北京世纪坛医院亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌院内感染流行病学调查

目的探讨临床分离亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌菌株间同源性关系及耐药菌可能的传播途径,为临床该类菌的传播控制提供依据。方法常规进行临床样本采集及细菌培养;同时对ICU病房医护人员手表面及患者床旁物品表面采样并做细菌计数及培养;细菌鉴定及药敏测定采用VITEK-2COMPACT全自动细菌鉴定/药敏分析系统;细菌同源性测定采用肠杆菌科基因组内重复序列聚合酶链反应(ERIC-rep-PCR)法。结果 2011年1月至2013年12月临床共分离到642株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌,菌株来源为ICU 389株(60.59%);呼吸内科72株(11.21%);神经内科53株(8.26%);心血管科41株(6.39%);外科31株(4.83%);消化内科11株(1.71%);肾脏内科5株(0.78%);急诊科17株(2.65%);其他科室23株(3.58%)。ICU物体表面分离到1株亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌。642株临床菌株中含8个主要克隆,该8个克隆菌合计394株,占全部菌株的61.37%,其余248株菌为单一克隆。结论亚胺培南耐药的肺炎克雷伯菌在该院确实存在单克隆流行,接触传播可能是此类感染的传播途径。

脂肪干细胞局部注射改善淋巴水肿的实验研究

目的研究脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)体内减轻炎性反应治疗淋巴水肿的可行性及作用机制,为淋巴水肿疾病的干细胞治疗探索新的思路。方法提取小鼠皮下脂肪干细胞,体外培养、扩张至3~5代。建立淋巴水肿鼠尾模型,手术阻断鼠尾深、浅淋巴回流,造模当天,于皮下注射ADSCs或磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS),ADSCs组共20只小鼠,PBS对照组共30只小鼠。术后3周,分别用HE染色、Whole mount-BODIPY染色、Masson染色、免疫荧光染色检测鼠尾皮下组织/脂肪厚度、纤维化程度、淋巴管形态,干预后8周,FITC-Dextran检测淋巴回流。结果ADSCs组淋巴水肿缓解,鼠尾体积在术后4周内较对照组减小;皮下脂肪厚度降低约40%;皮下组织的纤维化缓解,Masson染色结果显示胶原纤维所占面积比例下降约20%;高倍镜视野下的淋巴管数量未发生变化,但是横截面积减小约60%;FITC-Dextran检测淋巴回流发现,ADSCs组荧光染料通过手术切口明显多于PBS对照组。结论ADSCs局部注射后,可缓解淋巴水肿。

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布

目的检测碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因分布情况,为此类菌感染的预防与控制提供理论依据。方法改良Hodge试验检测医院临床分离肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶表型;PCR法检测KPC基因的携带率。结果 642株碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌中,Hodge试验阳性率为96.6%。KPC基因的携带率为50.9%,均为KPC-2型。结论该医院临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌中KPC基因主要为KPC-2基因。

阿维A对硬皮病小鼠的治疗作用及机制研究

目的研究阿维A(acitretin)对系统性硬皮病(SSc)小鼠皮肤及肺部纤维化的治疗作用,并通过检测小鼠外周血Th17/Treg相关因子白介素(IL)-17、IL-10、IL-6、转化生长因子(TGF)-β1水平,探讨阿维A治疗硬皮病可能的机制。方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、硬皮病组和阿维A组,硬皮病组和阿维A组给予博莱霉素皮下注射4周,阿维A组同时每天给予6 mg/kg的阿维A灌胃4周。4周后取注射部位皮肤及肺部制作组织病理切片,观察小鼠皮肤厚度及皮肤/肺部炎症。酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清IL-17、IL-10、IL-6、TGF-β1水平。结果阿维A组皮肤厚度、皮肤炎症评分、肺部炎症评分均明显低于硬皮病组[(140.25±20.24)μm比(191.88±40.95)μm,(0.75±0.01)分比(2.00±0.76)分,(1.38±0.52)分比(2.00±0.92)分,P<0.05]。阿维A组血清IL-17、IL-6、IL-10均显著低于硬皮病组[(50.69±11.72)pg/mL比(66.89±16.62)pg/mL,(85.77±12.06)pg/mL比(118.68±22.62)pg/mL,(57.65±21.74)pg/mL比(131.07±22.52)pg/mL,P<0.05]。三组小鼠血清TGF-β1水平差异无统计学意义。结论阿维A可显著改善硬皮病小鼠皮肤及肺部症状,其作用机制可能与影响Th17/Treg的平衡有关。

