43例腮腺Warthin瘤的细针穿刺细胞学分析

目的 :探讨腮腺腺淋巴瘤的细针穿刺细胞学特点。方法 :收集并复习 43例腮腺腺淋巴瘤 ,每例均备有巴氏染色、HE染色涂片及细胞块。结果 :43例均发现嗜酸性细胞及淋巴细胞 ,40例发现细胞碎屑 ,9例发现带有淋巴间质的嗜酸性细胞乳头状结构 ,35例发现巨噬细胞 ,5例出现鳞状上皮化生 ,3例发现肥大细胞。结论 :腺淋巴瘤是腮腺的常见肿瘤 ,细针穿刺一般可以作出准确诊断 ,但应注意与多形性腺瘤、腺样囊腺癌、腺泡细胞癌、慢性腮腺炎、淋巴上皮囊肿、鳞癌鉴别。

80例甲状腺乳头状癌细针穿刺细胞学诊断分析

目的 :探讨甲状腺乳头状癌的细胞学特征。方法 :对 80例甲状腺乳头状癌细针穿刺涂片的观察分析 ,结果 :甲状腺乳头状癌的细胞学特征有 :涂片细胞量丰富 ,细胞边界清楚 ,可呈平铺或乳头状结构 ,细胞核呈毛玻璃样外观 ,可见核内包涵体及核纵沟 ,并可见多核巨细胞 ,砂粒体及胶质成份。结论 :大多数甲状腺乳头状癌在细针穿刺细胞学上可作出明确的诊断 ,在术前对甲状腺结节的诊断及手术方式的选择上有重要的意义。

C-myc、N-myc在髓母细胞瘤中的表达及其与预后的关系

目的 了解细胞核转录因子 C- myc、N - m yc在髓母细胞瘤中的表达及其与预后的关系 ,以及在成人和儿童患者中的表达差异。方法 采用免疫组化 ABC法对 2 1例成人和 14例儿童髓母细胞瘤石蜡切片进行免疫组化检测 ,并结合随访资料进行生存曲线分析。结果 在全部病例中 ,C- myc有 5例表达 ,阳性率为 14.3% ( 5 /35 ) ,N- m yc在石蜡切片中未见表达 ;C- myc在成人患者中的表达 ( 1例 )明显低于儿童患者中的表达 ( 4例 )。生存曲线分析表明 C- myc的表达与否与预后无关。结论 C- m yc可能与髓母细胞瘤的发生有关 ,但与预后无关。儿童髓母细胞瘤的遗传学异常现象要高于成人。 N-

细胞周期调节蛋白P16、CDK4、P53在成人和儿童髓母细胞瘤中的表达及其与预后的关系

目的 检测细胞周期调节蛋白 P16、CDK4和 P5 3在成人和儿童髓母细胞瘤中的表达 ,并探讨其与预后的关系。方法 应用免疫组化 ABC法对 2 1例成人和 14例儿童髓母细胞瘤石蜡切片进行免疫组化检测 ,并结合随访资料进行生存曲线分析。结果 在全部 35例标本中 ,P16阳性率为 6 2 .9% ,CDK4阳性率为 10 0 % ,P5 3阳性率为 2 8.6 % ,其中 P16蛋白在成人中的表达 (16 / 2 1)要高于在儿童中的表达 (6 / 14 ) ,P5 3蛋白在成人中的表达(3/ 2 1)要低于在儿童中的表达 (7/ 14 ) ,但上述 3种蛋白的表达均与预后无关。结论 P16蛋白的表达缺失和 P5 3蛋白的异常表达可能与髓母细胞瘤的发生有关 ,但对预后无意义。儿童髓母细胞瘤的遗传学异常现象高于成人。

