儿科学科研型研究生培养方式的体会

儿科学科研型研究生培养是创新型科研人才成长的基础,其质量与儿科学未来的发展及科研实力的提升息息相关。而目前儿科学科研型研究生的培养存在儿科基础理论薄弱、自身职业规划不明确及科研实践能力差等问题;针对这些问题,学校、医院及导师应该共同努力,通过各种途径帮助儿科学科研型研究生完成良好过渡并激励学生尽快且积极地投入科学研究中去。

浅谈医学科研型研究生实验课教学的问题及建议

实验课是医学科研型研究生实践教学中的重要环节,目前存在对实验课教学重视不足、实验课教学内容陈旧等问题,针对这些问题,建议重视实验课教学,增强学生自主性;增加先进实验方法和实验仪器,给学生全面的认识;丰富教学方法及手段;培养科研思维。

母爱剥夺对留守儿童心理行为的影响及营养干预研究进展

母爱剥夺是生命早期的严重应激事件之一,最多见于留守儿童,对儿童期乃至成年期的身心发育会产生不良影响,出现多种性格、心理、行为等问题,严重者发展为神经精神性疾病。母爱剥夺对心理行为的影响机制涉及海马、脑皮质、小脑等多个脑区结构和功能的异常以及神经内分泌反应失调等多个方面。对于留守儿童的心理行为问题,在目前尚无法更好地解决儿童留守问题的情况下,深入探讨其发生机制并从多条途径寻找有效的干预治疗措施,对于减少留守儿童心理行为异常的发生,保证其身心健康发育,将是关键之举。

尾静脉注射链脲佐菌素构建幼龄小鼠1型糖尿病模型的实验研究

目的探讨利用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)快速高效建立幼龄C57BL/6小鼠1型糖尿病(T1DM)模型的方法。方法选择3周龄雄性C57BL/6小鼠为受试鼠,尾静脉注射不同剂量STZ,分别为30(V30)、50 mg/kg(V50),连续给药4 d;以腹腔注射70 mg/kg STZ(P70)连续给药5 d为阳性对照,观察各组小鼠体质量与血糖的变化,采用组织病理学法检测小鼠胰岛、肾及肺的改变,实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附实验检测小鼠体内炎症因子INF-γ和TNF-α的表达。结果尾静脉注射组V30、V50和腹腔注射组P70均出现体质量增加缓慢和血糖升高,其中以V50组和P70组表现显著,符合T1DM标准,成模率分别为87. 5%和75. 0%。组织病理学检测结果表明,V50组和P70组胰岛组织减少,形态不规则,胰岛素分泌量减少,肾纤维化病变明显,肺泡壁塌陷与炎性浸润显著。实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附实验检测小鼠体内炎症因子INF-γ和TNF-α的表达亦上调。结论尾静脉注射STZ可快速高效建立幼龄小鼠T1DM模型,为深入研究儿童T1DM提供了一种简便可行的实验方法。

孕期和哺乳期n-3多不饱和脂肪酸对子代小鼠成年脑神经发生及凋亡的影响

目的探讨生命早期n-3多不饱和脂肪酸(n-3 polyunsaturated fatty acids,n-3 PUFAs)营养状态对成年期脑神经元发生及凋亡的影响。方法使用20只3-4 w龄清洁级C57BL/6J雌性小鼠,随机分为两组(10只/组),分别给予n-3 PUFAs缺乏和n-3 PUFAs饲料喂养;12-14 w龄时与雄性小鼠合笼交配繁殖。仔鼠生后21 d断乳时,随机挑选20只n-3 PUFAs缺乏组仔鼠用n-3 PUFAs饲料喂养,挑选等量n-3 PUFAs饲料组仔鼠用n-3 PUFAs缺乏饲料喂养,剩余仔鼠用与母鼠相同饲料继续喂养,至仔鼠3月龄时结束实验。小鼠麻醉处死后取全脑组织,采用脂肪酸甲酯化-气相色谱分析对脑脂肪酸进行测定;采用免疫组织化学技术对海马CA3区B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)和钙视网膜结合蛋白(Calretinin,CR)表达进行分析。结果与n-3 PUFAs缺乏饲料持续喂养的仔鼠相比,孕期和哺乳期n-3 PUFAs缺乏而断乳后给予n-3 PUFAs饲料喂养的仔鼠,成年后脑组织n-3 PUFAs含量明显升高(P<0.05),但Bcl-2、Bax和CR的表达量均未发生显著性变化,仍然低于n-3 PUFAs饲料持续喂养仔鼠的水平。孕期和哺乳期n-3 PUFAs饲料喂养而断乳后给予n-3 PUFAs缺乏饲料喂养的仔鼠,成年后脑组织n-3PUFAs含量较n-3 PUFAs饲料持续喂养的仔鼠明显降低(P<0.05);Bcl-2和CR的表达量高于n-3 PUFAs缺乏饲料持续喂养的仔鼠(P<0.05)。结论孕期和哺乳期保证适量n-3 PUFAs的摄入,有助于成年期脑神经元的发生,并减少神经元凋亡。