3733例健康体检者胃幽门螺杆菌检测结果分析

目的了解该院健康体检人群胃幽门螺杆菌(Hp)感染在不同性别、年龄的分布状况。方法收集3 733例健康体检者,采用^(13)C-尿素呼气试验检测其呼出气体中^(13)CO_2与^(12)CO_2的差值以诊断胃内有无感染Hp,并对结果进行统计学分析。结果 3 733例健康体检者胃Hp感染率为36.8%,男性感染率(39.5%)显著高于女性(31.5%),差异有统计学意义(P<0.01)。18~<30岁与30~<50岁年龄组中男女感染率分别为41.5%、27.9%与41.4%、31.8%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论该院健康体检者胃Hp感染率与性别有显著相关性,应引起重视。

浅谈专业型研究生的科研能力培养与提高

科研能力的培养是医学专业型研究生教育的重要环节。本单位在专业型研究生培养过程中坚持以临床技能和科研能力培养并重,建立起了一整套促进专业型研究生科研能力的培养体系。在基础的科研训练及科研能力的培养与提高的同时,研究生临床实际诊断、治疗能力也得到了提高。

2862例健康体检者幽门螺杆菌感染与血脂异常关系的结果分析

目的探讨健康体检人群幽门螺杆菌(HP)感染与血脂的关系。方法采用^(13)C-尿素呼气试验将2 862例健康体检者分为HP阳性组与阴性组,同时检测血脂,对结果进行统计学分析。结果 2 862例健康体检者胃HP感染率为37.6%,男性感染率(40.1%)显著高于女性(33.4%),差异具有统计学意义(P<0.01)。HP阳性组血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度高于阴性组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度低于阴性组(P>0.05),HP阳性组HDL-C异常降低发生率高于阴性组(P<0.05)。结论 HP感染率男性高于女性,且会影响血脂代谢,应引起重视。积极根治HP感染将有利于减少血脂异常的发生,降低其心血管病变。

预防医学专业临床肿瘤学课程体系的开发与探索

恶性肿瘤发病率和死亡率逐年攀升,在人们中进行预防及健康宣教尤为重要。对承载着该项任务的预防医学专业临床肿瘤学教学课程进行开发性设置,确定所需的知识结构,探讨课程组合形式和教学方式。打破常规临床教学模式,突出预防医学专业特点,建立有预防医学专业特色的临床肿瘤学教学课程体系和教学模式。为培养合格的预防医学专业人才、进一步推动教学改革提供参考。

慢病毒介导的重组TM9SF1蛋白通过诱导自噬和内质网应激抑制293T细胞生长

九次跨膜超家族蛋白成员1(transmembrane 9 superfamily protein member 1,TM9SF1)在进化过程中高度保守,在人体组织和多种细胞系广泛表达。目前,关于该蛋白质的功能研究十分有限和初步。本研究采用慢病毒介导的TM9SF1表达系统,研究了重组TM9SF1蛋白的生化特点及其对细胞生长的调控作用。慢病毒感染的293T全细胞裂解液的蛋白质免疫印迹结果揭示,TM9SF1蛋白具有表观分子质量约为70 k D的单体及寡聚体两种主要形式;在室温及加热37℃时蛋白质相对稳定,随变性温度升高(56℃以上)逐渐失去其稳定性。CCK8法显示,与慢病毒空载体感染的293T细胞比较,TM9SF1慢病毒表达载体感染的293T细胞在感染2 d后增殖明显减缓(P<0.001)。Western印迹结果证明,过表达TM9SF1引起LC3Ⅱ表达明显上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例升高,说明TM9SF1可引起293T细胞发生自噬。荧光实时定量PCR结果显示,过表达TM9SF1的293T细胞内质网应激标志分子CHOP、GADD34和XBP1(S)表达水平是对照细胞的3~4倍,提示发生了内质网应激反应。以上结果提示,TM9SF1具有抑制293T细胞生长的功能,该功能可能与其引起的内质网应激和自噬有关。这一结论将进一步加深对TM9SF1在细胞生长调控中的功能的认识。

