儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎分离株的多重耐药克隆研究

目的研究中国儿童社区获得性耐甲氧西林金葡菌（CA—MRSA）肺炎分离株的多重耐药情况与克隆之间的关系。方法2006--2012年收集85株CA—MRSA分离株和50株医院获得性MRSA（HA-MRSA）分离株，进行多位点序列分型（MLST）和16种抗菌药物药敏试验，用脉冲场凝胶电脉（PFGE）和Southern印迹杂交定位莫匹罗星耐药基因mupA。结果CA—MRSA和HA—MRSA对红霉素和克林霉素的耐药率较高，CA—MRSA对庆大霉素、四环素和利福平的耐药率低于HA-MRSA（分别为36．5％和60．0％，P〈0．01；34．1％和54．0％，P〈0．05；8．2％和48．0％，P〈0．01），对头孢呋辛、氯霉素和红霉素的耐药率高于HA—MRSA（100％和72．0％，P〈0．01；22．3％和2．0％，P〈0．01；87．0％和72．0％，P〈0．05）。CA-MRSA多重耐药率明显低于HA-MRSA。CA-MRSA多重耐药表型呈多样化，4种克隆（ST59、ST88、ST965和ST45）的多重耐药率高于50．0％。CA—MRSA中，1株对夫西地酸耐药，5株对莫匹罗星耐药，高水平莫匹罗星耐药基因mupA位于23～54．2kb的质粒上。结论儿童CA-MRSA分离株对非β内酰胺类抗菌药物有较高的耐药率，并且多重耐药率和耐药谱与菌株克隆有关。

上呼吸道感染儿童鼻咽部携带流感嗜血杆菌状况及血清型和耐药性研究

目的 了解北京儿童医院门诊上呼吸道感染儿童流感嗜血杆菌的携带情况、血清分型情况及对抗生素的敏感性,为临床合理用药提供参考.方法 自2013年3月至2014年2月从本院门诊就诊的2930例上呼吸道感染儿童采集鼻咽拭子标本,进行细菌培养和鉴定,从分离的流感嗜血杆菌中采用数字表法随机选择100株,采用乳胶凝集法检测菌株血清型,E-test方法检测其对抗生素的敏感性.应用软件WHONET 5.3进行抗菌药物敏感性分析,统计学分析使用软件SPSS 16.0进行.有关率的比较采用x2检验或Fisher精确概率法,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 共采集2930例1月龄至16岁患儿的鼻咽拭子,分离出流感嗜血杆菌271株,总携带率为9.2％.4-6月份分离阳性率高,分别为19.5％（8/41）、20.6％（14/68）和24.5％（25/102）;～4岁至～6岁年龄组儿童分离阳性率最高,均超过10.0％;男性患儿分离阳性率高于女性,分别为10.4％ （181/1733）和7.5％（90/1197）（x2=7.219,P＜0.05）.所有菌株均不能分型.100株菌株中对青霉素不敏感率为35.0％,产酶率为23.0％;对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛、四环素和氯霉素的敏感率较高,分别为91.0％、82.0％、97.0％和96.0％.结论 本院门诊上呼吸道感染儿童鼻咽部流感嗜血杆菌携带率为9.2％,分离株对青霉素的敏感性较低.

儿童社区获得性肺炎流行病学和病原学研究进展

社区获得性肺炎(community acquired pneumonia,CAP)仍然是造成全球儿童死亡的常见原因,尤其是造成5岁以下儿童死亡的首要原因。目前儿童CAP的管理(包括病原学诊断、疫苗引进后疾病流行病学变化情况等)仍有许多问题尚不明确,现对儿童CAP的流行病学和病原学的研究现状进行综述,从而为该病的防治提供帮助。

