上睑下垂美容手术的解剖学设计和效果分析

目的探讨不对称性上睑下垂美容手术的设计要点以及术后美容效果。方法通过对33例不对称性上睑下垂患者术前双眼各自不同特点的分析,提出设计要点,同时对术后的美容效果进行评价。结果本组病例中美容效果优者占87.9%,良以上者占94.0%。结论双眼对称是眼部美容手术成功的关键,只有按照患者各自的解剖学特点设计手术,才能取得良好的美容效果。

三氧化二砷对肝癌细胞系HepG2生长及核基质蛋白的影响

目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)对人肝癌细胞系 Hep G2的生长及核基质蛋白的影响。方法 应用生长指数分析和高分辨 SDS-聚丙烯酰胺凝胶双向电泳比较用 As2 O3处理后的 Hep G2细胞生长及核基质蛋白的改变。结果 As2 O3抑制Hep G2的生长 ,双向电泳显示经 As2 O3处理后 Hep G2细胞内出现新的核基质蛋白 ,并且该蛋白是细胞特异性的。结论 核基质蛋白是某些抗癌药物的作用靶子 ,As2 O3抑制肝癌细胞的生长可望用于临床治疗。

一氧化氮与中枢神经系统衰老的关系

一氧化氮(nitric oxide,NO)是20世纪80年代初期发现的一种具有独特理化性质和生物学活性的信息和效应分子,它广泛的存在于机体的不同组织中并发挥着极其重要的生理和病理作用。随着对NO不断深入的研究,发现其与中枢神经系统衰老关系密切,已成为神经病学和神经生物学研究的热点之一。本文综述了NO的生物学作用及其与中枢神经系统衰老关系方面的研究进展。

金黄地鼠上丘和外侧膝状体之间的联系

本实验采用了顺行和逆行追踪技术,对金黄地鼠上丘与丘脑视核团的纤维联系进行了实验观察。一、用尼氏和Loyez染色法,对4只正常金黄地鼠上丘和外侧膝状体背核和腹核的正常结构做了观察。二、^(3)H-亮氨酸和^(3)H-脯氨酸注入动物上丘不同部位(4只,存活期一天)后,可见神经末梢标记于同侧的外侧膝状体背核和腹核的外侧部位。若注射部位在上丘外侧,其投射部位在外侧膝状体背核和腹核的尾外侧;注射部位移向内侧,投射部位移向吻外侧。三、将HRP注入外侧膝状体背核(4只,存活期一天)或腹核(2只,存活期一天)或后外侧核(2只,存活期一天)后,在同侧上丘浅层见有标记神经元。在上丘深层则未见。本实验说明了上丘浅层的神经元对同侧的外侧膝状体背核和腹核有局部定位的投射,并按视野和视网膜将该投射作定位排列。

大鼠快肌与慢肌水溶性蛋白组的比较

目的 :对快肌和慢肌水溶性蛋白组进行比较 ,找出分别特异于快肌和慢肌的蛋白。方法 :应用蛋白组研究的核心技术———高分辨率二维电泳建立成年 (8月龄 )大鼠趾长伸肌 (代表快收缩纤维 )和比目鱼肌 (代表慢收缩纤维 )细胞内水溶性蛋白组表达的二维图谱。应用蛋白质氨基测序法和已知蛋白共电泳方法分别对经分离的蛋白进行鉴定。应用二维图谱差减法对快肌和慢肌的蛋白组进行比较。结果 :应用蛋白质氨基测序法和已知蛋白共电泳方法分别对 7个经分离的蛋白进行了鉴定。应用二维图谱差减法 ,发现了 3个分别特异于快肌和慢肌的蛋白。St1和St3仅在趾长伸肌被检测到 ,经蛋白质氨基测序法鉴定 ,St3为小钙白蛋白 ,而St2仅在比目鱼肌被检测到。结论 :快肌和慢肌细胞内水溶性蛋白组表达模式较为相似 ,但也分别存在其特异性蛋白 ,这些分别特异于快肌和慢肌的蛋白可能与其维持各自独特功能有关。小钙白蛋白和St1可作为鉴别快肌的标记物 ,而St2可作为鉴别慢肌的标记物。

