结核病与抑郁症共病的研究进展

结核病与抑郁症均为当今社会重要的公共卫生问题,二者关系复杂且相互影响。笔者旨在总结近年来关于结核病与抑郁症共病的患病率、危险因素、相互作用机制,并探讨结核病与抑郁症共病的诊断与治疗方式。通过深入了解结核病与抑郁症共病的研究进展,为临床实践提供指导,为未来的研究提供方向。

结核病实验室诊断技术研发新进展

结核病的精准防控需要快速、准确的实验室诊断技术。自1882年罗伯特·科赫发现结核分枝杆菌以来,结核病诊断技术经历了从传统的病原学诊断到免疫学和分子生物学诊断的巨大飞跃,然而这种诊断技术的发展仍然与实现2035年终止结核病的宏伟目标存在一定差距。作者在梳理既往结核病诊断技术研发进展的基础上,围绕结核病防控的核心诊断需求,探究未来实验室诊断的重要发展管线。

趋化因子用于结核病诊断的研究进展

趋化因子是一类高度保守的蛋白质家族,参与多种生物过程,包括趋化细胞迁移、免疫细胞脱颗粒、造血和血管生成,在人体免疫系统中发挥重要作用。当机体感染结核分枝杆菌后,趋化因子及其受体的表达发生变化,其中多种趋化因子具有作为结核病诊断的生物学标志物的潜力。笔者总结了近些年趋化因子之于结核病诊断相关的研究,对CC趋化因子家族、CXC趋化因子家族及CXCL趋化因子家族中的部分因子及其受体的诊断学价值进行综述,探讨其在结核病诊断中的应用潜力,为结核病的诊断以及预后评估提供有价值的临床参考。

G蛋白偶联受体在宿主抗结核分枝杆菌感染中的功能及作用机制

G蛋白偶联受体(GPCRs)在维持人体正常生理功能和细胞内稳态过程中发挥关键作用。GPCRs及其下游信号通路的表达失调是疾病发生发展的重要标志。近年来,结核病的防治面临着更加严峻的挑战,亟需研发安全、价廉、敏感的新型抗结核药物。其中,基于宿主导向治疗策略的新型抗菌药物受到广泛关注,而GPCRs作为宿主发挥免疫表达调控作用的受体之一,可作为宿主导向的抗结核潜在治疗靶标,然而GPCRs作为重要的药物研究靶点在结核病领域的研究尚显不足。笔者总结了近年来发现的GPCRs在宿主细胞应答结核分枝杆菌感染中所发挥的功能,系统综述了趋化因子受体类GPCRs、孤儿GPCRs及其他GPCRs在调控宿主细胞信号转导中发挥的关键作用和分子机制,为基于GPCRs的抗结核药物研发提供依据。

奥布替尼在分枝杆菌感染宿主巨噬细胞中的免疫调控作用

目的:探讨新型布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton tyrosine kinase,BTK)抑制剂奥布替尼在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染宿主巨噬细胞中的免疫调控作用。方法:通过人急性单核白血病细胞(human acute monocytic leukemia cells,THP-1)培养与分化,用耻垢分枝杆菌感染分化后的THP-1细胞,并以不同浓度的奥布替尼处理,比较其对巨噬细胞吞噬和清除耻垢分枝杆菌的能力。利用siRNA干扰技术敲低BTK蛋白表达,通过蛋白免疫印迹法验证敲除效果,并使用菌落形成单位(CFU)计数法检测奥布替尼对巨噬细胞胞内耻垢分枝杆菌的清除能力。结果:奥布替尼能够明显抑制BTK的酪氨酸磷酸化而不改变BTK蛋白的表达量,同时奥布替尼处理后的巨噬细胞胞内耻垢分枝杆菌菌落计数从130.0(120.3~137.5)×10^(3)个/ml下降至59.0(55.8~65.3)×10^(3)个/ml,差异有统计学意义(U=0.000,P=0.014)。在敲低BTK蛋白表达后,巨噬细胞内耻垢分枝杆菌的载菌量由52.0(44.0~61.5)×10^(3)个/ml降低至25.0(22.0~28.0)×10^(3)个/ml,差异有统计学意义(U=9.000,P=0.002)。结论:BTK在巨噬细胞功能调节中起关键作用,奥布替尼作为新型BTK抑制剂,不仅能够抑制BTK酪氨酸磷酸化,还能明显增强巨噬细胞对耻垢分枝杆菌的清除能力,为其潜在抗结核应用提供了新的思路。