北京儿童医院6群肺炎链球菌抗生素敏感性分析及分子流行病学研究

目的了解北京分离自儿童的6群肺炎链球菌的抗生素敏感性及分子流行病学特征。方法以1997-2008年及2010年北京儿童医院收治的呼吸道感染儿童鼻咽部分离的131株6群肺炎链球菌为研究对象,采用纸片扩散法和E-test法检测11种抗菌药物的敏感性,采用多位点序列分型(MLST)分析菌株序列型(ST),eBURST软件分析确定克隆群(CC)。结果 131株6群肺炎链球菌血清型分布为6A型81株(61.8%)、6B型34株(26.0%)、6C型12株(9.2%)和6D型4株(3.1%)。所有菌株均对头孢曲松、万古霉素、左氧氟沙星和阿莫西林-克拉维酸敏感,对青霉素的不敏感率为14.5%,红霉素耐药率高达93.1%。MLST及克隆群分析显示6A型以ST982(48.1%)、CC4536(16.0%)、CC2754(6.2%)及CC8616(6.2%)常见;6B型以CC4542(32.4%)和CC90(17.6%)常见;6C型主要为ST2912(66.7%);4株6D型菌株均为ST982。6A和6B型肺炎链球菌中,散在克隆的构成比有升高趋势,它们对β-内酰胺类抗生素具有较强耐药性。结论 6群肺炎链球菌以6A和6B型常见,6C和6D型少见;6A和6B型肺炎链球菌的克隆群构成随年代发生变化,一些散在耐药性较强的克隆有增多趋势。

北京儿童医院14型肺炎链球菌耐药性分析及分子流行病学研究

目的了解14型肺炎链球菌的抗生素敏感性及分子流行病学特征。方法以北京儿童医院1997—2010年分离自儿童鼻咽拭子的14型肺炎链球菌分离株为研究对象,采用E-test法和纸片扩散法检测菌株对11种抗生素的敏感性,采用多位点序列分型(MLST)确定菌株序列型(ST),eBURST软件分析确定克隆群(CC)。聚合酶链式反应(PCR)检测红霉素耐药基因ermB和mefA,扩增并测序二氢叶酸还原酶基因dhfr。结果肺炎链球菌分离株中14型所占比例在监测期间升高,从1997—1999年的3.9%升高至2010年的9.3%。61株14型肺炎链球菌均对青霉素、阿莫西林-克拉维酸、头孢曲松敏感,但MIC50、MIC90和最大MIC值在监测期间升高。头孢呋辛不敏感率从1997—1999年的0上升至2010年的84.6%。61株均对红霉素耐药,携带ermB基因,4株(6.6%)同时携带mefA基因。36株磺胺耐药菌株均携带Ile100-Leu变异。MLST共分出11种STs,ST875最常见(32株,占52.5%),其次是ST876(13株,占21.3%)。从1997到2010年,CC875的构成比下降(从1997—1999年的100%降为2010年的0),CC876的构成比升高(从1997—1999年的0升至2010年的92.3%)。CC876对β-内酰胺类抗生素耐药性明显高于CC875。结论 1997年到2010年肺炎链球菌中14型的构成比升高,14型菌株对β-内酰胺类抗生素耐药性增强,与具有高β-内酰胺类抗生素耐药性的克隆群CC876的播散有关。

拉氧头孢钠在新生儿人群中群体药代动力学的分析研究

目的应用非线性混合效应模型(nonlinear mixed effect modeling,NONMEM)法,在新生儿人群中建立拉氧头孢钠群体药代动力学(pharmacokinetic,PPK)模型,为制定个体化给药方案提供参考。方法收集42例北京妇产医院新生儿重症监护病房应用拉氧头孢钠治疗感染的新生儿临床资料,包括生物学资料、用药资料、血药浓度测定结果及同期生化指标,其中采集有效血药浓度数据共64份。应用NONMEM软件,采用一级吸收和消除的一室模型,建立拉氧头孢钠在新生儿中的PPK模型。考察患儿的生物学信息以及同期生化指标对清除率(clearance,CL)和表观分布容积(volume of distribution,V)的影响。采用1000次自举法(Bootstrap)及正态预测分布误差(normalized predictive distribution error,NPDE)对模型进行验证。结果拉氧头孢钠在新生儿人群中的最终模型为:CL(L)=0.35×(纠正胎龄/38)^(2.51)×(每日体重/2390)^(0.75),V(L)=1.43×(每日体重/2390)。Bootstrap及NPDE结果与模型拟合值相符,具有更高的准确性和精确性。结论应用NONMEM软件成功地建立了新生儿阶段拉氧头孢钠的PPK模型,其中每日体重与纠正胎龄为影响清除率最重要的因素,每日体重为影响分布容积最重要的因素。

