(P<0.05)。

不同仪器间5项检测结果的一致性比较

目的为减少不同仪器间与疾病诊断重要相关的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷胺酰转移酶(GGT)、肌酸激酶(CK)结果之间的差异,保证同一实验室不同检测系统间检测结果的一致性,从而达到为临床诊治提供稳定、一致结果的目的。方法参照美国临床实验室标准化委员会《EP9-A》文件要求,首先对日立7600全自动生化分析仪P1、P2模块,日立7080全自动生化分析仪和BeckmanCoulter DxC600全自动生化分析仪进行精密度分析;在满足精密度要求的情况下,以日立7600全自动生化分析仪P1模块为比较系统,用患者新鲜血清与其他系统的ALT、AST、ALP、GGT、CK测定结果进行比对分析,计算医学决定水平处预期偏倚以及预期偏倚的95%可信区间,以美国临床医学检验部门修正法规(CLIA′88)允许总误差的1/2为标准,判断检验结果的可比性。结果不同分析仪测定ALT、AST、ALP、GGT、CK项目的CV均小于CLIA′88允许总误差的1/3,精密度均符合要求。日立7080全自动生化分析仪、日立7600全自动生化分析仪P2模块以及Beckman Coulter DxC600全自动生化分析仪检测结果与日立7600全自动生化分析仪P1模块相比相关性良好。以上项目在规定的医学决定水平处的差异均在临床可接受范围内。结论本实验室以上项目应用不同的检测系统测定结果基本一致,差异无统计学意义。

病态造血特征对骨髓增生异常综合征分型诊断价值的探讨

本研究探讨细胞病态造血特点对于骨髓增生异常综合征(MDS)诊断的实用价值。通过细胞形态学、细胞组织化学染色、骨髓病理学检查,分析64例WHO-MDS患者病态造血特点,评估其对于疾病判断的灵敏度、特异性等指标的意义。结果表明,外周血出现原始细胞、巨核细胞,骨髓粒系Auer小体、假性Pelger-Huёr畸形,幼红细胞空泡,微小巨核对于WHO-MDS诊断灵敏度虽然不高,分别为34.4%,3.1%,3.1%,75.0%,6.3%,42.4%,但其诊断特异性均为100%。幼红细胞奇数核、核畸形、核碎裂、核出芽、环形铁粒幼细胞,及单圆核、多圆核巨核细胞对于WHO-MDS诊断也有一定参考价值。通过骨髓病理学检查,同样发现WHO-MDS患者三系出现病态造血,并且4例RCMD患者,12例RAEB患者检出幼稚前体细胞异常定位(ALIP)。超过半数WHO-MDS患者有轻至中度网硬蛋白纤维增生。结论:细胞形态学是诊断WHO-MDS的重要基础和关键,多种检测方法联合应用可以提高MDS早期诊断的准确性。

γ-谷氨酰基转移酶国际室间比对计划结果分析

目的对2006～2008年参加国际临床化学联合会(IFCC)组织的参考实验室国际比对计划(RELA)的γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定结果进行比较和分析,为GGT参考方法的建立和应用提供借鉴。方法按照IFCC公布的酶学活性测定(37℃)参考方法的标准操作程序(SOP)测定GGT国际样本,不精密度评价按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP5-A2文件进行,准确度评价采用国际有证参考物质(ERM)。结果 2006年测定结果:样本A为(1.829±0.021)μkat/L,样本B为(3.331±0.019)μkat/L;2007年测定结果:样本A为(1.533±0.017)μkat/L,样本B为(3.840±0.035)μkat/L;2008年测定结果:样本A为(3.392±0.024)μkat/L,样本B为(3.058±0.024)μkat/L。2006～2008年GGT参考方法的不精密度分别为1.29%、0.44%、0.65%,ERM测定均值在"靶值±不确定度"[(1.90±0.04)μkat/L]范围内,初步验证了参考方法的不精密度和准确度。结论 2006～2008年RELA样本GGT测定结果均在IFCC公布的可信区间内,GGT的IFCC参考方法已经建立。

