Fam172a基因敲除加剧非酒精性脂肪性肝病的机制研究

目的探讨Fam172a基因敲除加剧内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)诱导的非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。方法小鼠腹腔注射PBS、衣霉素(tunicamycin,TM)或NF-κB抑制剂DHMEQ;检测肝功能和肝组织脂质堆积;蛋白质印迹检测蛋白水平。结果与对照组相比,Fam172a^(-/-)-TM组小鼠血清ALT和AST水平明显升高;肝脏结构损伤和脂质堆积加重;肝脏GRP78、CHOP和pNF-κB/NF-κB的相对表达水平均显著上调。此外,DHMEQ可明显减轻Fam172a^(-/-)小鼠肝损伤、脂质堆积和ERS。结论Fam172a基因敲除可通过活化NF-κB通路来加剧ESR诱导的NAFLD。

内质网应激在代谢相关脂肪性肝病中的作用机制研究进展

随着人类生活方式的改变,代谢相关脂肪性肝病(metabolic dysfunctionassociated fatty liver disease,MAFLD)的患病人群急剧扩张,目前MAFLD位于全世界慢性肝病的首位。MAFLD可进一步发展为肝纤维化、肝硬化甚至肝细胞癌,严重威胁人类健康。但目前其发病机制不明确,尚无批准的治疗手段。因此,越来越多的学者研究MAFLD的发病机制,而内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)引发的未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)对MAFLD的发展有着重要影响,其参与胰岛素抵抗、脂质代谢、炎症和自噬等多个环节。本文将总结MAFLD疾病特征及ERS在MAFLD的作用机制和研究现状,对发现MAFLD治疗靶点至关重要。

医用组织胶和金属夹治疗消化性溃疡出血的临床疗效对比

目的对比分析内镜下医用组织胶"三明治"法注射治疗和金属夹治疗消化性溃疡出血的临床疗效。方法回顾性分析首都医科大学附属北京地坛医院2015年10月-2018年6月102例确诊为消化性溃疡出血并行内镜治疗的患者资料,分成治疗组和对照组,其中治疗组56例,对照组46例。治疗组采用内镜下医用组织胶"三明治"法注射治疗,对照组采用内镜下金属夹治疗,观察即时止血率、再出血率及不良反应发生率。结果治疗组即时止血率明显高于对照组,再出血率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗组和对照组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组均无死亡病例发生。结论内镜下医用组织胶"三明治"法注射术是治疗消化性溃疡出血的一种安全有效的方法,疗效确切,提高了患者的生存率,值得临床推广应用。

从病毒性肝炎到肝细胞癌:外泌体microRNA的作用

外泌体是一种纳米级的磷脂双分子层小囊泡,内含丰富而复杂的生物分子,如DNA、mRNA、microRNA(miRNA)、脂质和蛋白质。外泌体可由大多数种类细胞分泌和摄取,通过细胞间运输的方式完成信息传递。外泌体被受体细胞摄取后,释放其中所含生物活性物质,用以调节受体细胞生物过程,如促进肿瘤的生长和转移。外泌体及其内容物的变化与多种疾病有着重要联系。近年来,关于外泌体miRNA在病毒性肝炎所致肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用已经受到广泛关注,并且不同来源的外泌体miRNA在此过程中发挥的作用也有所不同。本文简要回顾了外泌体miRNA在病毒性肝炎相关HCC发生发展中的作用研究,并提出外泌体miRNA可能是针对HCC微环境的免疫治疗靶点。