肿瘤细胞减灭术加腹腔热灌注化疗治疗卵巢癌的术后不良事件分析

目的探讨晚期卵巢癌及复发性卵巢癌患者经肿瘤细胞减灭术(CRS)和腹腔热灌注化疗(HIPEC)治疗后围手术期的不良事件情况。方法回顾性分析2015年4月至2019年7月收治的95例经CRS+HIPEC治疗的晚期卵巢癌或复发性卵巢癌患者的临床病理资料。结果原发性卵巢癌患者44例,复发性卵巢癌患者51例,死亡率和3~4级不良事件发生率分别为2.11%和29.5%。Logistic多因素分析显示直肠切除手术(OR=3.70,95%CI:1.29~10.59,P<0.05)是影响患者CRS+HIPEC术后严重不良事件的危险因素,而原发性卵巢癌、病理组织学类型和淋巴结转移非危险因素。结论CRS+HIPEC术后患者严重不良事件发生率低,围手术期安全性可接受。

siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞炎症因子及血管紧张素转化酶1表达的影响

目的:探讨siRNA干扰内源性TM9SF1基因对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)炎症因子及血管紧张素转化酶1(ACE1)表达的影响。方法:将HUVEC分为阴性对照组(si-NC组)和转染组(si-TM9SF1组)。以脂质体Lipofectamine 3000将TM9SF1基因特异性siRNA转染至HUVEC细胞,采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测特异性siRNA对TM9SF1基因的干扰效果,并比较两组白介素(IL)-1β、IL-8和ACE1基因的相对表达量。结果:转染TM9SF1基因特异性siRNA 48h后,si-TM9SF1组细胞中TM9SF1基因相对表达量明显低于si-NC组(P<0.05),且si-TM9SF1组IL-1β、IL-8和ACE1基因相对表达量亦明显低于si-NC组(P<0.05或P<0.001)。结论:干扰内源性TM9SF1可明显抑制HUVEC中炎症因子IL-1β、IL-8及血管收缩相关基因ACE1的表达。

载丹皮酚透钙磷石骨水泥的制备与表征

背景:丹皮酚是传统骨科良药的活性成分,镇痛消肿,可促进受伤骨组织愈合。透钙磷石骨水泥生物相容性好,且可在体内完全降解,大量研究关注改性以使其更适合临床应用。目的:在透钙磷石骨水泥中负载丹皮酚,制备丹皮酚/透钙磷石骨水泥可注射支架材料,研究丹皮酚的加入对骨水泥固化时间、可注射性、抗压强度、缓释性能、抗菌性能及细胞亲和性能的影响。方法:以硝酸钙和磷酸氢二铵为原料湿法制备磷酸三钙,并1 000℃煅烧成β-磷酸三钙;将壳聚糖溶解于柠檬酸溶液制备固化液;将β-磷酸三钙、磷酸二氢钙和丹皮酚的混合粉末与固化液均匀调拌制备透钙磷石骨水泥。测试骨水泥的固化时间、可注射性、理化结构、抗溃散性、抗压强度、降解性能、药物缓释性能、抗菌性能和细胞亲和性。结果与结论:随丹皮酚含量增加,骨水泥固化时间延长,均在12-17 min之间,但抗溃散性、可注射性、抗压强度和晶相与基团组成均不受显著影响;材料降解性增强,药物释放浓度增加。抑菌圈实验结果显示,复合骨水泥对大肠杆菌生长具有一定抑制作用,但对金黄色葡萄球菌不敏感。将Hep G2细胞悬液滴加于材料表面并培养3 d后,通过扫描电镜可清晰观察到细胞伸出伪足,并能够在材料上黏附生长。

改良倒“L”法内眦赘皮矫正术联合切开法重睑术的临床应用

目的探讨改良倒“L”法内眦赘皮矫正术与切开法重睑术的联合切口设计在临床中的应用效果。方法自2018年1月至2020年1月,共有求美者358人,716只眼,均采用改良倒“L”法矫正内眦赘皮联合切开法重睑术进行手术治疗,倒“L”短臂与重睑切口相连续,长臂隐藏于下睑缘。术后6个月开始通过患者术后效果评价表(Patient Reported Outcome Measures,PROM)随访,最后对术后效果进行评价。结果347位求美者对术后效果满意,11位求美者、15只眼出现了重睑或内眦形态不佳的问题,均予以二次手术修复,满意率达97%。结论本文设计的改良倒“L”法内眦赘皮矫正术与切开法重睑术的联合切口设计是一种简便实用、易于掌握的矫治单睑伴内眦赘皮方法,求美者满意度高,值得在临床推广应用。