小鼠脑发育中CDK5 mRNA表达变化的研究

目的 观察周期素依赖性蛋白激酶 5 (CDK5 )mRNA在脑发育中的表达与分布。方法 采用胚胎期至老年期小鼠全胚胎及脑切片的原位杂交染色。结果 ①全胚胎原位杂交染色发现脑内CDK5mRNA从胚胎 10 5d(E10 .5 )开始表达 ,主要分布于神经上皮的套层细胞内 ;②脑切片的原位杂交染色观察到从E14到成年期脑内均见CDK5mRNA阳性信号 ,主要定位于神经元的胞浆与核周 ,于新生期前后表达达高峰 ;分布于包括大脑皮层、海马、丘脑、下丘脑、小脑及许多神经核团。在老年期上述区域CDK5表达均有减弱 ,部分区域呈阴性。结论 表明脑内CDK5作用贯穿了整个脑的发育阶段 ,且主要参与了神经系统的早期发育 ;成年后CDK5可能继续保持对某些区域中神经元的功能调节。

用BrdU标记技术观察大鼠脊髓上胸段灰质细胞的分化发育

目的 观察脊髓灰质细胞的分化发育 ,寻找脊髓移植时胎鼠脊髓取材的最佳时间。 方法 用 5 -溴 -2 -脱氧尿嘧啶 (Brd U)标记 DNA,ABC免疫细胞化学方法观察大鼠上胸段脊髓灰质细胞的增殖分化情况。 结果孕鼠于 E10 d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段 Brd U免疫反应神经元主要集中在脊髓后角 ,脊髓侧角的 Brd U免疫反应神经元较少 ,前角仅有少量的 Brd U免疫反应神经元 ;孕鼠于 E11d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段后角 Br-d U免疫反应神经元较 E10 d减少 ,侧角和前角 Brd U免疫反应神经元增多 ;孕鼠于 E12 d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段 Brd U免疫反应神经元主要集中于前角和侧角 ,而后角仅有少量的 Brd U免疫反应神经元 ;孕鼠于 E13d、E14d腹腔注射 Brd U,胎鼠脊髓上胸段未见 Brd U免疫反应神经元。 结论 Brd U标记技术能较好的标记脊髓灰质细胞 ,胎鼠脊髓进行 Brd U标记的最佳时间应选择 E12 d,已标记胎鼠脊髓的最佳移植取材时间为

怀集石燕燕窝促细胞分裂活性的研究

1.借助Bio—Gel P—10柱层析法,由怀集石燕燕窝水提物部分纯化得一具有EGP活性的成分EGF-2。 2.在放射标记受体活性测定中,EGF-2与受体的竞争性结合曲线与小鼠EGF标准曲线相平行。EGF-2能显著刺激氚标记的胸腺嘧啶脱氧核苷对小鼠3T3成纤维细胞的掺入作用。这种活性不受抗小鼠EGF抗体的抑制。 3.借助Sephacry1-200 Superfine柱层析法,由上述水提物分离得一蛋白质组分(S-200Ⅰ+Ⅱ),对培养的人脐带淋巴细胞有促细胞分裂作用。并对培养的、经Con A转化的淋巴细胞有辅促细胞分裂作用。