Glt25d1基因通过调节NKT细胞及Treg细胞比例加重Con A诱导的免疫性肝损伤

目的 探讨胶原β(1-O)半乳糖基转移酶[collagen β(1-O) galactosyltransferase 1,COLGALT1/GLT25D1]基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝损伤中的作用及可能机制。方法 6~8周雌性野生型(wild type,WT)小鼠和Glt25d1基因敲低杂合子(Glt25d1^(+/-))小鼠分别分为2组(对照组和Con A造模组),每组中WT小鼠和Glt25d1^(+/-)小鼠均各有6只。Con A以10 mg/kg体质量的剂量经内眦静脉丛给药。于造模后12 h处死小鼠。留取血浆,检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)水平,留取肝组织,用于肝组织病理学评估和肝脏GLT25D1蛋白表达量测定。制备肝脏、脾脏及外周血单细胞悬液,运用流式细胞术比较两种小鼠的调节性T(regulatory T,Treg)细胞、自然杀伤T(natural killer T,NKT)细胞比例,并比较NKT细胞表面凋亡相关因子配体(factor related apoptosis ligand,FasL)表达差异。结果 对照组和Con A造模组中Glt25d1^(+/-)小鼠肝组织GLT25D1表达量均显著低于WT小鼠(对照组:0.342±0.168 vs1.144±0.169,t=5.841,P=0.004;Con A造模组:0.264±0.087 vs 0.964±0.058,t=11.640,P=0.0003)。经Con A诱导12 h后,Glt25d1^(+/-)小鼠ALT水平显著高于WT小鼠[(10155.2±4489.5)U/L vs (3078.5±111.0)U/L;t=-3.522,P=0.024]。肝组织HE染色显示Glt25d1^(+/-)小鼠肝板结构损坏更为严重,肝脏坏死区域更加广泛,汇管区炎性细胞浸润更加显著。流式细胞术检测显示,Con A造模组中Glt25d1^(+/-)小鼠脾脏中Treg细胞频数较WT小鼠显著减少[(7.849±1.116)%vs (9.892±1.762)%;t=2.978,P=0.008],肝脏NKT细胞频数[(9.244±6.898)%vs (3.376±4.794)%;t=-2.253,P=0.037]和NKT细胞FasL表达量[(29.62±4.960)%vs (16.43±3.964)%;t=-5.027,P=0.001]显著高于WT小鼠。结论 Glt25d1基因敲低加重Con A诱导的免疫性肝损伤,其机制可能与其降低Treg细胞频数、增加NKT细胞频数及增强NKT细胞功能有关。

药物性胆汁淤积型肝病的治疗研究

目的探讨药物性胆汁淤积型肝病的有效治疗方案。方法 217例患者符合药物性胆汁淤积型肝损害的诊断标准。分为SAM+H+UDCA组、SAM+H组、SAM+UDCA组、H+UDCA组、中药组。观察各组患者治疗前及治疗4周后的临床症状、体征,检测血清碱性磷酸酶(ALP)、转氨酶(AST、ALT)、总胆红素(TBil)、r-谷氨酰转肽酶(r-GT)、胆碱酯酶(CHE)等生化指标。采用配对设计t检验方法进行统计学分析。结果疗程满4周后,各组临床症状有明显改善,尤其是瘙痒症状评分明显下降。治疗后,各组主要生化指标血清TBil、ALT、AST、ALP、r-GT均下降,CHE升高。其中以血清TBil下降明显,差异有统计学意义(P<0.05)。SAM+H+UDCA组和SAM+H组较其他治疗组总胆红素下降速度快、幅度大。但两组之间治疗后TBil水平差异无统计学意义(P>0.05);加用激素组随治疗时间延长,使用激素的副作用发生率增加。结论腺苷蛋氨酸与激素联合应用是治疗药物性胆汁淤积型肝病的较好方法,但需注意激素引起的不良反应。

内镜治疗肝癌合并门静脉癌栓引起的食管胃底静脉曲张出血的疗效分析

目的明确内镜治疗肝癌合并门静脉癌栓患者发生食管胃底静脉曲张出血的止血效果与意义。方法回顾性分析2013年1月-2015年12月首都医科大学附属北京地坛医院住院收治食管胃底静脉曲张出血的肝癌伴门静脉癌栓的患者,比较非内镜治疗组和内镜治疗组患者止血治疗效果、主要死亡原因及生存时间。结果共纳入76例患者,非内镜治疗组27例,内镜治疗组49例。非内镜治疗组有40.7%(11/27)的患者1周内死亡,81.5%(22/27)死于食管胃底静脉曲张出血,平均生存期为(42.03±13.94)d;内镜治疗组仅16.3%(8/49)的患者1周内死亡(P<0.05),55.1%(27/49)死于食管胃底静脉曲张出血(P<0.05),平均生存期为(174.24±34.42)d(P<0.05)。结论内镜下治疗能有效地降低患者死于食管胃底静脉曲张出血的风险,延长患者生存期,具有临床意义。

