结核分枝杆菌潜伏感染者外周血单个核细胞转录组学研究

目的:通过对比分析结核分枝杆菌潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)者和健康人的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)经结核特异性抗原刺激后的转录组,寻找LTBI人群中结核抗原特异的免疫应答重要基因及可能发挥功能的信号通路,绘制LTBI基因表达谱。方法:应用微阵列芯片检测2009年12月在首都医科大学附属北京胸科医院招募的4例LTBI者(LTBI组)和4名健康人(健康对照组)经结核抗原刺激后的PBMC转录组,并对部分差异基因进行qPCR检测以验证芯片数据。应用加权基因共表达网络分析(weighted gene co-expression network analysis,WGCNA)筛选与LTBI最相关模块,并对模块中的基因分别进行基因本体论(geneontology,GO)分析、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encylopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)从全转录组水平筛选信号通路。通过免疫浸润分析寻找与LTBI相关的免疫细胞。通过STRING数据库蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络分析绘制两模块中差异基因相互作用网络图。结果:LTBI组与健康对照组间共发现393个差异表达基因(差异倍数>2或<0.5,P<0.05),LTBI中112个表达下调,281个表达上调。针对10个差异基因的实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测证实基因表达趋势与芯片数据一致,即CAMK1G、IL2、SPINK1、SUCNR1、HCAR3、IL18BP、CHI3L1、TNF均上调;RASGRP2、TPM2均下调。通过WGCNA分析确定与LTBI最相关的正相关蓝色模块(cor=0.88,P=0.004)和负相关蓝绿色模块(cor=―0.93,P=0.001)。对上述模块内基因进行KEGG富集分析,并行基于全转录组的GSEA分析,发现趋化因子信号通路(P<0.001)和凋亡信号通路(P=0.003)在两种分析中均明显富集。对两模块中的差异基因通过STRING数据库构建PPI网络图,通过内置插件计算得到每个模块中的前10个关键基因,即蓝色模块中的PTPRC、CD40、IL10、IRF8、CCR1、CD80、TLR8、CLEC7A、CD83和CD274;蓝绿色模块中的TNF、ICAM1、TNFRSF4、HAVCR2、CD276、CCL4、CD33、IL1RN、NCF1和FGR。免疫浸润分析发现,M1型巨噬细胞(P=0.029)和M2型巨噬细胞(P=0.001)等固有免疫细胞的比例在LTBI组和健康对照组间存在明显差异。结论:经结核特异性抗原刺激后的PBMC转录组在LTBI人群和健康人群间存在明显差异,这些差异基因主要聚集于凋亡信号通路和趋化因子信号通路,其中巨噬细胞介导的免疫应答在其中发挥了重要作用,揭示了固有免疫应答在LTBI中的重要作用。

百合固金片辅助治疗初治肺结核的随机对照临床研究

目的 探讨百合固金片辅助治疗初治继发性肺结核（肺肾阴虚证）的有效性及安全性。方法 采用随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心临床研究,将96例初治肺结核患者采用随机数字表法分为研究组72例和对照组24例,两组受试者均采用2H-R-E-Z/4H-R-E方案进行抗结核治疗,研究组加用百合固金片,对照组加用百合固金片模拟剂,分别于治疗前及治疗2周、4周及8周观察其安全性及各项中医证候。应用SAS 9.1统计软件进行统计学分析处理。计数资料的比较采用χ2检验,计量资料采用t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果 两组患者全分析集（full analysis set,FAS）结果显示,治疗2周末研究组和对照组的愈显率（临床痊愈＋显效）分别为40.28%（29/72）和25.00%（6/24）,差异无统计学意义（χ2=1.95,P=0.1624）;治疗4周及8周末,研究组的中医证候愈显率分别为70.83%（51/72）、86.11%（62/72）,对照组分别为45.83%（11/24）、66.67%（16/24）,两组愈显率之间差异均有统计学意义（4周末,χ2=5.54,P=0.0186;8周末,χ2=4.49,P=0.0341）,研究组优于对照组;治疗2周和4周末,研究组的有效率分别为93.06%（67/72）、98.61%（71/72）,对照组的有效率分别为66.67%（16/24）、83.33%（20/24）,两组之间差异均有统计学意义（2周末,χ2=10.66,P=0.0011;4周末,χ2=8.19,P=0.0042）,研究组优于对照组,治疗8周末研究组和对照组的有效率分别为97.22%（70/72）和91.67%（22/24）,两组之间差异无统计学意义（χ2=1.33,P=0.2482）。研究组和对照组的咳嗽消失时间分别为20.5 d和28 d,差异有统计学意义（χ2=6.25,P=0.0124）,研究组疗效优于对照组。研究组未出现中药相关的不良反应。结论 百合固金片辅助治疗初治继发性肺结核可有效改善结核中毒症状,并有效缩短咳嗽消失时间,安全性好。