卡介苗接种后发生感染的可能原因研究现况

卡介苗是用于预防结核病的减毒活菌疫苗。虽然卡介苗被认为是最安全的疫苗之一,但仍会出现一些不良反应,其中最严重的是全身播散性卡介苗感染。虽然卡介苗相关感染的发病率低,但预后较差,严重者可致死。因此,加强对卡介苗接种后发生相关感染的认识,特别是对其发病原因的研究,有助于为卡介苗接种和临床疾病的救治提供帮助。

儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌肺炎分离株分子及临床特征

目的研究儿童社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)肺炎临床分离株的分子特征、耐药性及Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因携带情况。方法 2006—2012年国内8家儿童医院在CA-MRSA肺炎患儿中分离出76株菌株;用PCR方法检测PVL基因;对所有菌株进行MLST、spa和SCCmec分型;采用琼脂稀释法进行14种抗生素的体外药物敏感试验。结果 76株CA-MRSA分离株中有32株(42.1%)携带PVL基因。在11种MLST型中,ST59(44.7%)是最主要的ST型;在17种spa型中,以t437(46.1%)为主;共有2种SCCmec型,以Ⅳ(82.9%)为主。CA-MRSA对红霉素和克林霉素的耐药率分别为86.9%和72.4%。PVL阳性菌株对庆大霉素的耐药率高于PVL阴性菌株,差异有统计学意义(53.1%比25.0%,P=0.012)。5例坏死性肺炎中4例分离株为PVL阳性T910-MRSA-Ⅳa-t318,1例为PVL阴性ST398-MRSA-Ⅴ-t034。结论 ST59-MRSA-Ⅳa-t437是儿童CA-MRSA肺炎分离株的主要流行克隆,未发现PVL与坏死性肺炎有相关性,但PVL阳性ST910-MRSA-Ⅳa-t318菌株与坏死性肺炎有关。CA-MRSA肺炎分离株对红霉素和克林霉素有较高的耐药性。

儿童感染肺炎链球菌的血清型和耐药性分析

目的了解首都医科大学附属北京儿童医院住院患儿肺炎链球菌分离株的血清型分布和耐药性,以指导临床合理用药。方法采用荚膜肿胀试验对首次分离的肺炎链球菌进行血清型分型,用纸片法和BD Phoenix 100全自动微生物仪进行药敏试验。结果 2013年3月-2019年2月共收集非重复肺炎链球菌834株,主要分离自3岁以下患儿(612株,73.4%)。患儿以肺部感染为主(739例,88.6%)。834株肺炎链球菌中分离自脑脊液菌株19株;侵袭性菌株和非侵袭性菌株分别为90 株和744株。共检出43种血清型,常见的血清型为19F、19A、23F、14、6A、6B。青霉素敏感株(PSSP)354株(42.4%),青霉素不敏感株(PNSP)480株(57.6%);未发现利奈唑胺和万古霉素耐药株。肺炎链球菌对莫西沙星、左氧氟沙星和氯霉素的敏感率高(>95%);但对红霉素、克林霉素和四环素的耐药率高(>94%)。侵袭性菌株和非侵袭性菌株对抗菌药物的耐药率差异无统计学意义。血清型为19F和19A的菌株对多种抗菌药物的耐药率明显高于其他血清型菌株。PNSP对多种抗菌药物的耐药率高于PSSP。结论该院住院患儿感染肺炎链球菌血清型以19F、19A、23F、14、6A、6B为主,对莫西沙星、左氧氟沙星和氯霉素的耐药率低,对红霉素、克林霉素和四环素的耐药率高。血清型19F和19A的菌株对抗菌药物的耐药率高于其他血清型菌株。应加强细菌耐药性监测,根据患儿感染细菌的血清型和药敏试验结果合理选用抗菌药物。