多次内镜下硬化治疗术后并发严重食管狭窄1例

食管静脉曲张患者多次内镜下硬化剂治疗(endoscopic injection sclerotherapy,EIS),可能会并发食管狭窄,大部分不影响正常进食,少部分患者会出现严重食管狭窄。治疗方法主要是探条扩张术、球囊扩张术,但是易再次狭窄。现将首都医科大学附属北京地坛医院治疗的1例EIS术后发生严重食管狭窄的患者的诊治经过报道如下:1临床资料患者女,39岁。因乙肝肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血(esophagogastric variceal bleeding,EVB)4次行EIS及栓塞治疗,第1次于2012年7月18日进行,食管曲张静脉内分点共注射聚桂醇36 ml(图1),第4次于2013年5月6日进行(图2),既往体健。第4次内镜下治疗术后1.0个月(2013年6月7日),患者逐渐出现进食哽咽,只可进流食。胃镜检查显示食管及胃底曲张静脉基本消失,食管出现排胶溃疡,食管轻度狭窄,取出胶块(图3)。术后2.0个月(2013年7月3日)再次复查胃镜,食管出现排胶溃疡伴严重瘢痕狭窄(图4)。患者在此后的2.5个月因吞咽困难先后3次行内镜下食管球囊扩张术。于2013年7月18日使用球囊扩张导管(CRE球囊)扩张食管狭窄部位(图5),但扩张术后仍反复食管狭窄。

HIV感染者结肠黏膜镜下病变特点及病因学分析

目的明确艾滋病病毒(HIV)感染者结肠黏膜损伤内镜特征与组织病理学及病因学之间的关系。方法回顾性分析北京地坛医院2008年10月至2018年10月有消化道症状并接受肠镜检查的患者中,95例活检组织病理学检查病因基本明确的患者,有明确内镜下黏膜损伤特征。结果95例患者中,57.14%病毒感染为单纯疱疹病毒Ⅰ型,25.3%为巨细胞病毒感染;7.37%为溶组织阿米巴感染;结肠腺瘤占8.42%(8例);增生性病变中,结肠腺癌的患者年龄>50岁占活检患者总数的3.16%(3例)。进一步的免疫分析显示,疱疹病毒感染及巨细胞病毒感染与外周血淋巴细胞总数、CD4^+T淋巴细胞、CD8^+T淋巴细胞的降低相关。结论HIV感染者肠道黏膜损伤以疱疹病毒感染更为常见;溶组织阿米巴滋养体感染也是常见的致病因素。

Fam172a基因敲除小鼠的制备与基因型鉴定

目的建立稳定的Fam172a基因敲除C57/B6J小鼠模型,观察基因敲除对小鼠生长发育的影响以及该基因在小鼠体内的生物学的作用。方法采用基因打靶敲除技术,获得杂合子(Fam172a^(+/-))小鼠。将所得Fam172a^(+/-)小鼠饲养于屏障环境中杂交获得纯合子(Fam172a^(-/-))小鼠。利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术对小鼠基因型进行鉴定,称量出生后20天、40天以及60天野生型(wild type,WT)小鼠及Fam172a^(-/-)小、鼠的体重。随机处死8周龄WT小鼠和Fam172a^(-/-)小鼠,取心、肝、脾、肺及肾组织,采用Western blot险测Fam172a基因的组织表达特异性。结果 PCR及Western blot结果均证明Fam172a基因在Fam172a^(-/-)小鼠体内完全删除。Farm172a^(-/-)小鼠与WT小鼠20天、40天以及60天体重的差异均有统计学意义(P均<0.05)。FAM172A蛋白在WT小鼠中的表达有组织特异性。Fam172a^(-/-)小鼠每胎产仔数略低于WT小鼠,差异无统计学意义(P>0.05)。各小鼠外观、行为和繁殖力无显著差异。结论 Fam172a基因敲除C57/B6J小鼠模型已成功构建,并繁育出足够数量的Fam172a^(-/-)小鼠进行下一步实验。Fam172a基因对小鼠体重和生长发育具有重要作用。

