黏膜佐剂mLT63及CpG-ODN鼻内免疫的佐剂作用

目的研究大肠杆菌不耐热肠毒素无毒突变体mLT63和CpG-ODN鼻内免疫对抗原的佐剂效应。方法选用破伤风类毒素(TT)和小牛血清白蛋白(BSA)为抗原,mLT63和CpG-ODN为佐剂,经鼻内免疫BALB/c小鼠。ELISA间接法检测免疫小鼠血清和肺、直肠及阴道组织萃取液的特异性抗TT、BSA的IgA、IgG水平。结果mLT63和CpG-ODN均能协助TT和BSA抗原在血清、肺、阴道、直肠组织中诱导出高滴度的IgG抗体。在血清中IgA抗体滴度均比较低,而TT-IgA在肺和阴道组织中滴度较高,BSA-IgA在肺组织中滴度较高。各佐剂组之间IgG和IgA抗体水平相比,差异均无显著意义。不同剂量的mLT63诱导的BSA-IgA抗体水平差异无显著意义。结论mLT63和CpG-ODN经鼻内免疫对TT和BSA抗原均有良好的佐剂作用。

头孢丙烯对5种儿童感染常见病原菌的抗菌活性

目的观察头孢丙烯等口服抗生素对5种儿童社区获得性感染常见致病菌的体外抗菌活性。方法选取近年北京儿童医院临床分离的金葡菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和卡他莫拉菌菌株,采用E试验法检测其对头孢丙烯、头孢克洛、头孢地尼等抗生素的敏感性。结果头孢丙烯对所检测菌株的MIC90值分别是:甲氧西林敏感金葡菌0.75mg/L;化脓性链球菌0.023mg/L;肺炎链球菌青霉素敏感株0.094mg/L,青霉素耐药株12mg/L;β内酰胺酶阴性流感嗜血杆菌2mg/L,β内酰胺酶阳性16mg/L;β内酰胺酶阴性卡他莫拉菌0.75mg/L,β内酰胺酶阳性2mg/L。PRSP株对头孢丙烯耐药率为61.9%,流感嗜血杆菌β内酰胺酶阳性株中占15.8%。结论头孢丙烯对金葡菌、化脓性链球菌、青霉素敏感肺炎链球菌、β内酰胺酶阴性卡他莫拉菌有良好抗菌作用;对β内酰胺酶阳性流感嗜血杆菌的抗菌活性低于头孢地尼;青霉素耐药肺炎链球菌株对头孢丙烯有较高的耐药率。

儿科与疫苗

感染性疾病（infectious disease）是由病原微生物和寄生虫侵犯人体引起的疾病。感染性疾病可以在人与人之间或动物与人之间传播,而传染病（communicable disease）则是人为地将感染性疾病中传染性较强的疾病分列开来的一组疾病,因而感染性疾病包括了传染性疾病。不同国家、不同资料列出的传染病是不同的。有一些国家（如美国）将感染性疾病中最重要的、必须关注的疾病列出,

北京地区儿童鼻咽部肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的检测

目的 研究北京地区儿童携带肺炎链球菌 (SP)对大环内酯类抗生素的耐药特点。方法 对 2 0 0 2～ 2 0 0 3年上呼吸道感染儿童鼻咽部 2 0 0株SP分离株对 4种大环内酯类抗生素、青霉素和克林霉素的最低抑菌浓度进行检测 ;耐药诱导试验分析部分耐药菌株大环内酯类耐药表型 ;PCR检测红霉素耐药基因ermB和mefA。结果 2 0 0株SP中 179株对红霉素耐药。红霉素和青霉素的药敏结果无明显关连性。耐红霉素的 14 7株SP中 ,阿奇霉素、克拉霉素、乙酰螺旋霉素和克林霉素的耐药率分别是 10 0 % ,10 0 % ,95 2 % ,95 9%。耐药表型以结构型大环内酯类、林可酰胺类和链阳性菌素B耐药表型 (cMLS)为主 ,占红霉素耐药株的 95 9%。耐药基因检测中 ,仅携带ermB基因的菌株为 79 6 % ,同时携带ermB和mefA基因菌株为 17 7% ,仅携带mefA基因的菌株为 2 7%。结论 2 0 0 2～ 2 0 0 3年北京上呼吸道感染患儿携带的SP对红霉素耐药率达 89 5 % ,分离株在对红霉素耐药同时也对其他大环内酯类药物和克林霉素耐药。耐大环内酯SP表型以cMLS为主 ,基因型以ermB为主。

流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因TEM-1、ROB-1的检测

目的 探讨我国北京,上海,广州3地2000—2003年流感嗜血杆菌氨苄西林的耐药机制。方法 选取2000—2003上述3地上呼吸道感染患儿鼻咽部分离培养的899株流感嗜血杆菌,采用E test法检测氨苄西林耐药情况。用头孢硝噻酚片进行β内酰胺酶检测,PCR方法检测产酶菌株TEM -1、ROB -1耐药基因携带情况。结果 74株氨苄西林耐药菌株均产生内酰胺酶,PCR检测均为TEM- 1基因阳性,未发现ROB -1基因阳性菌株。结论 我们研究的儿童上呼吸道携带流感嗜血菌对氨苄西林耐药的机制主要是TEM- 1型β内酰胺酶的产生。