罕见病眼痉挛-肌肉痉挛-共济失调综合征合并神经母细胞瘤患儿血清中6种自身抗体表达及意义

目的探讨罕见病眼痉挛-肌肉痉挛-共济失调综合征(OMS)合并神经母细胞瘤(NB)患儿血清中差异性自身抗体及OMS合并NB患儿术前、术后自身抗体浓度变化,有助于研究OMS疾病机制及治疗。方法采集单纯NB患儿术前血清6例,OMS合并NB患儿术前、术后血清各4例。ELISA法检测血清中普肯耶细胞抗体1型(PCA-1)、普肯耶细胞抗体2型(PCA-2)、抗坍塌反应调节蛋白5(CRMP5)抗体、抗神经元核抗体1型(ANNA-1)、抗神经元核抗体2型(ANNA-2)、抗神经元核抗体3型(ANNA-3)的浓度。结果与单纯NB患儿相比,OMS合并NB患儿血清中除ANNA-3无差异,其余5种自身抗体浓度均明显高于单纯NB患儿。OMS合并NB患儿血清中PCA-2、抗CRMP5抗体、ANNA-1、ANNA-2浓度与OMS症状评分呈正相关。与术前比较,术后7天OMS合并NB患儿血清中除ANNA-2浓度降低,其余5种自身抗体均无改变。结论在所研究人群范围内,OMS可以导致自身抗体PCA-1、PCA-2、抗CRMP5抗体、ANNA-1浓度增加,可能是OMS的发病机制之一。

乙酸可通过增强脂肪酸β氧化治疗小鼠肥胖

目的:探讨乙酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠体重及脂肪酸β氧化的影响。方法:3~4w龄C57BL/6J雄性小鼠分别给予正常饲料和高脂饲料喂养4个月以诱导肥胖,然后对肥胖小鼠实施乙酸治疗5w。喂养过程结束后,心脏采血,取结肠、肝脏和性腺周围脂肪。检测血浆葡萄糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)和胰岛素浓度,同时检测结肠G蛋白偶联受体(GPR43、GPR41)、酪酪肽(PYY)、胰高血糖素样肽1(GLP-1)以及肝脏和脂肪肉碱脂酰转移酶(cpt)基因mRNA表达水平。结果:高脂诱导的肥胖小鼠给予乙酸治疗5w后,体重显著性下降,但日均进食量和能量摄入却显著增加(P<0.05)。肥胖小鼠的血浆葡萄糖、TG和TCH较正常小鼠,均显著升高(P<0.05),给予乙酸治疗后,血浆TG和TCH水平均显著降低(P<0.05)。与正常小鼠相比,肥胖小鼠结肠中GPR43、GPR41、PYY和GLP1的mRNA表达量均显著性升高(P<0.05),脂肪和肝脏中cpt1a、cpt1c、cpt2的mRNA表达显著性降低(P<0.05);肥胖小鼠给予乙酸治疗后,结肠中上述基因mRNA表达量均显著性降低(P<0.05),脂肪中cpt基因mRNA表达均显著性升高(P<0.05)。结论:乙酸对小鼠肥胖有较好的治疗效果,其作用机制可能是通过特异性促进脂肪组织中脂肪酸β氧化。