不同打靶位点影响人诱导多能干细胞MYO7A杂合突变位点的基因校正中CRISPR/Cas9介导的同源重组效率

应用CRISPR-Cas9系统对人诱导多能干细胞(human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)进行基因编辑,为疾病模型的建立、致病机制研究、药物筛选及基因校正治疗疾病提供了更广阔的平台。相对于CRISPR-Cas9介导的基因敲除,应用该系统介导的同源重组实现基因点突变或突变校正效率要低、且难度偏大。为了实现对MYO7A杂合点突变(c.4118C>T)的人i PSCs的点突变校正,本文构建了表达maxGFP的pX330质粒。针对需校正的突变位点,设计5组识别序列并连接到maxGFP-pX330中构建靶向质粒。将5组打靶质粒分别转染HEK 293FT细胞48 h,细胞表达GFP;测序结果显示,MYO7A基因相应位点出现杂峰,表明打靶质粒具有打断活性。将同源模版单链寡核苷酸链(single-stranded DNA oligonucleotides,ss ODN)与打靶质粒共同电转入人i PSCs后48 h,经流式分选出(5. 8±2. 2)%的细胞表达GFP。分选后细胞行单克隆扩增并测序。结果显示,打靶质粒1和ss ODN组合对点突变校正未成功;打靶质粒2、3、4、5与ss ODN组合均获得了校正后的细胞株。本研究表明,打断位点是影响同源重组校正效率的关键因素。当应用CRISPR/Cas9(或其它核酸酶)介导的同源重组进行基因编辑操作时,可以同时选择多个打靶位点造成基因组不同位置上的双链打断(double-stranded break,DSB)位点,以获得目的单克隆细胞株。本研究为应用CRISPR-Cas9系统对人诱导多能干细胞进行基因编辑提供了有力参考。

自体富血小板纤维蛋白治疗难愈性创面的临床观察

目的观察自体富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)治疗难愈性创面的临床疗效。方法2014年3月至2016年3月首都医科大学附属北京世纪坛医院整形外科收治了33例难愈性创面患者,其中男性25例,女性8例;年龄25~91岁。创面不愈时间1~144个月。33例患者经清创后局部外用PRF治疗,每周一次。以创面愈合为指标,总结临床疗效。结果33例难愈性创面患者经PRF治疗3~7次后,21例痊愈,8例好转,4例无效。随访3~6个月,创面愈合患者无复发。结论采用自体PRF治疗难愈性创面疗效确切,明显缩短了疗程,降低了治疗成本,无不良反应发生,是一种新的简单有效的创面治疗技术。

可注射载Co/Fe/Cu透钙磷石的制备及其抗菌性能

以含Co、Fe、Cu三种离子的磷酸钙为原料,制备载Co、Fe、Cu可注射透钙磷石骨水泥(CFC-Bru)。对CFC-Bru的固化时间、可注射、抗溃散、显微结构、降解性、抗菌性及细胞相容性等进行评价。结果表明:CFC-Bru固化时间约30 min;可注射系数达90%;抗溃散性良好;主晶型为透钙磷石和磷酸二氢钙;表面形貌于对照组变化显著。平板抑菌实验显示CFC-Bru对大肠杆菌、金色葡萄球菌和铜绿杆菌的抑菌直径分别达到了11、15和25 mm;肉汤抑菌实验表明,材料浓度为10 mg/mL时可完全抑制铜绿杆菌生长;为20 mg/mL时可完全抑制大肠杆菌生长;为50 mg/mL时可完全抑制金色葡萄球菌生长。细胞实验显示,CFC-Bru对人成骨肉瘤MG-63无细胞毒性;材料与细胞复合培养3和7天后,细胞可在其表面黏附,生长。该材料具有作为抗菌骨修复材料应用的潜力。