髓母细胞瘤中表皮生长因子受体的表达及基因扩增分析

目的 研究表皮生长因子受体在髓母细胞瘤中的蛋白表达及基因水平的扩增情况,从而分析二者关系。方法 对48例髓母细胞瘤标本进行免疫组化染色,同时进行差异多聚酶链反应,放射自显影后根据其信号强弱来判断基因的扩增情况。结果48例髓母细胞瘤中有7例表皮生长因子受体呈阳性表达（14.58％）,其中成人6例,儿童1例;差异多聚酶链反应未显示表皮生长因子受体有基因水平的异常扩增。结论 表皮生长因子受体蛋白的过度表达存在于髓母细胞瘤,尤以成人为主,但其机制可能与基因的异常扩增无关。

颅内原始神经外胚叶肿瘤中TIG1启动子的高甲基化

目的检测颅内原始神经外胚叶肿瘤(primitive neuroectodermal tumor,PNET)中TIG1(tazarotene induced gene-1)基因启动子的甲基化状态。方法使用甲基化特异PCR(MSP)法检测25例原发髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)、9例原发幕上原始神经外胚叶肿瘤(supratentorial primitive neuroectodermal tumor,SPNET)和7株PNET细胞系中TIG1的甲基化水平。用RT-PCR方法检测PNET细胞中TIG1的转录水平。并用去甲基化试剂处理PNET细胞,观察基因转录水平与甲基化状态间的关系。结果原发MB及SPNET中TIG1启动子的异常甲基化率分别为40%(10/25)和44%(4/9)。该基因在PNET中的甲基化异常是肿瘤特异性的。PNET细胞系中均有TIG1高甲基化,并伴有转录水平的表达减少或丢失(7/7)。TIG1的表达水平与启动子甲基化状态呈明显负相关。并且,这种相关性得到去甲基化试剂处理实验的支持。经去甲基化试剂5-aza-2′-deoxycyti-dine处理的全部细胞系中TIG1的表达都得到了恢复。结论大部分PNET细胞系中都有TIG1表达的减少和缺失,且该基因缺失与启动子高甲基化密切相关。同时,TIG1的高甲基化率在原发PNET中也能检测到,提示TIG1可能在颅内PNET的肿瘤发生中起重要作用。

严重急性呼吸综合征的病理改变

目的 探讨严重急性呼吸综合征 (SARS)的主要脏器的病理改变特点及发病机制。方法 详细检查 7例SARS患者的肺、心、脾、肝、肾等标本的大体特点及用常规方法研究光镜下SARS累及各脏器的病变特点。结果 7例中 ,病程短 (5d)的患者肺部表现以肺水肿为主。与通常的肺水肿相比 ,其水肿液中纤维素成分多 ,可见透明膜形成。 5例病程超过 3周的患者出现肺泡内机化及肺泡间隔内的纤维母细胞增生 ,造成肺泡的实变和闭塞。 6例可见到肺小血管内的微血栓。 7例均可见到散在的肺出血、小叶性肺炎、肺泡上皮脱落、增生等病变。 2例可见真菌感染 ,1例累及左全肺及右肺部分区域 ,还累及心脏和肾脏 ,1例出现在肺门淋巴结。肺门淋巴结多表现为充血、出血及淋巴组织减少 ,窦组织细胞增多。 5例心脏有明显的肥大 ,2例有心内血栓 ,1例有灶性心肌炎 ,1例为真菌性心肌炎。 7例中有 1例为结节性肝硬化 ,另 1例出现广泛的肝细胞带状坏死。脾内均有白髓变小或消失 ,红髓明显充血和出血。 1例腹腔内淋巴结肿大 ,但其内淋巴滤泡亦减少 ,有明显充血和出血及窦组织细胞增生。结论 SARS的主要病变为肺 ,以各期弥漫性肺泡损伤的病变为基本特征。