Glt25d1基因敲低对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠巨噬细胞和中性粒细胞的影响

目的研究Glt25d1基因在刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎中的作用及其对巨噬细胞和中性粒细胞的影响。方法随机抽取6~8周无特定病原体雌性Glt25d1+/-小鼠及与其同窝出生的野生型(wild type,WT)小鼠,体质量(20±2)g,分为WT对照组、Glt25d1+/-对照组、WT造模组和Glt25d1+/-造模组,每组8只。造模组通过内眦静脉注射Con A,剂量为10 mg/kg,对照组给予相同剂量生理盐水注射。造模12 h后处死小鼠。检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理。采用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏和肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞的比例。采用定量逆转录PCR(quantitative reverse transcriptase-mediated PCR,qRT-PCR)检测肝脏中单核-巨噬细胞趋化蛋白-1(monocyte/macrophage chemotaxis proteinⅠ,MCP-Ⅰ)、巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory proteinⅠα,MIP-Ⅰα)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatoryproteinⅡ,MIP-Ⅱ)及淋巴细胞抗原6G(lymphocyteantigen6complexlocusG,Ly6G)等mRNA的相对表达量。结果 WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠ALT [(52.00±18.19)U/L vs (45.00±6.85)U/L]和AST [(168.17±21.33)U/L vs(276.17±83.37)U/L]水平差异无统计学意义(t值分别为0.360、1.255,P值分别为0.7263、0.2589)。Con A造模12 h后,WT造模组小鼠ALT和AST水平分别为(3089.67±663.92)U/L、(3099.50±519.15)U/L,Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平分别(11565.17±1381.38)U/L、(10875.17±1558.68)U/L,均显著高于未造模组(P均<0.05),Glt25d1+/-造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组(t值分别为5.530、4.733,P值分别为0.0003、0.0032)。肝组织HE染色示:WT对照组和Glt25d1+/-对照组小鼠肝组织未见明显损伤,Con A诱导12 h后,与WT Con A造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠肝脏坏死面积更广、汇管区炎性细胞浸润更显著。Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中巨噬细胞比例显著高于WT对照组[(5.04±0.32)%vs(3.48±0.31)%],差异有统计学意义(t=2.954,P=0.0131),外周血[(0.26±0.09)%vs(0.63±0.16)%]和肝脏[(1.58±0.11)%vs(2.83±0.43)%]中差异无统计学意义(t值分别为1.456、1.626,P值分别为0.1733、0.1351)。Con A诱导12h后,与WT造模组相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中巨噬细胞比例显著降低[(0.12±0.21)%vs (0.43±0.10)%,t=2.955,P=0.0144],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.34±0.30)%vs (1.03±0.53)%,t=6.992,P=0.0002],脾脏中巨噬细胞比例无显著差异[(3.98±0.39)%vs (3.82±0.21)%,t=0.372,P=0.7173]。与WT对照组小鼠相比,Glt25d1+/-对照组小鼠脾脏中中性粒细胞比例显著升高[(5.20±0.76)%vs (2.46±0.35)%,t=3.836,P=0.0028],外周血[(0.67±0.26)%vs (1.96±0.77)%]和肝脏[(3.68±1.33)%vs (3.76±1.12)%]中中性粒细胞比例无显著差异(t值分别为1.078、0.039,P值分别为0.3040、0.9698)。Con A诱导12 h后,与WT造模组小鼠相比,Glt25d1+/-造模组小鼠外周血中性粒细胞比例显著降低[(1.37±0.22)%vs (14.40±2.72)%,t=4.782,P=0.0088],肝脏中巨噬细胞比例显著升高[(8.08±1.93)%vs (1.64±0.71)%,t=3.788,P=0.0043],脾脏中差异无统计学意义[(5.81±0.84)%vs (5.96±0.42)%,t=0.176,P=0.8621]。WT对照组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为0.66±0.31、1.08±0.23、1.04±0.17、1.05±0.19,Glt25d1+/-对照组小鼠上述指标分别为0.60±0.13、1.56±0.11、0.77±0.07、0.92±0.16,差异均无统计学意义(P均> 0.05)。WT造模组小鼠MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G mRNA相对表达量分别为1.29±0.41、1.11±0.18、1.16±0.19、0.90±0.20,Glt25d1+/-造模组小鼠上述指标分别为2.51±0.26、4.72±0.45、2.62±0.36、2.36±0.59,Glt25d1+/-造模组均显著高于WT造模组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 Glt25d1基因敲低可加重小鼠Con A诱导的自身免疫性肝炎,降低外周血巨噬细胞和中性粒细胞比例,升高肝脏中巨噬细胞和中性粒细胞比例,并诱导肝脏细胞因子如MCP-Ⅰ、MIP-Ⅰα、MIP-Ⅱ及Ly6G转录水平升高。