不同抗原全血ELISA检测技术对活动性肺结核的辅助诊断价值研究

目的探讨克隆表达的抗原PPD、早期分泌抗原靶6（ESAT-6）／培养滤液蛋白10（CFP-10）融合蛋白（简写为E／C）和ESAT-6的全血干扰素释放试验对活动性肺结核的辅助诊断价值。方法选取活动性结核组96例和对照组91例共计187例，抽取清晨空腹肝素钠抗凝外周静脉血5ml，分别给以抗原PPD、E／C和EAST-6刺激，通过ELISA的方法检测抗原刺激后血浆中IFN— γ的数值。结果在活动性肺结核组中3种抗原刺激后IFN- γ含量的中位数分别为ESAT-6[96（41-379）pg／ml]、E／C[3180（1192～7231）pg／ml]、PPD[4348（1230～9026）pg／ml]；明显高于对照组中IFN- γ含量ESAT-6[10（4～52）、E／C[210（49～523）]、PPD[1800（70～3021）pg／ml]，U值分别为1190．5、2405和1309．5，P值均〈0．01；ESAT-6、E／C和PPD的全血ELISA敏感度分别为78．1％（75／96）、87．5％（84／96）和85．4％（82／96），特异度分别为76．9％（70／91）、83．5％（76／91）和65．9％（60／91）。结论融合蛋白ESAT06／CFP-10对活动性结核病具有一定的辅助诊断价值。

百合固金片辅助治疗初治肺结核的随机对照临床研究

目的探讨百合固金片辅助治疗初治继发性肺结核（肺肾阴虚证）的有效性及安全性。方法采用随机、双盲、安慰剂平行对照、多中心临床研究，将96例初治肺结核患者采用随机数字表法分为研究组72例和对照组24例，两组受试者均采用2H-R-E-Z／4H-R-E方案进行抗结核治疗，研究组加用百合固金片，对照组加用百合固金片模拟剂，分别于治疗前及治疗2周、4周及8周观察其安全性及各项中医证候。应用SAS9．1统计软件进行统计学分析处理。计数资料的比较采用χ^2检验，计量资料采用t检验，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果两组患者全分析集（full analysis set，FAS）结果显示，治疗2周末研究组和对照组的愈显率（临床痊愈＋显效）分别为40．28％（29／72）和25．00％（6／24），差异无统计学意义（χ^2=1．95，P=0．1624）；治疗4周及8周末，研究组的中医证候愈显率分别为70．83％（51／72）、86．11％（62／72），对照组分别为45.83％（11／24）、66．67％（16／24），两组愈显率之间差异均有统计学意义（4周末，χ^2=5．54，P=-0．0186；8周末，χ^2=4．49，P=0．0341），研究组优于对照组；治疗2周和4周末，研究组的有效率分别为93．06％（67／72）、98．61％（71／72），对照组的有效率分别为66．67％（16／24）、83．33％（20／24），两组之间差异均有统计学意义（2周末，χ^2=10．66，P=0．0011；4周末，χ^2=8．19，P=0．0042），研究组优于对照组，治疗8周末研究组和对照组的有效率分别为97．22％（70／72）和91．67％（22／24），两组之间差异无统计学意义（χ^2=1．33，P=0．2482）。研究组和对照组的咳嗽消失时间分别为20．5d和28d，差异有统计学意义（χ^2=6．25，P=0．0124），研究组疗效优于对照组。研究组未出现中药相关的不良反应。结论百合固金片辅助治疗初治继发性肺结核可有效改善结核中毒症状，并有效缩短咳嗽消失时间，安全性好。