不同血清体积分数对脂肪干细胞成脂分化的影响

背景:培养基中不同体积分数血清对干细胞增殖分化有不同影响。目的:探讨含不同体积分数胎牛血清的培养基对小鼠脂肪干细胞增殖及成脂分化能力的影响。方法:取7-10 d龄C57小鼠皮下脂肪提取脂肪干细胞。培养基中胎牛血清体积分数设定为5%,10%,15%,20%,将小鼠脂肪干细胞培养至第3代,采用CCK-8法测定细胞的增殖能力。成脂诱导分化后采用Bodipy染色观察脂滴形成情况,采用荧光定量PCR法和western blot法检测Cebpa,Pparg基因表达量和C/EBP-α,PPAR-γ蛋白表达量。结果与结论:(1)体积分数为20%胎牛血清组脂肪干细胞在2-6 d的450 nm处吸光度值较体积分数为5%,10%,15%胎牛血清组低,但各组间差异无显著性意义;(2)体积分数为10%胎牛血清组Cebpa,Pparg基因表达量和C/EBP-α,PPAR-γ蛋白表达量最高,体积分数为5%,10%胎牛血清组显著高于体积分数为15%,20%胎牛血清组;(3)结果提示,不同体积分数胎牛血清培养条件对小鼠脂肪干细胞的增殖影响无显著差异。但不同体积分数胎牛血清培养条件下,脂肪干细胞成脂相关基因表达不同,高体积分数胎牛血清可抑制脂肪干细胞向脂肪细胞的分化。

真皮内脂肪组织调控皮肤生理病理过程与机制的研究进展

真皮内脂肪组织(dermal white adipose tissue,dWAT)是位于真皮网状层正下方的一层白色脂肪组织。dWAT在皮肤的生理病理过程中发挥着重要的作用,具有调控毛囊生长周期、促进创面愈合、介导皮肤先天性免疫和对抗皮肤衰老的作用。其最新的研究成果更新并加深了我们对皮肤的认识,并有望成为皮肤损伤修复与疾病治疗的新靶点。本文就dWAT新的研究进展做一综述。

面部骨性轮廓整形(颧骨颧弓、下颌角、颏)十年临床经验回顾

目的回顾总结笔者颅颌面美容团队十年中面部骨性轮廓整形手术的经验。方法对750例下颌角肥大行弧形截骨术,对141例颧骨颧弓肥大行I型或L型截骨同时辅以颞面部软组织提升术,对117例颏部形态异常行颏水平截骨前移或颏水平截骨加高/缩短/左右移动综合手术。结果所有1008例手术患者面型均得到明显改善,并有不同程度面部年轻化表现。其中面神经颞支暂时性损伤3例,大出血1例,感染2例,颏神经损伤2例,均得到有效处理恢复。结论恰当的面部骨性轮廓(颧骨颧弓下颌角颏)手术术式设计,良好的技术操作可以使面部轮廓外形得到显著改善,并有不同程度面部年轻化的效果。

铁路社区老人轻度认知功能障碍危险因素分析

目的通过对铁路社区大专以上学历的老人进行回顾性分析,探讨轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)发生、发展的相关危险因素,以期达到早期发现、早期干预、最终阻止和延缓MCI的发生和发展,提高社区老人生活质量,减少照料者负担,为老年医疗保健事业的投入提供依据。方法在社区内筛选符合条件的人群196例老人入组,收集并请专家复核病史及详细的病例资料,由经过培训并考核合格的医务人员完成专业量表的检查。分别对年龄、性别、寡居、有氧锻炼、高血压病史、血脂异常病史、冠心病史等危险因素进行统计学分析。用Logistic回归分析方法研究年龄、冠心病与MCI的关系。结果符合筛选条件的196例老人入组,其中认知功能正常组118人,MCI组78人。两组在年龄(P<0.001)、寡居(P=0.008)、规律散步(P<0.001)、跳毛巾操(P<0.001)以及是否患冠心病(P=0.003)等方面有显著性差异:MCI组年龄较高,寡居率较正常组偏高,规律散步率较正常组低,参加毛巾操锻炼率较正常组低同时冠心病伴随率明显较正常组高;多元Logistic回归分析显示,MCI的发病与年龄正相关,与是否规律散步负相关。结论 MCI的发病与年龄、是否规律散步相关。