新生大鼠手术切口对脊髓背角BDNF含量的影响

目的:探讨新生大鼠手术切口对脊髓小胶质细胞、BDNF含量的影响。方法:健康新生SD大鼠128只,采用随机数字表法分为假手术组(Sham组)和后足切口组(Incision组)。后足切口术前、术后分别进行脊髓小胶质细胞标记物钙离子结合蛋白1的免疫荧光染色;酶联免疫吸附测定法检测BDNF含量;测定两组痛阈。术前预先给予小胶质细胞抑制剂米诺环素,检测BDNF含量。结果:Incision组大鼠术后1、3 d钙离子结合蛋白1阳性染色增加。术后1 d、3 d、7 d、14 d脊髓背角BDNF含量上调,3 d到达顶峰,之后逐渐降至Sham组水平。术前预先给予米诺环素可缓解手术切口造成的BDNF上调。术后6 w、10 w热痛阈升高。结论:新生大鼠手术切口导致脊髓小胶质细胞激活增多,BDNF含量呈时间依赖性增加。

学龄前肥胖儿童肠道菌群的变化

目的探讨肥胖儿童肠道菌群的改变及其与儿童体质指数(body mass index,BMI)之间的关系,为进一步研究儿童肥胖的预防及治疗奠定基础。方法于2014年在北京市2所幼儿园选取29例3~6岁的单纯性肥胖儿童及34例性别、年龄相近的正常儿童,采集清晨粪便并从中提取菌群DNA,然后针对16SrRNA的V4-V5区进行PCR扩增,采用二代测序Illumina MiSeq方法在门和属的水平上检测肠道菌群的变化;进而分析其与儿童BMI之间的相关关系。结果肥胖儿童粪便中变形菌门水平(10.75%±2.00%)明显高于正常儿童(6.42%±1.10%)(P<0.05);厚壁菌门(62.41%±11.59%)、拟杆菌门(16.36%±3.04%)、放线菌门(9.28%±1.72%)及乳杆菌属(0.07%±0.01%)、拟杆菌属(3.81%±0.71%)、双歧杆菌属(8.25%±1.53%)及大肠志贺菌属(5.78%±1.07%)与正常儿童之间(62.90%±10.79%、19.19%±3.29%、9.69%±1.66%、0.08%±0.01%、2.73%±0.47%、8.09%±1.39%、3.94%±0.67%)差异均无统计学意义(P>0.05)。相关分析显示,变形菌门水平与儿童BMI水平呈显著正相关关系(r=0.009 5,P<0.05),而其他菌门和菌属与BMI之间无相关性(P>0.05)。结论在所研究的人群范围内,肠道变形菌门比例增加可能在学龄前儿童肥胖发生中起着重要的作用。

n-3多不饱和脂肪酸与儿童生长发育和健康

n-3多不饱和脂肪酸（n-3 PUFAs）作为膳食必需脂肪酸，具有广泛的生物学功能；现代人膳食n-3 PUFAs摄入处于相对或绝对缺乏状态。生命早期足量n-3 PUFAs的摄入，不仅对于保证胎儿及婴幼儿的正常生长发育至关重要，还有助于预防儿童青少年期注意力缺陷多动障碍、哮喘及过敏性疾病、高脂血症、非酒精性脂肪肝等慢性非感染性疾病的发生。人体利用前体亚麻酸（LNA）合成极长链的二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）的能力有限，必须摄取现成的EPA和DHA以满足机体的需求。对于孕妇以及婴幼儿来说，补充DHA和EPA的比例宜保持在5∶1以上。临床上，EPA和DHA已被用于上述这些慢性非感染性疾病的辅助治疗，可有效改善临床表现。