继发性肺结核伴呼吸衰竭患者外周血炎性标志物水平变化及其临床意义

目的探讨临床常用外周血炎性标志物在继发性肺结核伴呼吸衰竭中的应用价值。方法选择2017年12月至2019年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治并确诊为继发性肺结核的患者129例,其中单纯继发性肺结核(肺结核组)66例,继发性肺结核伴呼吸衰竭(呼吸衰竭组)63例,比较两组患者外周血血浆白细胞介素1家族成员6(interleukin-1 family 6,IL1F6)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hCRP)、血清降钙素(procalcitonin,PCT)水平及红细胞沉降率(erythrocyte sedimentationrate,ESR)。结果呼吸衰竭组患者的IL1F6、hCRP及PCT水平均明显高于肺结核组,差异有显著性(P<0.05),两组ESR比较差异无显著性(P>0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,IL1F6预测肺结核患者是否易发生呼吸衰竭的曲线下面积最高,为0.896,其敏感度为90.0%,特异度为81.0%。PCT预测肺结核患者是否易发生呼吸衰竭的曲线下面积为0.737,其敏感度为77.8%,特异度为68.3%。结论外周血IL1F6及PCT水平对继发性肺结核患者发生呼吸衰竭具有良好的诊断价值。

芪甲利肺胶囊治疗复治肺结核患者的疗效观察

目的评价芪甲利肺胶囊治疗复治肺结核的临床疗效。方法将2012年1月至2014年10月在首都医科大学附属北京胸科医院住院的复治肺结核患者109例，随机分为研究组（化疗加芪甲利肺胶囊组，53例）和对照组（单纯化疗组，56例）。观察治疗前及治疗后2个月、5个月和8个月的临床疗效、症状改善及免疫功能变化。结果研究组治疗2个月和5个月后痰涂片的转阴率分别为50．0％（28／56），53．6％（30／56），明显高于对照组的30．2％（16／53），34．0％（18／53），差异有统计学意义（χ^2=4．40，P=0．036；χ^2=4．21，P=0．040）；治疗8个月后痰涂片的转阴率研究组为76．8％（43／56），与对照组的71_7％（38／53）比较，差异无统计学意义（χ^2=0．37，P=0．545）；治疗3个月和8个月后研究组病灶显著吸收率分别为44．6％（25／56）、62．5％（35／56），明显高于对照组的26．4％（14／53）、43．4％（23、53），差异均有统计学意义（χ^2=3．94，P=0．047；χ^2=3．99，P=0．046）；治疗8个月后研究组空洞闭合率58．5％（24／41），与对照组的34．2％（13／38）比较，差异有统计学意义（χ^2=4．69，P=0．031）；研究组CD4^＋T淋巴细胞、CD4^＋／CD8^＋比值治疗后分别达（820．9±255．2）个／mm^3、2．02±0．1，与对照组[分别为（707．8±254．6）个／mm^3、1．69±0．41比较，差异有统计学意义（χ^2=0．72，P=0．036；χ^2=2．76，P=0．041）。结论芪甲利肺胶囊具有加速痰菌转阴及促进病灶吸收的作用，芪甲利肺胶囊可能有调节免疫功能，从而起到辅助抗结核作用。