肝细胞极性调控

肝细胞是高度极化的细胞。肝细胞极性的建立和维持对肝细胞的诸多功能至关重要。肝细胞极性的动态稳定与诸多因素相关,包括细胞间连接、极性蛋白复合体以及多个信号通路。当极性受到破坏,肝细胞功能往往出现异常,最终可能导致各类肝脏疾病的发生。目前,关于肝细胞极性调控相关研究仍然较少,多种关键因素尚未得到完全阐明。本文简要介绍了近年来肝细胞极性调控相关研究进展。

胶原糖基化Glcα1和2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型的制备与基因型鉴定

目的建立介导胶原糖基化Glcα1、2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型,为研究其在肝脏疾病中的作用奠定基础。方法基于Cre-loxp重组酶系统,采用胚胎干细胞线性打靶技术,获得同源重组的干细胞,繁殖嵌合体,获得杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠。随后将GLT25D1^(+/-)小鼠自交。通过PCR凝胶电泳技术对子代小鼠的基因型进行鉴定。采用Western blot技术检测GLT25D1在WT型小鼠(wild type,WT)和杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠各组织的表达。比较WT和GLT25D1^(+/-)小鼠的生育情况、子代小鼠基因型比例及出生20天的体重差异。结果 GLT25D1^(+/-)小鼠配笼繁殖的264只子代小鼠中,杂合子GLT25D1^(+/-)小鼠152只,WT小鼠112只,无GLT25D1-/-小鼠。GLT25D1^(+/-)小鼠数量和WT小鼠数量的比值低于孟德尔遗传定律的2∶1(χ~2=9.818,P=0.002)。Western blot示GLT25D1蛋白在WT小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和淋巴结等重要组织中均有表达,其中在肝、脾和肺中高表达,肾和淋巴结中度表达,心和脑弱表达,GLT25D1^(+/-)小鼠各组织表达水平均低于WT型小鼠。WT和GLT25D1^(+/-)小鼠在外观和行为上无显著差异,GLT25D1^(+/-)小鼠出生后20天体重显著低于WT型小鼠(t=2.520,P=0.0177)。GLT25D1^(+/-)小鼠交配后平均每窝出生的鼠仔数目为4只,低于WT小鼠平均鼠仔数7只(t=-8.482,P<0.001)。结论 GLT25D1基因敲低后会导致GLT25D1-/-胚胎致死,且影响部分GLT25D1^(+/-)小鼠正常出生,GLT25D1^(+/-)小鼠出生后20天体重减轻,繁殖能力下降。

难治性便秘的临床评估和药物治疗

难治性便秘通常指药物治疗4周无效或3个月的盆底生物反馈治疗无效的便秘。慢性便秘是影响中老年人的常见病,但仅不足20%的患者接受临床评估和系统干预。根据症状和肛门直肠功能测试结果,慢性便秘可分为功能性便秘、便秘型肠易激综合征和排便障碍。本文就难治性便秘的临床评估和药物治疗作一概述。