载脂蛋白A-Ⅰ在8种不同组织学分型肾肿瘤中的表达

目的:研究载脂蛋白A-Ⅰ(apolipoprotein A-Ⅰ,Apo A-Ⅰ)在8种不同组织学分型的肾肿瘤组织中的表达情况,探索用于鉴别诊断的新型肿瘤标志物。方法:应用免疫组织化学方法检测23例肾肿瘤(包括透明细胞癌11例、乳头状细胞癌1例、嫌色细胞癌3例、嗜酸细胞腺癌1例、多房性囊性细胞癌2例、肾盂尿路移行上皮癌3例、后肾腺癌1例、集合管癌1例)及5例癌旁正常组织中Apo A-Ⅰ的表达,癌旁正常组织取自除外23例肾癌组织的其他5例肾肿瘤的切缘外非癌组织。结果:23例肾肿瘤中,Apo A-Ⅰ阳性21例(阳性率91.3%);肾癌旁组织5例,阳性2例(阳性率40.0%),Apo A-Ⅰ在肿瘤组织与癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(Z=-2.829,P=0.003)。比较不同组织学分型的肾肿瘤,11例肾透明细胞癌中,阳性9例(阳性率81.8%),Apo A-Ⅰ的表达程度与肿瘤细胞的恶性程度有关,透明细胞癌Ⅱ级、Ⅲ级的表达程度明显高于Ⅰ级,差异有统计学意义(Z=-2.070,P=0.038);乳头状细胞癌、嫌色细胞癌、嗜酸细胞腺癌、多房性囊性细胞癌、肾盂尿路移行上皮癌、后肾腺癌、集合管癌均有不同程度的阳性着色。结论:Apo A-Ⅰ在肾肿瘤组织中的表达特异升高,可作为区分不同组织学分型肾肿瘤的免疫组织化学标志物。

醇类沉淀法提取尿液蛋白的优化策略

目的研究提取条件,探讨提取尿液蛋白的优化策略。方法收集健康志愿者的混合尿液标本,采用甲醇、乙醇、异丙醇沉淀法在不同的条件下提取尿蛋白,这些条件包括:醇类试剂的种类、醇类试剂的比例、醇类试剂与尿液作用的不同温度及作用时间、不同的温度处理程序等。然后测定提取的蛋白浓度,评价蛋白回收量;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)评价总蛋白条带;蛋白免疫印迹评价在不同条件下提取的目的蛋白条带。结果孵育条件固定为4℃30 min时,溶剂为75%乙醇可提取蛋白最多为(649.03±28.33)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果显示,在不同醇类溶剂条件下提取的总蛋白条带和目的蛋白条带呈趋势变化。提取试剂条件固定为75%乙醇时,改变孵育的温度方案,显示先4℃孵育30 min后,再-20℃过夜提取的总蛋白最多为(599.93±42.20)μg;SDS-PAGE和免疫印迹结果都显示,孵育温度方案不同,所提取的总蛋白条带和目的蛋白条带无明显差异。结论 75%乙醇,在4℃孵育30 min后,-20℃过夜条件下,可高效提取尿中胰淀粉酶(AMY),用于尿AMY定性定量检测。醇类溶剂的比例对提取的总蛋白量影响很大,且对不同分子量蛋白有选择性;孵育温度条件主要影响总蛋白量。

大脑前动脉远段动脉瘤的显微外科治疗

目的探讨大脑前动脉远段动脉瘤（DACAA）的显微外科治疗技术。方法回顾性分析16例DACAA病例资料。采用CTA和（或）DSA诊断，16例病人共发现20个动脉瘤，其中多发动脉瘤4例。均采用显微夹闭手术治疗，术中解剖纵裂，不临时阻断载瘤动脉，夹闭动脉瘤颈19个，烧灼切除1个。结果无手术死亡病例，术后出现脑积水2例，经持续腰大池引流后逐渐缓解。CTA显示动脉瘤完全夹闭17个，夹闭不全3个；载瘤动脉闭塞3例。术后随访6-24个月，平均随访12个月，动脉瘤复发1例。按GOS评估预后，恢复良好14例，轻度残疾2例。结论显微外科手术治疗DACAA安全有效，但存在一定手术风险．包括动脉瘤夹闭不全及载瘤动脉闭塞。

