胃癌NOTCH3的表达及其对细胞凋亡的影响研究

目的探讨NOTCH3在胃癌细胞中的表达水平及其对胃癌细胞凋亡的影响。方法Western blot检测NOTCH3蛋白在正常胃组织及胃癌细胞的相对表达水平。siScramble或si-NOTCH3-1、si-NOTCH3-2转染AGS和MKN28细胞,通过实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)及Western blot判断siRNA的转染效率;采用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染,流式细胞仪检测转染后AGS和MKN28的细胞凋亡率;Western blot检测转染后AGS和MKN28的cleaved-DNA修复酶(PARP)和cleaved-含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3的相对表达水平。结果胃癌细胞中NOTCH3蛋白相对表达水平高于正常胃组织。si-NOTCH3-1、si-NOTCH3-2转染后AGS和MKN28的细胞凋亡率明显升高。随着si-NOTCH3-2转染浓度的逐渐升高,NOTCH3蛋白的相对表达水平逐渐降低,而cleaved-PARP和cleaved-Caspase-3水平逐渐升高,且呈现明显的剂量依赖。结论NOTCH3在胃癌中表达增多,其可抑制胃癌细胞凋亡,促进胃癌进展。