博莱霉素致肺纤维化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡

目的研究博莱霉素(BLM)对肺纤维化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)凋亡的影响及其可能机制。方法32只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=8)和BLM组(n=24),分别给予BLM组和假手术组大鼠气管内一次性注入5mg/kgBLM和等量生理盐水。于给药后1、3、7d随机取BLM组大鼠8只,给药后7d取假手术组大鼠进行ATⅡ分离和纯化。采用流式细胞术进行细胞周期、细胞凋亡率、细胞内游离Ca2+浓度、线粒体跨膜电位(MMP)检测;免疫细胞化学法检测ATⅡBax、Bcl-2和Fas的表达;比色法测定ATⅡCaspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性。结果BLM组ATⅡS期细胞比率显著低于假手术组(P<0.05)。BLM组1和3d时ATⅡ的凋亡率显著高于假手术组(P<0.01)。BLM组1、3和7d时ATⅡ内游离Ca2+浓度显著高于假手术组(P<0.05),MMP显著低于假手术组(P<0.05)。BLM组1、3和7d时ATⅡBax和Fas染色阳性率和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性均显著高于假手术组(P<0.05,P<0.01)。BLM组1和3d时ATⅡBcl-2染色阳性率显著低于假手术组(P<0.05)。结论BLM在ATⅡ损伤早期可能通过升高细胞内Ca2+浓度,激活Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9,降低MMP,诱导Fas、Bax高表达,促使ATⅡ凋亡,引发肺纤维化。