用转化医学理念指导样本资源库建设

转化医学的理念自2003年正式提出后,日益受到各国医学界的广泛关注。转化医学的兴起和发展对生物样本资源的迫切需求与日俱增,对生物样本库的数量和质量也提出了更高的要求。既往样本采集、制备、保存的规范化程度不够,缺乏专人管理和质量监控,样本信息资料无法实现共享,降低了生物样本的应用价值,对后期进一步研究的帮助非常有限[1]。

重视综述写作培训在医学研究生科研能力培养中的作用

医学研究生是医学发展的后备军,医学研究生科研能力的培养是研究生教育的重要环节,而文献综述写作能力培训是研究生科研能力培养的基础,其在论文选题设计、科研设想及科研课题申请中发挥着重要的作用。

特殊感染肝病患者重症监护病房医院感染控制的护理对策

目的：探讨护理人员在重症肝病重症监护病房医院感染控制中的作用。方法选取2009年2月至2012年5月入住首都医科大学附属北京佑安医院重症肝病科的18例特殊感染肝病患者为研究对象，通过加强医院感染控制措施，增强手消毒的意识、提高护士自我管理能力，严格执行操作规程、加强病房环境和医疗仪器管理，切断传播途径、对特殊感染患者的护理等，防止医院感染扩展。结果18例特殊感染肝病患者中，9例（50．0％）痰涂片培养阳性呼吸道感染患者治愈7例（38．9％）；4例（22．2％）尿液培养阳性泌尿生殖系感染的患者经治疗均治愈；3例（16．7％）便培养阳性消化道感染患者经治疗后消化道感染得到控制；1例（5．6％）血培养阳性患者经治疗、复查血培养阴性。18例特殊感染患者的病菌无1例传播给其他住院患者，无一例造成院内感染的发生。结论通过强化对特殊感染患者采取规范操作流程及消毒隔离等有效护理措施，可以大幅度地减少院内感染的发生。

应用于转化医学基础研究的临床数据整理流程设计

临床数据的整理作为临床科研活动的重要组成部分,在转化医学基础研究的工作中起着至关重要的作用。高质量的临床数据是医学试验结果真实可信的有力保障。当前被广泛应用的传统的临床数据整理方法存在着以下几个弊端:信息多元异构,缺乏规范化数据;人工操作耗时长,效率低,错误多,质量评估难;数据清理任务复杂,处理难;人工设计实验表单,无法满足数据再利用的需求等。通过阐述临床数据整理工作的现状和问题,总结了对临床数据整理工作的基本需求,提出了相应的数据整理操作流程设计方案,试图为更加迅速、高效、便捷地获取高质量临床试验数据的技术方法提供思路,进而为转化医学基础研究提供数据支持。

慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化、乙肝肝癌患者Th1/Th2型细胞因子水平变化研究

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝肝硬化(LC)、乙肝肝癌(HCC)患者血清中Th1/Th2型细胞因子水平变化,为慢性乙型肝炎至肝癌的发生发展过程中的免疫变化研究提供线索,并为患者的临床治疗研究提供免疫学指标。方法选取2010年2月-2011年11月于首都医科大学附属北京佑安医院就诊的40例CHB患者、40例LC患者、53例HCC患者,用Luminex技术检测血清中Th1类细胞因子[白细胞介素(interleukin,IL)-12、干扰素(interferon,IFN)-γ和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α]水平及Th2类细胞因子(IL-4、IL-6和IL-10)水平,并将25例健康志愿者作为正常对照组进行比较。结果除TNF-α外,CHB组、LC组和HCC组Th1类IL-12、IFN-γ和Th2类IL-4、IL-6、IL-10细胞因子水平均低于正常对照组;CHB组中大部分Th1类和Th2类细胞因子都高于LC组和HCC组;HCC组中TNF-α细胞因子水平要高于CHB组、LC组。结论 CHB、LC和HCC患者体内Th1/Th2细胞因子分泌水平受到抑制,Th1/Th2平衡发生漂移,对HBV病毒的清除作用受到抑制。TNF-α在肝癌发生过程中发挥着重要作用。