北京地区近5年来儿童EB病毒感染疾病中BZLF1及其启动区Zp基因特征分析

为了解儿童原发性Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染流行株BZLF1基因及其启动区Zp的基因特征。本文对北京儿童医院2006年至2011年收治的EBV感染传染性单核细胞增多症(EBV-associated infectious mononucleosis,EBV-IM)134例和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(EBV-associated hemophagocytic lymphohistiocytosis,EBV-HLH)32例患儿的外周血来源的DNA进行了EBNA3C、BZLF1和Zp基因片段的扩增分析。根据EBNA3C基因片段扩增产物的大小进行EBV-Ⅰ/Ⅱ分型,对BZLF1和Zp基因扩增产物进行直接序列测定,并用BioEdit 7.0.9进行序列分析。实验显示①儿童EBV感染流行株以EBV-I型为主,占97.2%(140/144),EBV-Ⅱ型为2.8%(4/144);②共检测出3种BZLF1基因型,12种亚型(包括6种新发现的亚型)。BZLF1-A型和BZLF1-B型两基因型在两种疾病中的分布无统计学差异(P=0.083)。BZLF1-A1是儿童EBV感染性疾病中的常见基因型。BZLF1-A型第一内含子以3个29bp重复序列为主,而B型以30bp重复序列为主(P=0.000),且重复序列的个数波动于1-13个不等;③共检测出Zp-P、Zp-V3、Zp-V4、Zp-V1四种Zp基因型,并且这四种基因型在EBV-IM和EBV-HLH两种疾病中的检出率无统计学差异(p值分别为0.272、0.252、1.0、1.0);④BZLF1和Zp基因连锁分析显示,BZLF1-A1基因型毒株的Zp基因分型以Zp-V3为主(P=0.000),而BZLF1-B4基因型以Zp-P型为主(P=0.000)。EBV-Ⅰ+BZLF1-A1与Zp分型中Zp-V3高度连锁(P=0.000);EBV-Ⅰ+BZLF1-B4与Zp-P高度连锁(P=0.000)。结果证实:①BZLF1-A1是儿童EBV感染的常见基因型。BZLF1-A型其第一内含子重复序列以29bp为主,而BZLF1-B型则以30bp的重复序列为主。②Zp-P和Zp-V3是儿童EBV感染的常见Zp基因型,二者检出率相似。③BZLF1-A1型的Zp分型以Zp-V3为主,而BZFL1-B4型则以Zp-P分型为主。EBV-Ⅰ+BZLF1-A1与Zp分型中Zp-V3高度连锁,而EBV-Ⅰ+BZLF1-B4与Zp-P高度连锁。

EB病毒感染与儿童肝损害

EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）与许多疾病相关。在儿科,EBV感染疾病主要包括传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis,IM）、慢性活动性EBV感染（chronic active Epstein-Barr virus infection,CAEBV）、EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症（Epstein-Barr virus-related hemophagocytic lymphohistiocytosis syndrome,EBV-HLH）等,这些疾病多伴有肝脏损害，出现肝脏肿大、肝功能异常和黄疸。本文将对儿童EBV感染及其肝脏损害进行概述。

儿童侵袭性肺炎链球菌感染的血清型和耐药性

目的了解某医院住院患儿侵袭性肺炎链球菌感染的临床特征以及菌株的血清型和耐药性,以期指导临床合理用药,寻找防治侵袭性肺炎链球菌感染的有效方法。方法回顾性分析2014年1月—2018年12月该院明确诊断为侵袭性肺炎链球菌感染患儿的临床资料,肺炎链球菌的药敏结果、血清型,以及疫苗对其血清型覆盖情况。结果74例侵袭性肺炎链球菌感染患儿主要为幼儿期患儿(55.4%),感染部位主要以单部位血液为主(44.6%)。74株肺炎链球菌,其中22株分离自脑脊液标本,分为13种血清型,常见的血清型为19F、19A、14和23F。青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)检出率为56.7%(42株),未发现对利奈唑胺、万古霉素、莫西沙星和左氧氟沙星耐药的肺炎链球菌。不同血清型菌株的耐药率有明显差异,血清型19F和19A对青霉素、头孢噻肟、头孢吡肟和美罗培南的耐药率高于其他血清型。肺炎链球菌疫苗对肺炎链球菌的覆盖率:PCV7为63.5%,PCV13为97.3%。结论该医院住院患儿侵袭性肺炎链球菌感染多见于婴幼儿,分离的肺炎链球菌血清型以19F、19A、14、23A为主,PCV13对这些血清型覆盖率高,可通过接种疫苗减少侵袭性肺炎链球菌感染的发生。流行率高的血清型往往表现出更高的耐药性,应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物。