n-3多不饱和脂肪酸对肥胖小鼠肠道菌群的影响

目的探讨n-3多不饱和脂肪酸（n-3polyunsaturated fatty acids,n-3PUFAs）对饮食诱导肥胖小鼠肠道菌群的影响。方法将30只3-4周龄C57BL/6J雄性小鼠,随机分为3组（10只/组）,分别给予高脂饲料、鱼油n-3PUFAs高脂饲料（脂肪含量均为34.9%,供能比均为60%）以及正常脂饲料（脂肪来源于猪油和葵花籽油,脂肪含量为4.3%,供能比为10%）喂养16周。然后采集粪便,采用16sDNA-实时荧光定量PCR方法检测肠道菌群变化;取结肠组织,采用实时荧光定量PCR方法检测白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）的mRNA表达水平。结果与正常脂饲料喂养对照组小鼠相比,高脂饲料诱导肥胖小鼠粪便中厚壁菌门及乳杆菌属的数量显著增多,而拟杆菌门、放线菌门、变形菌门以及双歧杆菌属的数量则显著减少（P〈0.05）。两组肥胖小鼠相比,鱼油n-3PUFAs高脂组肥胖小鼠的粪便双歧杆菌属数量明显增加,而乳杆菌属数量显著减少（P〈0.05）。对结肠炎性因子mRNA表达水平检测显示,高脂饲料组肥胖小鼠的IL-1β、IL-6、TNF-α及MCP-1表达量较正常脂饲料组小鼠均明显升高（P〈0.05）,而IL-10的表达量无变化;鱼油n-3PUFAs高脂饲料组肥胖小鼠的IL-1β、TNF-α较高脂饲料组肥胖小鼠有显著性的降低（P〈0.05）。结论鱼油n-3PUFAs可以改善肥胖状态下的肠道菌群紊乱及肠道炎症状态。

肠道菌群与肥胖发生

肠道菌群是人体不可或缺的"微生物器官",对维持人体健康至关重要,这早已被人们所认识。肠道菌群与肥胖发生之间的关系在近10年才被发现,随后大量的研究显示肠道菌群失调在肥胖发生中起着重要作用,其机制涉及促进能量吸收、影响肠粘膜通透性和食欲调控因子分泌、引发内毒素血症和慢性炎症反应状态等多个方面。深入对与肥胖发生有关的具体关键菌及其作用机制的研究,将有助于从肠道菌群的调控和益生菌应用环节寻找新的肥胖治疗和预防"靶点"。

幼年期仔鼠母爱剥夺对成年期脑聚集DHA的影响

目的探讨幼年期仔鼠母爱剥夺对成年期脑组织聚集DHA的影响。方法 C57BL/6J新生雄性仔鼠被随机分为母爱剥夺组和对照组,母爱剥夺组仔鼠在出生后第4~14天,每天与母鼠隔离6h(9:00~15:00),对照组不接受任何处理。12周龄时,麻醉状态下心脏取血,采集脑组织。采用甲酯化法-气相色谱分析对血浆和脑中的脂肪酸谱进行检测;应用实时荧光定量PCR方法对肝脏和脑组织△5、△6去饱和酶的表达进行测定。结果与对照组相比,母爱剥夺组仔鼠成年后血浆脂肪酸构成未发生明显变化,但肝脏和脑组织中二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)及总n-3多不饱和脂肪酸(∑n-3PUFAs)含量明显降低(P<0.05),二十二碳五烯酸(DPA)含量及∑n-6PUFAs/∑n-3PUFAs比值显著升高(P<0.05);同时,脑组织中△5去饱和酶与△6去饱和酶基因mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。结论生命早期遭受母爱剥夺的小鼠成年后脑聚集DHA减少,可能与脑组织中△5和△6去饱和酶基因表达抑制有关。

孕期二十二碳六烯酸补充对婴儿生长发育和体质指数影响

目的 探讨孕期二十二碳六烯酸（DHA）补充对婴儿生长发育和BMI影响。方法 采用队列研究，以2016年5-10月北京市两家区级妇幼保健院建档的1 516名孕产妇及其婴儿为研究对象，利用问卷调查在临产前获取孕产妇年龄、身高、体重、孕期体重增加量、分娩方式、孕周数、鱼类食用量及DHA补充情况。根据孕期DHA补充情况分为DHA补充组及非补充组。记录婴儿出生体重、身长、头围及BMI。随访至婴儿6月龄，监测其生长发育相关指标；其间收集产后1~3个月的母乳，用于测定脂肪酸含量。结果 孕妇DHA补充率为47.76%，其中孕早、中期即开始补充的分别占49.31%和39.64%。孕早期即开始补充DHA的孕妇母乳DHA含量高于非补充组，差异有统计学意义（P=0.006），而DHA补充始于孕中及晚期者未能提升母乳DHA含量（P〉0.05）。孕期DHA补充组婴儿出生及6月龄时身长和头围均高于非补充组，差异有统计学意义（P〈0.01），而BMI值低于非补充组，差异有统计学意义（P〈0.01）。进一步发现，孕早期和中期即开始DHA补充组婴儿出生及6月龄时身长均高于非补充组及孕晚期补充组，差异有统计学意义（P〈0.05）；而BMI值低于非补充组及孕晚期补充组，差异有统计学意义（P〈0.01）。孕早期即开始DHA补充组婴儿出生时头围高于非补充组，差异有统计学意义（P=0.001），而6月龄时头围及头围增量均高于其他各组，差异有统计学意义（P〈0.01）。偏回归分析显示孕期DHA补充与婴儿出生及6月龄身长（r=0.324，r=0.216）、头围（r=0.221，r=0.302）及6个月内头围增量（r=0.276）呈正相关（P〈0.05），而与BMI值（r=-0.310，r=-0.371）呈负相关（P〈0.05）。结论 孕期DHA补充可促进胎儿与其出生后身长和头围发育，降低BMI值，并且补充越早效果越明显；这有助于更好地保证婴儿生长发育、预防后期肥胖发生。