右美托咪定在肝硬化患者无痛胃镜诊疗中的安全性和有效性

目的评估右美托咪定在肝硬化患者胃镜下治疗麻醉中应用的安全性和有效性。方法研究设计为开放性随机对照研究,选取北京地坛医院和双桥医院2019年1~9月需行无痛胃镜下治疗的非急性上消化道出血的肝硬化合并食管胃底静脉曲张患者60例作为研究对象。将入选患者随机分为右美托咪定观察组(D组,n=30)和对照组(C组,n=30),D组给予右美托咪定0.5µg/kg,加生理盐水配至5mL,单次静脉推注,推注时间大于5min,之后推注丙泊酚1mg/(kg·min),并同时推注瑞芬太尼0.5µg/(kg·min);C组以生理盐水5mL替代右美托咪定,单次静脉推注,推注时间大于5min,之后推注丙泊酚及瑞芬太尼与D组相同。睫毛反射消失开始插入胃镜。记录血压、心率、血氧饱和度,并记录丙泊酚初始用量、总用量、胃镜操作时间、可唤醒时间以及低氧血症、误吸、呛咳和呃逆等不良反应发生情况。结果两组患者的一般情况、手术时间比较,以及两组患者麻醉过程中的平均动脉压和心率比较,差异无统计学意义(P>0.05);D组丙泊酚用量少于C组,患者唤醒时间短,低氧血症和呃逆发生较少(P<0.05);误吸和呛咳等不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论右美托咪定、丙泊酚和瑞芬太尼组合的麻醉方案可以安全、有效的保障肝硬化患者胃镜下预防性治疗食管、胃底静脉曲张手术顺利完成,并且不影响肝硬化肝功能障碍患者麻醉复苏。

糖基因GLT25D1和GLT25D2缺失对APAP诱导的急性药物性肝损伤的影响

目的 研究糖基因Glt25D1和Glt25D2在对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的急性药物性肝损伤中的可能作用及机制.方法 抽取6~8周雄性糖基因Glt25D1和Glt25D2敲除小鼠(Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-))及野生型小鼠(Wild type,WT),构建药物性肝损伤模型.实验组腹腔内注射500 mg/kg APAP,对照组给予相同剂量生理盐水.造模6 h后处死小鼠.检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,观察肝组织病理.分离提纯小鼠肝原代细胞,分别加APAP和衣霉素(Tunicamycin,Tm)刺激6 h后收取细胞,提取细胞蛋白和RNA.q-PCR、Western印迹检测小鼠肝脏组织及原代肝细胞Glt25D1和Glt25D2、内质网应激相关蛋白、凋亡相关蛋白、炎性因子的表达变化趋势.结果 Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠ALT和AST水平均显著高于WT造模组.小鼠肝脏HE染色可见,Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-)造模组小鼠肝损伤程度比WT造模组更严重.Glt25D1^(Δhep) Glt25D2^(-/-) APAP造模组GRP78、chop以及cleaved caspase-12、cleaved caspase-3等内质网应激相关蛋白的表达量高于WT造模组,同时伴有线粒体细胞色素C的释放.结论 Glt25D1和Glt25D2基因敲低加重小鼠APAP诱导的急性肝损伤,促进内质网应激,促进肝细胞凋亡.

转化生长因子β在肝细胞癌中的免疫调节作用及研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,大多数患者确诊时已为晚期,失去手术治疗机会。HCC的生长、侵袭、转移及免疫耐受与肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)密切相关。TME是肿瘤细胞赖以生存的细胞环境,包括肿瘤间质、邻近细胞、血管、周边多种免疫细胞和免疫相关介质等组分。转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是一组能调节细胞生长和分化的细胞因子,通过调节TME维持肝脏免疫耐受和免疫激活间的平衡。TGF-β参与HCC免疫抑制性微环境的建立,肿瘤细胞及其微环境可通过TGF-β调节免疫细胞的表型及功能,促进HCC免疫耐受实现免疫逃逸。阐明TGF-β在TME中的免疫调节作用有望为HCC免疫治疗提供新的靶向途径和生物标志物。

