核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸抑制肿瘤坏死因子α诱导大鼠关节滑膜细胞中一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达

目的:利用核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸抑制肿瘤坏死因子α诱导的关节滑膜细胞中一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达,探讨基因治疗类风湿性关节炎的新方法。方法:实验于2005-03/2006-03在北京大学医学部中心实验室(国家级)完成。①实验材料:清洁级健康近交系SD大鼠10只;一氧化氮合酶2,环氧合酶2,3-磷酸甘油醛脱氢酶引物(由北京奥科生物公司合成);肿瘤坏死因子α(Sigma公司);核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸和转染条件由北京大学运动医学研究所陈连旭博士提供。②实验干预:切取大鼠髋关节和膝关节的滑膜体外培养滑膜细胞。利用脂质体siPORTTMLipid将核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸转染滑膜细胞,再加入肿瘤坏死因子α刺激。阴性对照为任意编码的小干涉核糖核酸,阳性对照为针对3-磷酸甘油醛脱氢酶的小干涉核糖核酸。③实验评估:提取滑膜细胞中的核蛋白,利用电泳迁移率试验检测核因子κB的活性;提取滑膜细胞的核糖核酸和总蛋白,利用反转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印记法从信使核糖核酸和蛋白质两水平检测一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达。结果:①肿瘤坏死因子α和核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸对核因子κB转录活性的影响:与正常滑膜细胞相比,肿瘤坏死因子α可以显著提高核因子κB的结合能力,而事先转染小干涉核糖核酸48h,再用肿瘤坏死因子α刺激,核因子κB的结合能力又显著降低。②核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸对核因子κB下游因子的影响:在培养的滑膜细胞中,肿瘤坏死因子α可以显著增加一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达;在转染小干涉核糖核酸抑制核因子κBp65的表达后再用肿瘤坏死因子α刺激,一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达被抑制。结论:①核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸可降低肿瘤坏死因子α诱导的滑膜细胞中核因子κB的转录活性,抑制其下游因子一氧化氮合酶2和环氧合酶2的表达。②核因子κBp65特异性小干涉核糖核酸可用于基因治疗类风湿性关节炎的试验研究。

腹股沟无张力疝修补术后感染的预防及护理方法研究

目的探讨腹股沟无张力疝修补术后感染的预防及护理方法,旨在降低腹股沟疝患者术后感染率,提高患者生活质量。方法选取首都医科大学附属北京朝阳医院2014年5-8月收治的86例腹股沟疝患者为研究对象,随机分为观察组和对照组,每组43例。对照组按照常规腹外疝手术流程和护理方法给予治疗,观察组在术前、术中和术后采取完善的预防策略以预防感染和其他并发症的发生。比较二组手术时间、术后下床活动时间和住院时间、并发症的发生率和护理满意度。结果观察组手术时间（56±17）min,住院时间（5.0±2.5）d较对照组（70±16）min、（7.5±3.5）d短,差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组总并发症发生率为9.30%、其中感染发生率为2.33%,较对照组30.23%、6.98%显著偏低,差异具有统计学意义（P〈0.05）;对出院患者进行满意度调查,发现观察组43例患者对手术及护理满意的有38例,较对照组26例满意度高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论术前、术中及术后采取相应的准备和护理措施能明显提高腹股沟无张力疝修补术的手术效果。