四地儿童肺炎链球菌、流感嗜血杆菌抗生素敏感性监测(2000～2001年)

目的 了解当前我国儿科呼吸道感染常见病原肺炎链球菌和流感嗜血杆菌对常用抗生素的敏感性 ,以便有效指导临床合理用药和预防。方法 连续两年对北京、上海、广州三家儿童医院和西安西京医院儿科 (仅 2 0 0 1年 )就诊的上呼吸道感染儿童鼻咽分泌物进行培养、分离肺炎链球菌和流感嗜血杆菌 ;采用纸片扩散法及E test方法对分离株进行常用抗生素敏感性检测。结果 四地 2年从呼吸道感染儿童鼻咽部分离肺炎链球菌共 6 5 4株 ,流感嗜血杆菌 6 6 9株。肺炎链球菌对青霉素不敏感 (PRSP)率范围在 14 %～ 6 0 % ,2 0 0 1年各地区发生率依次为上海 5 5 0 %、广州 5 0 0 %、西安4 5 0 %、北京 4 2 3% ;与 2 0 0 0年相比 ,2 0 0 1年部分地区如北京、上海青霉素中度敏感株明显增多。PRSP对 β 内酰胺类、红霉素、复方磺胺甲基异唑耐药率明显高于青霉素敏感株 (PSSP) ,且多重耐药率高达 90 %以上。北京、上海、西安地区分离株对阿莫西林 /克拉维酸、头孢曲松仍具有很好的敏感性 (96 6 %～ 98 9% ) ,而对头孢呋辛敏感性有不同程度下降 ,广州地区敏感率仅为 5 9% ,上海 71% ,而北京地区为 92 3% ,明显高于广州地区。 2 0 0 1年四地区分离株对头孢克洛总耐药率 :广州地区耐药率最高 (5 6 % ) ,上海、西安次之

肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn的检测

目的研究耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn在携带肺炎链球菌的北京儿童中分布特点。方法对185株呼吸道感染患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌进行以下检测:Etest、琼脂稀释或纸片扩散法测定对大环内酯类、四环素、β内酰胺类及头孢类等15种抗生素的药物敏感性。PCR检测大环内酯类耐药基因ermB和mefA,四环素耐药基因tetM以及转座子Tn1545的整合酶基因intTn。结果185株肺炎链球菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、四环素和复方磺胺甲基异唑的耐药率较高,分别为78.9%、76.2%、86.0%和78.7%,对阿莫西林克拉维酸、头孢克洛、头孢曲松和头孢呋辛耐药率较低,分别为2.2%、15.5%、2.8%和14.1%。所有红霉素耐药株均检出ermB和或mefA,其中79.5%为ermB阳性,17.8%为ermB和mefA同时阳性,2.7%为mefA阳性。tetM基因在分离株中的阳性率是87%,四环素耐药组的tetM基因携带率是96.9%,高于敏感组(26.9%)。四环素耐药株的红霉素耐药率(90.0%)亦高于敏感株组(11.5%)。87.6%的肺炎链球菌存在intTn基因,intTn基因阳性组的红霉素、四环素、氯霉素、复方磺胺甲基异唑和环丙沙星的耐药率较intTn基因阴性组高。分离株最常见的基因组合是intTn+tetM+ermB,占58.4%。结论北京地区呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌耐大环内酯类抗生素的主要原因是ermB编码的23SrRNA甲基化酶致靶位改变。tetM基因编码蛋白质的核糖体保护作用,是肺炎链球菌四环素耐药的重要机制。接合性转座子Tn1545的存在与菌株的红霉素和四环素耐药关系密切,可能是肺炎链球菌多重耐药的重要机制之一。

肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱的相关性

目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况 ;对 40株青霉素敏感菌株和 30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E 试验和K B纸片法进行抗生素药物敏感试验 ;通过用特异性引物pF和pR对肺炎链球菌进行PCR扩增 ,并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ消化反应。结果 肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为9.9%～ 14.6 %;40株青霉素敏感菌株 (MICs≤ 0 .0 94μg ml)中的 39株 ( 97.5 %)为s1、s2和s3三种之一 ,1株为r1;30株青霉素不敏感菌株 (MICs≥ 0 .12 μg ml)中的 2 6株 ( 86 .7%)为r1～r6六种之一 ,其余 4株为s1。结论 青霉素和 β 内酰胺酶类抗生素对北京地区的肺炎链球菌具有活性 ;肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱之间有相关性。

关注对动物使用抗生素与细菌耐药的问题

细菌对抗生素耐药的问题已经成为临床和科研工作中的热点问题 ,越来越得到世界范围内有识之士的关注 ,也受到各国政府高层的重视 ,2 0 0 1年已作为专题报告被世界卫生组织总干事提出。我国临床不合理使用药物情况非常严重 ,尤其是抗生素 ,细菌耐药性的产生与滥用抗生素关系密切。近来发现 ,动物使用抗生素也是导致病原菌耐药的原因 ,但受到的重视不够。不合理使用抗生素还可以加重药物不良反应。近年来 ,院内感染的病原菌耐药情况日趋严重 ,社区感染的常见病原菌各有其特点。进行耐药机制研究是控制耐药的途径之一。为此 ,本期我们特邀国内儿科和其他学科专家 ,就不合理使用药物、细菌耐药状况与耐药的机制三方面从较深和较高的层面上进行讨论 ,并发表有关论著和讲座。