自然杀伤性T细胞在肝脏疾病中的作用与机制研究进展

自然杀伤性T细胞(natural killer T cell,NKT cell)是一种非传统T淋巴细胞,既表达自然杀伤性细胞(natural killer cell,NK cell)的相关受体,也表达T细胞受体.近年来,不断有新的NKT细胞亚群被发现,不同亚群的结构、功能和调节机制不尽相同.在肝脏疾病中,活化的NKT细胞功能和作用复杂多变,其机制尚未十分明确,有待进一步研究.深入探讨NKT细胞在肝脏疾病中的作用及机制对延缓肝病病理进程至关重要.

Colgalt2敲除对刀豆蛋白A诱导的自身免疫性肝炎小鼠CD4 T细胞记忆和归巢的影响

目的初步探索糖基转移酶Colgalt2基因敲除对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠模型中CD4 T细胞记忆和归巢的影响。方法随机抽取无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级6~8周的基因敲除(Colgalt2^(-/-))小鼠与野生型Colgalt2^(+/+)小鼠各18只,建立Con A诱导的AIH小鼠模型。检测小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,采用HE染色观察肝组织病理变化,采用体外磁珠分选脾脏CD4^(+)T细胞,采用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏及分选后CD4^(+)T细胞亚型比例。结果与Colgalt2^(+/+)小鼠相比,Con A刺激12 h Colgalt2^(-/-)小鼠血清ALT[(15610±2869)U/L vs(5009±1042)U/L;t=3.474,P=0.006]和AST[(16080±2631)U/L vs(4453±893.7)U/L;t=4.185,P=0.002]水平均显著升高。Con A刺激12 h Colgalt2^(-/-)小鼠肝损伤分级显著高于Colgalt2^(+/+)小鼠[(3.17±0.17)级vs(2.17±0.17)级],差异有统计学意义(t=4.243,P=0.002)。Con A刺激12 h Colgalt2^(-/-)小鼠脾脏CD4^(+)CD28^(-)[(97.80±0.46)%vs(88.85±3.35)%;t=2.650,P=0.024]和CD4^(+)CD62L^(-)[(97.98±0.46)%vs(88.68±3.38)%;t=2.669,P=0.023]均显著高于Colgalt2^(+/+)小鼠。体外脾脏实验表明,Con A刺激12 h Colgalt2^(-/-)小鼠CD4^(+)CD28^(-)[(94.88±1.20)%vs(82.97±2.70)%;t=4.295,P=0.002]和CD4^(+)CD62L^(-)[(99.95±0.02)%vs(99.24±0.26)%;t=2.731,P=0.021]均显著高于Colgalt2^(+/+)小鼠。结论Colgalt2基因敲除使脾脏CD4^(+)CD28^(-)和CD4^(+)CD62L^(-)细胞亚群表达上调从而加重Con A诱导的AIH。

对葡萄糖转运蛋白GLUT5的分子见解

葡萄糖转运蛋白5(glucose transporter 5, GLUT5)是人体唯一特异性转运果糖的膜转运蛋白,其主要在小肠上皮细胞表达,在膳食果糖摄取、代谢过程中有至关重要的作用.近年来,随着生活水平的不断提升,全球人均果糖摄入量急剧增加,由此导致的肥胖和代谢疾病也逐渐增多.由于GLUT5在膳食果糖吸收和代谢中具有关键作用,其与人类疾病的关系研究正受到越来越多的关注.越来越多的证据表明,从消化系统疾病到多种人类癌症,GLUT5都发挥了不可忽视的作用.然而,受限于各种困难和缺陷, GLUT5的分子结构研究尚未得到完全阐明.深入揭示GLUT5分子结构及其生物学功能将有助于人们更好地理解GLUT5相关疾病的发生机制,有利于设计针对性更强的靶向治疗药物.本文主要介绍了哺乳动物GLUT5的分子结构和转运机制研究现状,从最基础的分子生物学角度出发,展望GLUT5的潜在应用价值,以期能够为果糖代谢相关疾病的临床治疗提供更好的策略.