RANTES、MIP-1α、MIP-1β和MCP-1趋化因子在慢性肝病患者的水平

目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝肝硬化(LC)、乙肝相关肝细胞癌(HCC)患者体内正常T细胞表达和分泌调节活化因子(RANTES)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP-1α和MIP-1β)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的表达水平。方法收集2010年2月至2011年11月首都医科大学附属北京佑安医院收治的CHB患者(40例)、LC患者(40例)、HCC患者(53例)的血液标本,采用Luminex技术检测血清趋化因子RANTES、MIP-1α、MIP-1β和MCP-1的表达水平,并以25例健康志愿者血液标本作为正常对照。结果趋化因子MIP-1α、MIP-1β和MCP-1在正常对照组表达水平的中位数分别为9.590、106.490和72.330 pg/ml,高于CHB组、LC组和HCC组;趋化因子RANTES在HCC组的表达水平为16 948.440 pg/ml,依次高于正常对照组、CHB组、LC组,差异有统计学意义(α<0.008)。结论趋化因子RANTES的表达水平与乙肝相关HCC的发生关系密切,可以作为HCC发生发展的辅助监测指标。

难治性慢性丙型肝炎患者抗病毒治疗中NK细胞和Treg细胞的动态变化

目的：观察难治性慢性丙型肝炎的NK细胞和Treg细胞动态变化，分析与抗病毒疗效相关的免疫因素。方法采用开放性、前瞻性临床队列研究。入组2009年9月-2010年10月收治的难治性慢性丙型肝炎患者41例（初治组30例和无应答组11例）和健康对照（HC）者11例，初治组给予聚乙二醇干扰素（PEG-IFN）α-2a 180μg/周联合利巴韦林10．6～15 mg·kg-1·d-1治疗48周，无应答组给予PEG-IFNα-2a 180μg/周联合利巴韦林15 mg·kg-1·d-1治疗72周；动态留取细胞和血清，进行HCV RNA、肝功能和NK细胞和Treg细胞的检测，分析与疗效相关的免疫因素。计量资料采用t检验或秩和检验，计数资料采用χ2检验。结果所有患者均完成抗病毒治疗和24周随访，初治获得SVR者17例（56．7％），未获得SVR（nSVR）者13例；无应答组获得SVR者3例（27．2％），未获得SVR（RFP）者为8例（72．7％）。基线总体患者的NK细胞频率低于HC 组，Treg细胞频率高于HC组；同时抗病毒治疗疗程中，初治获得SVR者24周NK细胞频率较基线和4周明显增加，Treg细胞频率较基线和4周明显下降；同时初治nSVR者Treg细胞频率24周时较基线和4周明显升高；无应答组再治疗仍未获得SVR者无论NK细胞频率或者Treg细胞频率均未见明显变化。结论 NK细胞频率的降低以及Treg细胞频率的增加与HCV慢性感染有关；抗病毒治疗后NK细胞及Treg细胞的动态变化，可以预测抗病毒疗效：疗程中NK细胞频率的增加以及Treg细胞频率的下降与疗效好有关。

HCV对HIV/HCV共感染患者病情进展的影响

目的探讨HCV对HIV/HCV共感染病情进展的影响。方法研究对象为2012年8月到北京佑安医院随访的HIV/HCV共感染者29例及HIV单独感染者20例。两组患者年龄、性别及HIV感染时间及感染方式、感染的HIV病毒亚型均具有可比性。外周血生化指标检测并采用瞬时弹性扫描仪FibroScan评估肝脏功能及纤维化程度,运用流式细胞技术检测外周血CD4+T、CD8+T细胞绝对计数。两组计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验。结果 HIV/HCV共感染组ALT、AST及TBil水平分别为(76.16±81.25)U/L、(87.66±71.32)U/L、(14.21±9.56)μmol/L,明显高于HIV单独感染组[(27.74±20.63)U/L、(45.65±16.95)U/L、(10.26±3.22)μmol/L],差异具有统计学意义(P值分别为0.004、0.005及0.046)。与HIV单独感染组相比,HIV/HCV共感染组Stiffness指数有升高的趋势,但差异无统计学意义(t=1.889,P=0.080)。HIV/HCV共感染组HIV病毒载量(拷贝/ml)的对数值为3.66±0.97明显高于HIV单独感染组的3.02±0.90(t=2.251,P=0.030)。HIV/HCV共感染组、HIV单独感染组CD4+T淋巴细胞计数及CD4+T/CD8+T细胞比例分别为(374.25±185.48)/μl及(0.33±0.17)、(496.45±230.98)/μl及(0.46±0.27),HIV/HCV共感染组CD4+T淋巴细胞计数及CD4+T/CD8+T细胞比例低于HIV单独感染组,差异具有统计学意义,P值分别为0.048、0.043。共感染组艾滋病发病率(27.59%)呈现出较HIV单独感染组(5%)高的趋势(P=0.063)。结论HCV促进HIV/HCV共感染者肝脏损伤,增强HIV复制,加剧机体免疫功能损伤,HCV可能加速HIV/HCV共感染者的病情进展。