芪甲利肺胶囊治疗复治肺结核患者的疗效观察

目的评价芪甲利肺胶囊治疗复治肺结核的临床疗效。方法将2012年1月至2014年10月在首都医科大学附属北京胸科医院住院的复治肺结核患者109例，随机分为研究组（化疗加芪甲利肺胶囊组，53例）和对照组（单纯化疗组，56例）。观察治疗前及治疗后2个月、5个月和8个月的临床疗效、症状改善及免疫功能变化。结果研究组治疗2个月和5个月后痰涂片的转阴率分别为50．0％（28／56），53．6％（30／56），明显高于对照组的30．2％（16／53），34．0％（18／53），差异有统计学意义（X2=4．40，P=0．036；X2=4．21，P=0．040）；治疗8个月后痰涂片的转阴率研究组为76．8％（43／56），与对照组的71．7％（38／53）比较，差异无统计学意义（x2=0．37，P=0．545）；治疗3个月和8个月后研究组病灶显著吸收率分别为44．6％（25／56）、62．5％（35／56），明显高于对照组的26．4％（14／53）、43．4％（23、53），差异均有统计学意义（X2=3．94，P=0．047；X2=3．99，P=0．046）；治疗8个月后研究组空洞闭合率58．5％（24／41），与对照组的34．2％（13／38）比较，差异有统计学意义（x2=4．69，P=0．031）；研究组CD4＋T淋巴细胞、CD4’／CD8＋比值治疗后分别达（820．9±255．2）个／mm2、2．02±0．1，与对照组[分别为（707．8±254．6）个／mm2、1．69±0．4]比较，差异有统计学意义（X2=0．72，p=-0．036；X2=2．76，P=0．041）。结论芪甲利肺胶囊具有加速痰菌转阴及促进病灶吸收的作用，芪甲利肺胶囊可能有调节免疫功能，从而起到辅助抗结核作用。

基于血清阴离子间隙、白蛋白及APACHEⅡ评分预测重症肺结核患者预后的模型构建与评价

目的:分析基于血清阴离子间隙(AG)、白蛋白(Alb)及急性生理和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分构建的预测模型对重症肺结核(PTB)患者的价值。方法:选取2020年10月~2023年1月我院收治的60例重症PTB患者纳入重症PTB组,根据院内生存状态分为死亡组21例和存活组39例,另选取同期我院60名体检健康者纳入对照组。检测血清Alb,AG水平,并计算APACHEⅡ评分。采用多因素Logistic回归模型分析重症PTB患者预后影响因素并基于影响因素构建预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清AG、Alb、APACHEⅡ评分和预测模型对重症PTB患者预后的预测价值。结果:与对照组比较,重症PTB组血清AG水平升高,Alb水平降低(P<0.05)。60例重症PTB患者院内死亡率为35.00%(21/60)。多因素Logistic回归模型分析显示,AG升高、APACHEⅡ评分增加为重症PTB患者预后的独立危险因素,Alb升高为独立保护因素(P<0.05)。重症PTB患者预后预测模型方程Ln (P/1-P)=-0.173+0.105×AG-0.057×Alb+0.057×APACHEⅡ评分,Hosmer-Lemeshow检验(P>0.05)。ROC曲线分析显示,预测模型预测重症PTB患者预后的曲线下面积(AUC)为0.859,大于血清AG、Alb、APACHEⅡ评分单独预测。结论:血清AG、Alb及APACHEⅡ评分与重症PTB患者预后独立相关,基于血清AG、Alb及APACHEⅡ评分构建的预测模型对重症PTB患者预后预测价值较高。

维生素D与结核病相关性研究进展

目前,结核病仍旧是威胁人类健康的主要疾病之一,全球有20 ～ 30亿人感染MTB,2014年新发病例960万例,我国占总例数的10％,形势仍然严峻[1].耐药结核病的增多和人免疫缺陷病毒(HIV)引起的双重感染使结核病的治疗面临新的挑战,亟需新的经济有效的手段预防和治疗[1],而通过提高结核病患者的免疫机能以增强机体对抗MTB的能力,为结核病的防治提供了新方向.维生素D作用广泛,是重要的免疫调节物质,现将维生素D与结核病的关系综述如下.

经验医学向精准医学的转变——《肺结核诊断》(WS 288-2017)解读

对《肺结核诊断》(WS 288-2017)从医学模式变迁的角度,就肺结核分类、诊断标准、诊断内容3个方面进行解读,指出肺结核分类中新增加气管支气管结核和结核性胸膜炎,诊断标准强调了结核分子生物学和病理学检查结果的诊断价值,并在内容中新增了耐药状况。最后从可行性和发展趋势方面提出2点建议:基层地区仍可考虑保留诊断性治疗等实用技术作为诊断依据,有条件的单位则需开拓新的分子技术增加结核杆菌DNA/RNA鉴定、耐药基因检测以利精准诊断。