母孕期和婴儿早期钙剂补充对婴儿BMI及肠道菌群的影响

目的探讨母孕期和婴儿早期钙剂补充对婴儿BMI及肠道菌群的影响.方法于2016年5至10月选取北京市两个区妇幼保健院建档的1752名健康孕产妇及其婴儿（母乳喂养）为研究对象.通过问卷调查收集母孕期及婴儿早期钙剂和维生素D补充状况;记录婴儿出生及6月龄身长及体重,并计算BMI值;采用随机数字表法每组随机抽取40名婴儿进行肠道菌群分析（若不足40名则全部纳入,其中母孕期及婴儿早期均单补钙剂组23名;母孕期未补充钙剂-婴儿早期单补钙剂组6名）.进而比较母孕期和婴儿早期不同钙剂补充对婴儿出生及6月龄BMI值及肠道菌群构成的影响.结果母孕期钙剂补充组（1323名）婴儿出生及6月龄时BMI值[（13.51±0.47）、（17.91±0.23）kg/m^2]均高于未补充钙剂组[429名,（12.76±1.23）、（17.68±0.76）kg/m^2]（P〈0.05）.在母孕期补充钙剂前提下,婴儿早期单补钙剂组6月龄时BMI[（18.63±0.52）kg/m^2]、BMI增量[（5.71±0.54）kg/m^2]及乳杆菌属构成比（21.04％±3.68％）均高于婴儿早期单补维生素D组[（17.69±0.89）kg/m^2、（4.17±1.01）kg/m^2、12.28％±3.86％]（P〈0.05）;而在母孕期未补充钙剂前提下,婴儿早期单补钙剂组6月龄时乳杆菌属构成比（20.15％±4.87％）也高于婴儿早期单补维生素D组（14.64％±3.71％）（P〈0.05）.结论母孕期适量钙摄入有利于胎儿生长发育;而婴儿早期钙剂补充可引起BMI增加过快,并促进肠道乳杆菌属生长.

饲料中丙酸和丁酸对肥胖小鼠脂肪代谢的影响

目的探讨外源性短链脂肪酸对高脂诱导的肥胖小鼠脂肪代谢的影响。方法将40只3~4周龄C57BL/6J雄性小鼠分成4组,分别给予正常饲料、高脂饲料以及分别添加丙酸和丁酸的高脂饲料喂养4个月。喂养过程结束后,心脏采血,取性腺周围脂肪、肩胛骨下脂肪和肝脏。检测血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCH)等浓度,观察脂肪和肝脏组织细胞形态变化,同时检测甘油三酯脂肪酶(atgl)、激素敏感脂肪酶(hsl)、二酯酰甘油酰基转移酶2(dgat2)、肉碱脂酰转移酶(cpt)及解偶联蛋白1(ucp1)等基因mRNA表达水平。结果与正常饲料喂养组相比,高脂饲料组小鼠体重、血浆TG和TCH水平、肝脏脂肪聚集均显著增加(P<0.05);而高脂饲料中添加丙酸和丁酸则抑制了小鼠体重的增加和肝脏脂滴聚集,同时降低了血浆TG和TCH水平(P<0.05)。脂肪代谢相关基因表达检测显示,与正常饲料组小鼠相比,高脂饲料组小鼠性腺周围脂肪组织和肝脏中atgl、hsl、cpt1c基因mRNA的表达量均显著性降低,而dgat2基因mRNA的表达量明显升高(P<0.05);而高脂饲料中添加丙酸和丁酸提升了性腺周围脂肪组织和肝脏中agtl、hsl、cpt1c基因mRNA的表达,而抑制了dgat2的表达(P<0.05)。肩胛骨下脂肪中上述基因的表达几乎未受到饲料丙酸和丁酸添加的影响(P>0.05)。结论丙酸和丁酸可能通过促进脂肪分解和氧化对高脂饲料诱导肥胖小鼠的体重增加发挥抑制作用。