神经元型一氧化氮合酶在快速衰老小鼠海马中的增龄性改变

【目的】通过观察快速衰老小鼠(SAM)在衰老过程中海马中nNOS的分布和表达变化,探讨NO/nNOS在中枢神经系统衰老中的作用。【方法】采用雄性快速衰老亚系8小鼠(SAMP8)及抗快速衰老亚系1小鼠(SAMR1)为研究对象,其中SAMP8为实验组,SAMR1为对照组,每组动物再分为青年组(2月龄)和老年组(10月龄)两组,每个年龄组随机分配6只动物。用免疫组织化学法标记SAM海马中nNOS神经元,观察海马CA1,CA2和CA3区nNOS神经元的形态和分布,并计数nNOS神经元的数量;用RT-PCR法检测海马中nNOSmRNA表达水平(用平均灰度值表示)。【结果】老龄SAMP8海马中阳性神经元的形态与其它组比较无明显差别,但CA1和CA2区阳性神经元密度明显减低,CA3区阳性神经元密度无明显改变。SAMP8老年组与青年组相比,海马CA1和CA2区nNOS阳性细胞的数量显著减少(73±14vs144±38,P<0.01;71±30vs126±39,P<0.05),CA3区阳性神经元数量无显著差别;SAMP8与SAMR1比较,青年组海马nNOS阳性细胞的数量无显著差别,老年组海马CA1和CA2区阳性细胞的数量显著减少(73±14vs139±24,P<0.01;71±30vs120±37,P<0.05)。SAMP8老年组海马nNOSmRNA水平明显低于青年组(0.43±0.17vs0.92±0.15,P<0.01),且低于相应月龄SAMR1(0.43±0.17vs0.86±0.13,P<0.01)。【结论】海马中nNOS催化产生不足量NO可能加速SAMP8衰老,致使学习记忆能力下降,为通过调节NO产量来延缓衰老及衰老相关学习记忆能力下降提供了理论依据。

神经细胞诱向(营养)因子

神经营养因子(neurotrophic factors, NFs)是靶组织产生的一种特异蛋白分子,有促进和维持神经细胞的生存、生长、分化和执行功能的作用,但不刺激细胞分裂。虽然不同的作者用过不同的名称(如Patterson称为指令因子instructive factor),但是他们对其生物效应的结论是一致的。在NFs中,有的NF只管理特定神经细胞特定显型的表达,如专门或主要使培养神经细胞突起伸长的因子,对这种促进分化的因子特称为突起伸长因子(neurite extension factor, NEF);有的NF主要促进神经细胞存活。

新生大鼠顶盖脑组织提取液的生化分析——Phast System电脑快速电泳

本文用Phast System电脑快速电泳仪,对新生大鼠顶盖提取液进行了分离和自动染色。结果:(1)20％自然PAGE显现25条蛋白带;(2)经微浓缩器10、30处理后的SDSPAGE显现19条;(3)10—15％梯度自然PAGE显现30条;(4)IEF 3—9电泳显现52条,其中约85％是酸性蛋白质。顶盖提取液中蛋白的分子量主要介于14KD和100KD之间。此外,对自动染色作了比较。

Sonic Hedgehog及其受体Patched在小鼠视交叉发育过程中的表达

在小鼠胚胎发育过程中,胚胎第13d(E13)至15d(E15)是视交叉发育的主要阶段。在本研究中,我们观察了在E13～E15,Sonic Hedgehog(Shh)及其受体Patched(Ptc)在视觉传导通路的表达。结果发现:在视交叉和视束中,Shh在视神经纤维接近中线时表达上调,越过中线后表达下调,并且主要表达在较深的区域。Ptc在E13～E14的视网膜和E14～E15的视束中有表达,但在视交叉中无表达。Ptc,而不是Shh,表达在体外培养的生长锥中。Shh和Ptc在视觉传导通路发育中的表达提示Shh可能在引导视神经生长方面发挥一定作用。

姜黄素促进损伤骨骼肌修复

目的:研究姜黄素促进损伤骨骼肌修复的功能。方法:制作小鼠胫骨前肌实验性损伤模型,实验小鼠分别肌注和口服姜黄素,以组织学指标观察姜黄素体内促进损伤骨骼肌的修复功能。采用MTT和流析细胞分析技术观察姜黄素对骨骼肌成肌细胞的作用及可能的信号传导通路。结果:实验的小鼠肌肉伤口区新生肌纤维显著多于对照组。姜黄素无明显促C2C12细胞增殖,但能促进C2C12细胞融合而分化成肌纤维;姜黄素能抑制C2C12细胞NFκB反应因子的转活,而对c -Myc和CRE通路反应因子没有显著影响。大剂量使用姜黄素未见急性毒性反应。结论:姜黄素能通过促进骨骼肌干细胞的分化而促进损伤骨骼肌的修复。