儿童金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染临床分离株的分子及耐药特征研究

目的了解北京地区儿童金黄色葡萄球菌皮肤软组织感染（skin and soft tissue infections，SSTIs）临床分离株的分子学分型、相关毒力基因携带和耐药情况。方法收集2016年1月至12月首都医科大学附属北京儿童医院金黄色葡萄球菌SSTIs病例52例，并进行临床资料采集分析。采用头孢西丁纸片法和mecA基因检测鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin－resistant Staphylococcus aureus，MRSA）或甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin－susceptible Staphylococcus aureus，MSSA）；对所有菌株进行多位点序列分型（multilocus sequence typing，MLST）及葡萄球菌A蛋白（spa）序列分型，并对MRSA菌株进行葡萄球菌盒氏染色体（staphylococcal cassette chromosome mec，SCCmec）分型；采用PCR方法检测pvl、eta、etb、tsst-1及hlg基因；采用琼脂倍比稀释法检测菌株对16种抗生素药物敏感性。结果52例金黄色葡萄球菌SSTIs患儿中（其中MRSA SSTIs患儿30例，MSSA 22例），0～1岁23例（44.2%），最常见的疾病为新生儿脐炎12例（12/52株，23.1%），其次为皮肤及软组织脓肿11例（11/52株，21.2%）。MRSA分离株的流行克隆是ST59-MRSA-SCCmecⅣa-t437（14/30株，46.7%），MSSA分离株并未发现明显的流行克隆。共检测出10种序列型（ST型别），以ST22为主（6/22株，27.3%）；14种spa型别，其中t309型5株（5/22株，22.7%）。MRSA及MSSA分离株多重耐药率均〉85%。对红霉素、青霉素、氯霉素及克林霉素的耐药率分别为100.0%、94.2%、69.2%、63.5%，但均对复方磺胺甲唑、莫匹罗星、夫西地酸、替加环素、利奈唑胺及万古霉素敏感。pvl基因阳性率为40.4%，MRSA和MSSA分离株pvl基因的携带率差异无统计学意义（P〉0.05）。2例葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征患儿的临床分离株中均检测到eta及etb基因。结论北京地区儿童金黄色葡萄球菌SSTIs临床分离株多见于新生儿脐炎及脓肿，多重耐药率高，经验性治疗不宜首选红霉素和克林霉素。ST59-MRSA-SCCmecⅣa-t437是MRSA分离株最常见流行克隆，而MSSA分离株的遗传背景更多样化。

EB病毒感染相关疾病的基因缺陷研究进展

Epstein—Barr病毒（EBV）是一种常见的疱疹病毒，人类普遍易感，其感染可致多种不同疾病。存在某些基因缺陷的人群感染EBV后常临床症状重，可引发严重疾病，如噬血细胞综合征、慢性活动性EBV感染及肿瘤等，预后不良。发现潜在的基因缺陷疾病有助于对EBV感染早期防范及治疗。现对EBV感染相关疾病的基因缺陷研究进展进行综述。

EB病毒及儿童EB病毒相关疾病

EB病毒属于疱疹病毒γ亚科，为双链DNA病毒。血清流行病学调查显示，EB病毒在人群中的感染率超过95％。EB病毒是最成功的一种病毒，可在宿主记忆B淋巴细胞内建立持续终身的潜伏感染。同时，EB病毒也是第1个被发现的肿瘤病毒，与伯基特淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌、部分类型的胃癌、T／自然杀伤细胞淋巴瘤等相关。除肿瘤性疾病，EB病毒感染还可引起非恶性淋巴增殖性疾病及自身免疫性疾病等。现主要介绍儿童EB病毒感染相关疾病。