1073例儿童手足口病病原学检测结果及临床特征分析

目的了解手足口病(HFMD)儿童病例中肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的感染状况及重症HFMD病例的临床特征和实验室检查结果。方法采集HFMD患儿咽拭子标本,检测EV71和CA16感染情况,分析患儿性别、年龄分布情况并对重症患儿的临床特征和实验室检查结果进行回顾性分析。结果 1073例HFMD患儿中EV71阳性494例(46.04%),CA16阳性97例(9.04%),EV71阳性检出率明显高于CA16(P=0.001)。494例EV71阳性患儿中,男299例(60.53%),女195例(39.47%);97例CA16阳性患儿中,男59例(60.82%),女38例(39.18%),男性患儿构成比显著高于女性。EV71或CA16阳性患儿中"1～<2岁"组和"2～<3岁"组构成比明显高于其他年龄组。本组重症病例62例,其中重型50例(80.65%),危重型12例(19.35%)。前者以神经系统表现为主,循环系统、呼吸系统轻度受累,无死亡病例;后者并发神经系统、循环系统、呼吸系统等多器官功能损害,5例死亡。结论 2010年北京地区HFMD流行的病原体的优势株可能为EV71;男性患儿高于女性,1～3岁儿童为易感人群。危重型可引起死亡,实验室指标的变化对协助诊断重型HFMD及提示重型向危重型进展有一定意义。

外周血趋化因子RANTES对肝细胞癌的诊断价值

目的探讨外周血调节活化正常T细胞分泌与表达因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)对乙肝病毒相关的肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法选择北京佑安医院2010年2月至2011年11月收治的慢性乙型肝炎患者35例、乙型肝炎肝硬化患者34例及乙肝病毒相关HCC患者47例。Luminex技术检测外周血清中趋化性细胞因子RANTES水平。结果HCC患者外周血RANTES水平[(23.27±21.16)ng/ml]明显高于慢性乙型肝炎[(7.81±4.06)ng/ml]及乙肝肝硬化患者[(5.36±6.13)ng/ml],3组比较差异有统计学意义(P<0.001)。HCCⅡ期患者外周血RANTES水平明显高于Ⅰ期患者,差异有统计学意义[(31.94±25.94)ng/ml vs.(14.24±8.10)ng/ml,P=0.004]。RANTES预测慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化进展为HCC的阈值为7.85 ng/ml,敏感性为93.5%,特异性为72.5%。结论 HCC患者外周血中趋化因子RANTES水平明显增高,且HCCⅡ期患者RANTES水平明显高于Ⅰ期患者,可作为乙肝病毒相关HCC诊断及病情评估的参考指标。