骨骼肌内源性生肌因子成肌活性随衰老下降

目的:观察和探讨骨骼肌内源性生肌因子(39kDa)成肌活性随衰老而发生的改变。方法:应用等电聚焦结合聚丙稀酰胺凝胶电泳多步功能测试分筛法对青年和老年大鼠骨骼肌内源性39kDa生肌因子进行分离,利用体外培养和体内模型对青年和老年大鼠骨骼肌生肌因子的成肌活性进行比较,采用增殖细胞抗原(PCNA)免疫组织化学技术观察生肌因子对骨骼肌干细胞—卫星细胞的增殖作用。结果:处理组大鼠骨骼肌内源性39kDa生肌因子C2C12细胞数目显著多于对照组,处理组39kDa生肌因子MTT值显著高于对照组(P <0 . 0 5 )。青年和老年生肌因子处理组都有相当一部分C2C12细胞融合形成肌管,但青年大鼠骨骼肌生肌因子融合形成的肌管数目显著多于老年大鼠。体内研究发现:注射39kDa生肌因子的青年大鼠胫骨前肌中有许多PCNA阳性细胞核,但在对照组中未发现PCNA阳性细胞核。然而,在经注射的老年大鼠胫骨前肌中只发现少量PCNA阳性细胞核。PCNA阳性细胞核半定量计数结果表明:经生肌因子注射的青年大鼠胫骨前肌PCNA阳性细胞核显著多于老年大鼠(P <0 .0 5 )。本研究结果提示:39kDa生肌因子能诱导骨骼肌干细胞—卫星细胞的增殖和分化,青年大鼠骨骼肌中39kDa生肌因子的成肌活性高于老年大鼠。

大鼠膈肌水溶性蛋白组的研究

本研究应用蛋白组的核心技术———高分辨率二维电泳对同属骨骼肌的膈肌和趾长伸肌水溶性蛋白组的二维电泳图谱进行了比较 ,并对两者在老化过程与年龄相关的水溶性蛋白进行了比较。我们发现 :膈肌和趾长伸肌水溶性蛋白的二维图谱极为相似 ,大部分蛋白都能较好地重叠。我们未能找到持续而稳定且特异于膈肌的水溶性蛋白。同时我们发现了三个与年龄相关蛋白 (S1,S2和S3) ,随增龄 ,蛋白S1只在 2 4月龄趾长伸肌存在 ,而在 8月龄和 2 4月龄的膈肌中却不能被检测到。S2在 8月龄的膈肌和趾长伸肌存在 ,而在 2 4月龄的膈肌和趾长伸肌中不能被检测到。S3在 8月龄的膈肌和趾长伸肌中不能被检测 ,而在 2 4月龄的膈肌和趾长伸肌中能被检测到。本研究提示 :膈肌和趾长伸肌水溶性蛋白在其成年时表达基本一致。

金黄地鼠前列腺分泌蛋白对输卵管液糖蛋白的影响

目的:在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠输卵管液中糖蛋白的影响。方法:金黄地鼠雄鼠依据手术方式的不同分为3组,分别为假手术组(SH)、附属性腺全去组(TX)和腹前列腺组(VP)(仅存前列腺)。收集与各手术组交配后不同时间点(交配后0.5、2、4、6h)的输卵管液(每一时间点及每一组,n=3),输卵管液蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,考马斯亮蓝或阿仙蓝染色分析,应用蛋白电泳印迹后与系列某一种特异性糖基专一性结合凝集素反应,分析糖蛋白的变化。结果:不同组雄鼠交配及不同时间点收集输卵管液蛋白电泳谱类似,约15条主要条带。凝集素结合谱示,麦胚凝集素(WGA)结合的相对分子质量(Mr)为32000、35500、47000、52000糖蛋白见于6h VP组输卵管液,而6h TX组可见Mr为81000、128000条带;与豌豆凝集素(PSA)结合Mr为37500、32000糖蛋白仅见于6h VP组,而6h TX组缺乏;仅6h VP组可见与双花扁豆凝集素(DBA)结合Mr为52000、47000糖蛋白,而6h TX组缺乏。而0.5、2、4h时间点收集的输卵管液各凝集素结合谱相似。结论:前列腺分泌蛋白可影响修饰交配6h后的输卵管液中含乙酰氨基葡萄糖、N-乙酰半乳糖胺/半乳糖和甘露糖糖链的糖蛋白。这些糖蛋白可能在胚胎的发育过程中起作用。