比较载脂蛋白A-1在前列腺癌和前列腺增生中的表达

目的比较载脂蛋白A-1（ApoA-1）在前列腺癌、前列腺增生组织中的表达情况,探索前列腺疾病鉴别诊断的新型标记物。方法应用免疫组织化学方法检测前列腺癌（13例）和前列腺增生（37例）组织中ApoA-1的表达情况,分析其与血清前列腺抗原系列总前列腺特异性抗原（tPSA）、游离前列腺特异性抗原（fPSA）、fPSA与tPSA比值（fPSA/tPSA）及血脂总胆固醇（CHOL）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）等参数的相关性,研究ApoA-1在前列腺特异抗原（PSA）灰区（4~10ng/mL）对前列腺癌诊断的特异度及血清胆固醇水平升高在前列腺癌发生发展过程中的作用。结果 ApoA-1在前列腺癌患者组织中的表达水平明显高于前列腺增生患者,比较差异有统计学意义（t=-6.182,P〈0.05）。在PSA不同水平的各个区间内,ApoA-1在前列腺癌组织中的表达明显高于相同PSA水平的前列腺增生组织,差异有统计学意义（P〈0.05）。前列腺癌患者血清LDL-C水平为（3.02±0.79）mmol/L,明显高于前列腺增生患者的（2.14±0.78）mmol/L,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清HDL-C水平为（1.27±0.33）mmol/L,明显低于前列腺增生患者的（1.70±1.02）mmol/L,差异有统计学意义（P〈0.05）,ApoA-1的水平与胆固醇水平之间具有相关性（r=0.332,P=0.036）。结论 ApoA-1在前列腺癌和前列腺增生中表达具有明显差异,可作为二者的鉴别诊断标记物。

以生物学变异为质量规范评价甲状腺功能五项的检测过程能力

目的以生物学变异为质量目标评价甲状腺功能五项的检测过程能力。方法根据室内、室间质控和生物学变异数据,计算各项目实际变异系数(CV)、实际偏倚(Bias)、实际总误差(TE),比较实际TE与不同水平允许总误差(TEa),计算σ值、质量目标指数(QGI),评价各项目检测性能。结果游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和促甲状腺素(TSH)的实际CV分别为3.79%和4.22%,其他项目实际CV均大于要求CV;5个项目实际Bias均小于要求Bias;除甲状腺素(TT4)的实际TE未达到最低TEa外,其他项目实际TE均小于合适TEa;以最低TEa、合适TEa作为质量目标时,TSH的σ值分别为6.61、5.26,提示该项目具有良好的检测性能,其他项目σ值均小于3.0,需重视其分析性能要求;全部项目QGI均小于0.8,提示改善项目精密度是提高分析性能的关键。结论以生物学变异确定的TEa作为质量目标,能较好了解各项目检测满足质量规范的程度。

结直肠癌患者血清中转甲状腺素蛋白的表达与肿瘤转移的相关性

目的对发生远处转移结直肠癌患者血清中转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)的表达进行研究,旨在探讨TTR的表达与结直肠癌转移的关系,进一步发现TTR与结直肠肿瘤转移之间的相关性。方法收集23例结直肠癌患者血清,标本于-80℃保存。根据是否发生远处转移进行分类,未发生远处转移样本12例,远处转移样本11例。采用蛋白免疫印迹的方法对TTR的表达进行半定量分析。结果利用Image J软件计算各组光密度比值,显示在未发生远处转移的结直肠癌患者血清中,TTR的表达量高于发生远处转移的患者,TTR在两组结直肠癌患者血清中表达差异有统计学意义(P=0.017)。结论 TTR在结直肠癌患者血清中的表达水平与肿瘤是否发生转移存在相关性,因此,今后对于评估结直肠癌浸润与转移的水平,TTR可以发挥肿瘤标志物的作用。