婴儿早期维生素D补充对生长发育及肠道菌群的影响

目的探讨婴儿早期维生素D(Vitamin D,VD)补充对生长发育及肠道菌群的影响。方法将2016年5至10月在北京两个区妇幼保健院生产的1 752名健康婴儿(母乳喂养)为研究对象建立出生队列。利用问卷调查获取婴儿早期VD补充状况;记录婴儿出生及6月龄身长、体重及体质指数(Body mass index,BMI),并计算年龄别身长Z评分(LAZ)、年龄别体重Z评分(WAZ)及BMI Z评分(BMIZ);采集6月龄粪便,后利用16s DNA-实时荧光定量PCR方法测定肠道菌群构成。结果婴儿6月龄内VD补充率为79.74%,补充剂量(474.33±70.29)IU/d。VD缺乏组婴儿6月龄体重(8.58±0.64)、BMI(18.14±1.86)、6月龄体重及BMI增量(5.15±0.75,4.77±1.04)以及WAZ(0.08±0.26)显著高于VD补充组(8.26±0.47,17.55±1.73,4.94±0.89,4.16±0.71及0.03±0.23)(P<0.05)。对粪便菌群分析发现,VD缺乏组乳杆菌属(21.60±5.88)及肠球菌属(10.79±8.11)含量高于VD补充组(10.94±4.01,4.56±9.95)(P<0.05)。多元回归分析证实,婴儿6月龄体重及BMI与VD补充时间(r=-0.211,r=-0.186)与剂量(r=-0.232,r=-0.201)成反比,与乳杆菌属(r=0.312,r=0.342)及肠球菌属(r=0.207,r=0.231)含量成正比。结论婴儿早期VD缺乏可引起体重及BMI增加过快,并促进肠道乳杆菌属及肠球菌属生长,可能会增加后期肥胖发生风险。

孕期及哺乳期n-6/n-3脂肪酸变化对仔鼠脑发育相关基因表达的影响

目的探讨孕及哺乳期摄入n-6/n-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)变化对子代脑功能相关基因表达的影响。方法选用清洁级3～4周龄C57BL/6J雌性小鼠,随机分成5组,每组分别给予n-3 PUFAs缺乏和4种不同含量n-3 PUFAs(n-6/n-3 PUFAs比值分别为15∶1、5∶1、1∶1及1∶5)饲料喂养。小鼠12～14周龄时用常规饲料喂养的雄性小鼠与之合笼交配繁殖,仔鼠断乳后继续行母鼠相同饲料喂养,随访观察至生后7d、21d和12周龄时分批处死后取脑。然后在仔鼠生后21d断乳时,随机挑选7～9只n-3 PUFAs缺乏组的仔鼠用n-6/n-3 PUFAs(5∶1)组饲料喂养,至12周龄;同时随机挑选7～9只n-6/n-3 PUFAs(5∶1)组的仔鼠,改用n-3缺乏组饲料喂养,至12周龄;剩余仔鼠用与母鼠相同的饲料喂养,至12周龄;麻醉牺牲后,取脑置于-80℃条件下备用。采用实时荧光定量PCR技术测定脑皮质gfap、mbp、nse和nr2b基因mRNA的表达。结果在各年龄段小鼠中,饲料中添加n-3 PUFAs使各基因的表达量明显增加;不同比例的n-6/n-3PUFAs对基因表达的影响不同。孕期及哺乳期饲料缺乏n-3 PUFAs,即使断乳后的饲料中添加正常量的n-3 PUFAs,也不能使某些对脑功能起重要作用的基因的表达量升高至正常n-3 PUFAs喂养的小鼠。结果提示,孕期及哺乳期可能需要较高的n-3 PUFAs摄入(可能最优的n-6/n-3 PUFAs比例介于1∶5～1∶1之间),才能满足幼年期脑发育之需。结论孕及哺乳期n-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)的适量摄入,有助于维持成年期脑功能相关基因的正常表达。