神经元型一氧化氮合酶在快速衰老小鼠额叶皮质中的增龄性改变

为了观察快速衰老小鼠(senescence accelerated mouse,SAM)衰老过程中大脑额叶皮质中nNOS的分布和表达变化,探讨NO/nNOS在中枢神经系统衰老中的作用。采用雄性快速衰老亚系8小鼠(senescence accelerated mouse/prone8,SAMP8)及抗快速衰老亚系1小鼠(senescence accelerated mouse/resistance1,SAMR1)为研究对象,其中SAMP8为实验组,SAMR1为对照组,每组动物再分为青年组(2月龄)和老年组(10月龄)两组。用免疫组织化学方法观察SAM额叶皮质中的nNOS神经元的形态和分布,并计数nNOS阳性神经元在额叶皮质中的数量;用RT-PCR法检测额叶皮质中nNOS mRNA表达水平。结果显示:SAMP8老年组与青年组相比,额叶皮质中nNOS阳性神经元的数量显著增加(15.8±6.3vs8.0±4.9,P<0.05);SAMP8与SAMR1比较,青年组额叶皮质nNOS阳性神经元的数量差异无统计学意义,老年组额叶皮质nNOS阳性神经元的数量显著增加(15.8±6.3vs7.5±5.3,P<0.05)。SAMP8老年组额叶皮质nNOS mRNA水平明显高于SAMP8青年组(1.00±0.17vs0.67±0.13,P<0.01)和老年组SAMR1(1.00±0.17vs0.67±0.11,P<0.01)。以上结果提示:额叶皮质中nNOS神经元的数量增加可能产生过量NO,NO可能参与了SAMP8快速衰老的过程。本研究的结果为通过调节额叶皮质NO产量来延缓衰老及衰老相关功能障碍提供了依据。

新生大鼠顶盖脑组织提取液的高效液相色谱分析

作者用HRLC层析分离新生大鼠顶盖提取液,在0.15ml/min流速时,有12个蛋白质层析峰。以Pharmacia标准蛋白质混合液层析曲线为标准,推算顶盖提取液蛋白质分子量介于210kD和2kD范围之间,其中在74kD和21kD范围之间的蛋白质在分子筛层析柱性能范围之内,提示有较高的可靠性。并推测在126.20分钟处可能收集到30kD神经细胞诱向因子。

核基质研究现状与展望

引言Berezney和Coffey首先报导了真核细胞内核基质蛋白的存在。核基质是细胞桩内的一种动态非染色质结构，它调节DNA的功能并提供调控核酸功能活动的场所．近年来研究表明，视网膜母细胞瘤基因产物与棱基质间的互相作用对细胞周期的调节显得十分重要。核基质蛋白数量庞大且可变化，因化学修饰．浓度或某种新型蛋白出现而使核基质蛋白发生改变，

视网膜移植之研究

视网膜移植实验主要开始于70年代,至80年代进入其成熟期。但至今距离临床应用仍有一段差距。在视网膜移植实验中,研究得比较深入和贡献较大的是颅内移植的研究。它的优点是能把视网膜移植到脑干视觉中枢附近,使视网膜节细胞的轴突(纤维)与视觉中枢连结形成通路,这一点是十分重要的环节。因为若把视网膜移植到远离其靶区的地方如脑皮质时。