单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者外周血T淋巴细胞分化分析

目的探讨单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者外周血T淋巴细胞分化情况。方法采集单独感染HCV患者(12例)、HCV/HIV共感染患者(27例)以及正常人群(13例)的外周静脉血,检测ALT、AST等生化指标;提取外周血单个核细胞(PBMC),通过流式细胞检测技术检测CD4+T和CD8+T细胞比例。结果 HCV/HIV共感染患者ALT水平[(53.08±9.78)U/L]显著高于单独感染HCV患者[(26.22±4.25)U/L],差异有统计学意义(P=0.0064)。处于中期分化状态的CD4+T细胞,在正常人群中所占比例为(35.13±3.24)%,显著高于单独感染HCV患者[(9.01±3.70)%]和HCV/HIV共感染患者[(8.10±2.14)%],差异有统计学意义(P<0.001)。正常人群、单独感染HCV患者与HCV/HIV共感染患者晚期分化的CD4+T细胞所占比例分别为(2.52±2.54)%、(14.30±9.85)%及(15.23±11.58)%,正常人群晚期分化的CD4+T细胞比例显著高于单感染HCV与HCV/HIV共感染患者的比例,差异有统计学意义(P<0.05),单独感染HCV与HCV/HIV共感染患者之间无差异。正常人群处于早期分化和中期分化的CD8+T细胞的比例分别为(42.73±2.08)%、(36.17±2.85)%,均显著高于单独感染HCV患者同期水平[(28.27±4.36)%、(13.15±4.23)%]及HCV/HIV共感染患者[(18.02±2.01)%、(16.60±3.06)%],差异均有统计学意义(P<0.05);单独感染HCV患者的早期分化CD8+T细胞比例也显著高于HCV/HIV共感染患者,差异有统计学意义(P<0.05)。而处于晚期分化的CD8+T细胞,正常人群所占比例为(12.02±1.54)%,显著低于单独感染HCV患者[(49.30±3.85)%]及HCV/HIV共感染患者[(54.23±2.58)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论单独感染HCV及HCV/HIV共感染影响T淋巴细胞的分化状态;HCV/HIV共感染影响处于早期分化的CD8+T细胞比例。

乙型肝炎相关性肝癌患者血浆粒细胞集落刺激因子检测分析

目的探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)对乙型肝炎(乙肝)相关性肝癌的诊断价值。方法采用Luminex液相芯片方法检测87例乙肝相关性肝癌患者(肝癌组)、40例慢乙肝患者(慢乙肝组)及25例健康对照组(对照组)血浆中G-CSF水平,评价G-CSF对乙肝相关性肝癌的诊断价值。结果肝癌组患者血浆G-CSF的平均值为(1152.23±458.57)pg/ml,明显高于慢乙肝组[(137.69±89.52)pg/ml]和健康对照组[(111.04±49.42)pg/ml],差异均有统计学意义(P均=0.000)。3组间G-CSF检测结果的差异有统计学意义(F=157.760,P=0.000)。慢乙肝组和对照组G-CSF水平的差异无统计学意义(P=0.333)。肝癌分期不同组间G-CSF水平的差异有统计学意义(F=2.495,P=0.037)。血浆G-CSF诊断乙肝相关性肝癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.998,以G-CSF≥256.00pg/ml为阳性诊断界值,G-CSF诊断乙肝相关性肝癌的敏感性为98.9%,特异性为100.0%。结论乙肝相关性肝癌患者G-CSF呈高水平表达,G-CSF可作为诊断乙肝相关性肝癌的候选指标。

解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响

目的研究解郁方抗抑郁作用的机理。方法采用酶联免疫检测试剂盒测定小鼠脑组织中单胺类神经递质含量;分光光度计法检测小鼠脑组织中单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)活性,来研究解郁方抗抑郁作用的机制。结果解郁方Ⅰ和Ⅱ(12.00、6.00 g·kg-1)组均可显著升高小鼠脑内去甲肾上腺素、5-羟色胺、多巴胺(分别为P<0.01,P<0.05),解郁方Ⅰ和Ⅱ组可显著降低MAO活性(分别为P<0.01,P<0.05)。结论解郁方可能是通过抑制MAO活性,使突触间隙的单胺类神经递质含量升高,而起到抗抑郁作用。

丙型肝炎病毒感染的适应免疫应答:T细胞作用机制进展

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)已成为全球重要的公共卫生问题之一,获得性适应性免疫应答在HCV感染最终结局的形成中起着核心作用,T细胞在适应性免疫应答中起关键作用。本文对T细胞在HCV感染免疫机制中作用的研究进展作一概述。