耐药结核病发病机制的研究进展

结核病是由MTB引起的传染性疾病,是全球仅次于艾滋病的第二大致死性感染性疾病.20世纪40年代以来随着抗结核药物的有效使用,结核病的发病率和死亡率曾一度大幅下降,但近年来由于耐药MTB的出现和广泛流行,结核病死灰复燃,给结核病的防控工作带来了严峻挑战.据世界卫生组织（WHO）估计,2013年全球报道的耐多药结核病（multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB）约30万例,其中9.0％的病例为广泛耐药结核病（extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB）,而全球MDR-TB的治愈率仅为48％[1].因此,耐药结核病,尤其是MDR-TB已成为目前结核病防控工作的重点和难点.

重视儿童EB病毒感染及其相关疾病的诊治

EB病毒（EBV）是一种具有重要临床意义的病毒，可引起多种肿瘤性疾病、非恶性淋巴增殖性疾病及自身免疫性疾病等。在儿童中，EBV感染相关疾病的临床表现复杂多样，有时不典型和缺乏特异性。因此，需要重视儿童EBV感染及其相关疾病的实验诊断、规范相关疾病的抗病毒治疗方案、加强慢性活动性EBV感染和EBV相关噬血细胞性淋巴组织细胞增生症等儿童重症EBV感染相关疾病的诊治研究。

重视肺炎链球菌种群构成研究

肺炎链球菌常定植于人的鼻咽部，是人体正常定植微生物群，托幼机构的儿童肺炎链球菌携带率可以高达60％。70％[1]。但该菌也是人类社区感染的常见致病原，可引起局部组织或器官感染，如中耳炎、鼻窦炎、肺炎等，也可引起脓胸、败血症、脑膜炎等侵袭性感染。

56株B族链球菌血清型耐药性及多位点序列分型研究

目的研究B族链球菌（GBS）的血清型、耐药性和多位点序列分型,供防治GBS感染参考。方法 2012—2013年间共收集到56株GBS菌株,自就诊于北京市妇产医院和北京大兴医院的妊娠35-37周孕妇的阴道和直肠拭子的分离培养。采用乳胶凝集试验检测菌株的血清型,E-test法和纸片扩散法检测细菌对9种抗生素的敏感性,PCR方法检测红霉素耐药基因ermB和mefA,管家基因测序确定菌株的序列型（ST）,eBURST软件分析菌株间亲缘性关系。结果 56株菌共鉴定出5种血清型,常见型为Ⅲ型（32.1%）、Ⅰa型（17.9%）、Ⅰb型（16.1%）和Ⅴ型（14.3%）。分离株对青霉素和头孢曲松均敏感,对左氧氟沙星、红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、泰利霉素、克林霉素和四环素的不敏感率依次为39.3%、85.7%、92.9%、98.2%、30.4%、73.2%和91.0%。56株菌株共检测出14种STs,ST19（30.4%）最为常见。Ⅲ型菌株主要属于ST19（14/18）,92.9%的Ⅲ/ST19型菌株对左氧氟沙星耐药,75%的左氧氟耐药菌株属于CC19。44株红霉素耐药菌株中,32株（72.7%）erm B阳性。结论北京GBS菌株以Ⅲ、Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ型常见;GBS菌株对青霉素和头孢曲松敏感,对红霉素和克林霉素等耐药率高,超过90%的Ⅲ/ST19型菌株耐左氧氟沙星;红霉素耐药菌株多携带ermB。

Epstein-Barr病毒EBER基因及其生物学特性研究进展

Epstein-Barr病毒（EB病毒）与传染性单核细胞增多症、继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增生症和鼻咽癌等相关,是重要的肿瘤相关病毒.EBERs是EB病毒潜伏感染的细胞内数量最多的病毒转录产物,可能在潜伏感染及细胞转化中发挥重要的作用.此文综述了EBER基因变异及EBERs的生物学特性.