目的探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)对全基因组丙型肝炎病毒JFH-1(hepatitis C virus,HCVJFH-1)在肝细胞中复制的影响。方法以体外转录的HCVJFH-1RNA转染Huh7细胞,制备含HCV病毒颗粒的感染上清,建立全基因组HCVJFH-1感染Huh7细胞模型...目的探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)对全基因组丙型肝炎病毒JFH-1(hepatitis C virus,HCVJFH-1)在肝细胞中复制的影响。方法以体外转录的HCVJFH-1RNA转染Huh7细胞,制备含HCV病毒颗粒的感染上清,建立全基因组HCVJFH-1感染Huh7细胞模型,分为对照组、CsA处理组,分别予以不同浓度、不同时间、不同时机和方法的CsA处理。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real ti me polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CsA对HCVJFH-1在Huh7细胞中复制的影响。结果与对照组比较,CsA(0.15、0.3、0.6、1.2μg/ml)处理组Huh7细胞中HCVJFH-1RNA相对表达量分别下降为(45.7±6.5)%、(18.9±2.1)%、(4.6±0.7)%、(2.1±0.2)%,上清中HCV拷贝数(×107/ml)较对照组(29.70±0.15)下降为(0.80±0.19)、(0.44±0.07)、(0.29±0.07)、(0.17±0.06)。CsA处理组HCV蛋白合成、上清中病毒颗粒的含量及Huh7细胞裂解液和上清感染力明显下降。同时CsA预处理较感染同时及感染后处理可更显著抑制HCVJFH-1在Huh7细胞中的复制,而撤药则导致其复制的反弹。以上差异均有统计学意义。结论 CsA可有效抑制全基因组HCVJFH-1在Huh7细胞中的复制及合成,并减少有感染力的HCV病毒颗粒产生。展开更多
文摘目的探讨环孢素A(cyclosporine A,CsA)对全基因组丙型肝炎病毒JFH-1(hepatitis C virus,HCVJFH-1)在肝细胞中复制的影响。方法以体外转录的HCVJFH-1RNA转染Huh7细胞,制备含HCV病毒颗粒的感染上清,建立全基因组HCVJFH-1感染Huh7细胞模型,分为对照组、CsA处理组,分别予以不同浓度、不同时间、不同时机和方法的CsA处理。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real ti me polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CsA对HCVJFH-1在Huh7细胞中复制的影响。结果与对照组比较,CsA(0.15、0.3、0.6、1.2μg/ml)处理组Huh7细胞中HCVJFH-1RNA相对表达量分别下降为(45.7±6.5)%、(18.9±2.1)%、(4.6±0.7)%、(2.1±0.2)%,上清中HCV拷贝数(×107/ml)较对照组(29.70±0.15)下降为(0.80±0.19)、(0.44±0.07)、(0.29±0.07)、(0.17±0.06)。CsA处理组HCV蛋白合成、上清中病毒颗粒的含量及Huh7细胞裂解液和上清感染力明显下降。同时CsA预处理较感染同时及感染后处理可更显著抑制HCVJFH-1在Huh7细胞中的复制,而撤药则导致其复制的反弹。以上差异均有统计学意义。结论 CsA可有效抑制全基因组HCVJFH-1在Huh7细胞中的复制及合成,并减少有感染力的HCV病毒颗粒产生。