HCV/HIV共感染者T细胞表面CD38分子的表达水平

丙型肝炎病毒（HCV）/人类免疫缺陷病毒（HIV）共感染对丙型病毒性肝炎的病情进展有影响,其机制尚不清楚。CD38分子是T细胞表面活化标志之一[4,5],在HCV/HIV共感染者中T细胞的活化是否发生变化尚无定论。我们于2012-2013年通过对比分析单独HCV感染组和HCV/HIV共感染组患者T细胞表面CD38分子的表达水平,了解HCV/HIV共感染者的T细胞活化的变化，报告如下。

T细胞在慢性乙型肝炎发病机制中的作用研究进展

慢性乙型肝炎已成为全球重要的公共卫生问题之一,获得性适应性免疫应答在慢性HBV感染最终结局的形成中起着核心作用,T细胞在适应性免疫应答中起关键作用。本文对T细胞在慢性乙型肝炎发病机制中作用的研究进展进行综述。

解郁方对抑郁模型小鼠血浆皮质醇及一氧化氮的影响

目的:研究解郁方对利血平模型小鼠血浆皮质醇(cortisol,CORT)及一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)的影响。方法:采用放射免疫法测定小鼠血浆CORT浓度,硝酸还原法测定小鼠血浆NO含量,研究解郁方抗抑郁作用的可能机制。结果:解郁方高剂量组可显著升高小鼠血浆CORT及NO含量,差异显著(P<0.05)。结论:解郁方治疗的作用机理可能与升高血浆CORT及NO含量有关。

“翻转课堂式”教学模式在传染病本科教学中的应用探讨

"翻转课堂式"教学模式充分体现了"学生为主体,教师为主导"的教学理念,具有独特的内涵和特征。在传染病教学中引入"翻转课堂式"教学是传染病发展的需要,也是教学改革的挑战。通过课前视频教学课件自学、课上采用问题式学习、学生/教授自我及相互评估体系建设三个层次探索传染病教学中应用"翻转课堂式"教学模式,为传染病学教学改革和发展提供新思路。

埃博拉病毒免疫学致病机制研究进展

2014年西非埃博拉病毒病业已成为本年度最严重的公共卫生事件,其暴发迅猛、病死率高、缺乏特效治疗方法和有效疫苗的现状引起了全球的恐慌和卫生医疗领域的高度关注。埃博拉病毒致病主要机制为:感染单核吞噬细胞系统和树突状细胞,导致其大量分泌细胞因子和趋化因子,减少干扰素生成,阻断干扰素作用通路,并诱导多种免疫细胞大量凋亡;诱导多种细胞表面分子表达影响凝血功能;其直接散播和复制同时也能导致大量组织损伤。本文就埃博拉病毒免疫学致病机制研究进展进行综述。

原发性肝癌患者亲环素B特异性T细胞反应研究

目的探讨亲环素B（CypB）特异性T细胞反应强度变化在原发性肝癌患者中意义。方法以北京佑安医院收治的107例HBV相关肝病患者为研究对象，分为慢性肝炎组（49例）、肝硬化组（22例）及肝癌组（36例）。采集患者外周血并分离外周血单个核细胞。采用体外合成CypB全序列多肽技术，运用ELISPOT方法分析107例患者外周血单个核细胞对CypB合成肽的细胞反应情况。结果慢性肝炎、肝硬化、肝癌患者CypB特异性T细胞反应强度分别为0[0—0]SFU／10^9PBMCs、0[0～0]SFU／10^9PBMCs及20[0—60]SFU／10^6PBMCs，3组比较差异有统计学意义（P=0．0210）；3组反应频率分别为18．4％（9／49）、18．2％（4／22）及47．2％（17／36），差异有统计学意义（P=0．071）。CypB90～208氨基酸肽段诱导的T细胞反应强度高于1～107氨基酸肽段[（34．3±5．3）SFU／10^6 PBMCsVS．（70．0±11．0）SFU／10^6PBMCs]，差异有统计学意义（t=2．922，P=0．0064）。生存分析显示，CypB特异性T细胞反应阴性组肿瘤复发率明显高于CypB特异性T细胞反应阳性组（P=0．0492）。结论肝癌患者外周血中存在CypB特异性T细胞反应，可能成为肝癌预警标志物和未来肝癌免疫治疗的新靶点。