结核分枝杆菌实时荧光重组酶介导的等温扩增检测方法的建立与应用

目的由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染引起的结核病(tuberculosis,TB)是全球第二大单一感染致死病因,快速和准确的结核诊断技术有助于对其进行精准防控。方法针对MTB菌株插入序列IS6110高度保守区域设计引物和exo探针并进行筛选,建立了MTB实时(real-time,RT)荧光重组酶介导的等温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)检测方法。通过检测11种非结核分枝杆菌以及金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌评价RT-RAA方法的特异性。以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q PCR)方法作为平行对照,应用RT-RAA方法扩增梯度稀释的含有目的基因序列不同拷贝数的重组质粒p EASY-Blunt-IS6110,以评价RT-RAA方法的检测敏感度和重复性。将建立的MTB RT-RAA方法应用于173份肺结核临床样品检测中,同时与q PCR方法进行比较。结果建立的MTB RT-RAA方法在42℃条件下30min内即可完成反应;与非结核分枝杆菌以及金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌均无交叉反应;最低检测模板质粒浓度为116拷贝/2μl,优于q PCR方法(138拷贝/2μl);组内和组间的变异系数均小于8%,重复性好。对于肺结核临床样品的检测,RT-RAA方法检测的阳性率与q PCR方法差异无统计学意义。结论本研究建立的MTB RT-RAA方法是一种方便、灵敏和低成本的MTB快速检测方法,具有良好的应用前景。

GSK656和阿米卡星对脓肿分枝杆菌的体外联合药物敏感性研究

目的:评价3-氨甲基-4-卤代苯并噁唑类化合物GSK656与阿米卡星联合用药对脓肿分枝杆菌分离株的体外抑菌作用。方法:收集首都医科大学附属北京胸科医院菌株库保存的30株脓肿分枝杆菌,采用微孔阿尔玛蓝检测法(MABA法)测定GSK656和阿米卡星对脓肿分枝杆菌的体外最低抑菌浓度(MIC)。采用棋盘稀释法进行联合药物敏感性试验,通过分级抑菌浓度指数判断联合抑菌的效果。结果:GSK656对脓肿分枝杆菌的MIC为0.063~4.000 mg/L;阿米卡星对脓肿分枝杆菌的MIC为4.000~16.000 mg/L。GSK656对脓肿分枝杆菌分离株的MIC_(50)和MIC_(90)分别为0.250 mg/L和2.000 mg/L,阿米卡星对脓肿分枝杆菌分离株的MIC_(50)和MIC_(90)分别为8.000 mg/L和16.000 mg/L。GSK656与阿米卡星联合使用时,5株(16.7%)脓肿分枝杆菌分离株表现为协同作用,1株(3.3%)分离株表现为拮抗作用,其他分离株(80.0%,24/30)表现为无关作用。结论:GSK656与阿米卡星的体外联合用药对脓肿分枝杆菌表现出良好的抑菌效果,可为临床用药提供一定参考价值。

结核特异性T淋巴细胞共信号分子的功能研究进展

T淋巴细胞上的共刺激受体和共抑制受体在机体的免疫应答中发挥着重要作用。不断有证据表明,在感染、肿瘤、自身免疫等疾病中T细胞表面共信号分子的表达改变,对共信号分子进行干预可用于疾病的免疫治疗。本文对结核特异性T淋巴细胞上的共刺激受体和共抑制受体进行综述,进一步阐释共信号分子在结核病中发挥的作用机制,为未来深入研究和临床应用提供参考。