DNA错配修复基因甲基化在肝细胞癌发生发展中的作用

目的 探讨DNA错配修复基因 (MMR)hMLH1,hMSH2和hMSH3甲基化在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用。方法 采用甲基化特异性聚合酶链反应 (MSP)法对 38例新鲜HCC组织 ,相应非肿瘤肝组织 ,2例正常的捐肝组织及 6种肝癌细胞系的hMLH1,hMSH2和hMSH3基因启动子CpG岛甲基化进行检测 ;培养 6种肝癌细胞系 ,MSP法检测加入 5 aza 2′ deoxycytidine前后hMSH2基因在HCC中的甲基化状态改变 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测加入 5 aza 2′ deoxycytidine前后hMSH2在肝癌细胞株中的mRNA表达改变。 结果 HCC标本中 13 2 % (5 / 38)发生了hMLH1启动子甲基化 ,6 8 4 % (2 6 / 38)发生了hMSH2启动子甲基化 ;相应的非肿瘤肝组织中hMLH1,hMSH2启动子甲基化阳性率分别为 2 6 % (1/ 38) ,5 5 3% (2 1/ 38) ;2例正常肝组织中未发现甲基化 ;6株肝癌细胞系中有 5株发生了hMSH2启动子甲基化 ,而未发现有MLH1启动子甲基化。所有标本中均未发现有hMSH3启动子甲基化。 5 aza 2′ deoxycytidine处理细胞株后 ,可部分或完全逆转hMSH2启动子甲基化 ,各细胞株的mRNA均有不同程度的表达增加。结论 hMSH3基因启动子CpG岛甲基化与HCC的发生发展关系不大。hMSH2基因甲基化与mRNA表达密切相关 ,是基因表达调节的一种重要方式。

髓母细胞瘤全基因组的等位基因型分析

目的 研究髓母细胞瘤全基因组的遗传学异常 ,寻找与该肿瘤发病有关的等位基因失衡的特异性染色体位点。方法 应用包括 384个微卫星灶标记物的高分辨全基因组等位基因型分析法研究 12例髓母细胞瘤的遗传学改变。结果 我们在所有 39条常染色体臂上发现了 2 38个(6 2 3% )失衡的等位基因。在染色体 7q (5 8 3% ) ,8p (6 6 7% ) ,16 q (5 8 3% ) ,17p (5 8 3% )和17q (6 6 7% )上存在非随机的等位基因丢失或获得。另外 ,在平均值以上的等位基因失衡出现在染色体 3p (33 3% ) ,3q (33 3% ) ,4 q (4 1 7% ) ,7p (33 3% ) ,8q (4 1 7% ) ,10 q (4 1 7% ) ,13q(33 3% ) ,14 q (33 3% )和 2 0 q (33 3% )。染色体上等位基因失衡的比率与患者的预后无明显关联。结论 发生在染色体 7q ,8p ,16 q ,17p和

髓母细胞瘤与幕上原始神经外胚叶肿瘤中RASSF1A基因的甲基化差异

目的通过研究髓母细胞瘤与幕上原始神经外胚叶肿瘤(SPNET)中 RASSF1A 基因的甲基化改变,探讨颅内原始神经外胚叶肿瘤(PNET)的不同亚型中该基因的表遗传学差异及其意义。方法收集25例原发髓母细胞瘤,9例原发 SPNET,3株髓母细胞瘤细胞系和2株 SPNET 细胞系。采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测 RASSF1A 基因启动子区的甲基化状态。应用去甲基化试剂5-aza-2′deoxycytidine 处理存在基因表达缺失的细胞系,探讨基因表达与甲基化之间的关系。结果100%(25/25)的原发髓母细胞瘤、6/9的原发 SPNET 及全部 PNET 细胞系中均检测到RASSFIA 基因的甲基化。相反,该基因甲基化在全部正常组织(包括2例小脑,5例大脑)中均未检测到。并且,RASSF1A 在 SPNET 中的甲基化率明显低于髓母细胞瘤(Fisher 精确检验,P=0.014)。在经去甲基化试剂处理的 PNET 细胞中,该基因表达得以恢复,证明甲基化与该基因沉默相关。结论RASSF1A 甲基化是肿瘤特异性的,RASSF1A 甲基化与 PNET 的发生有一定关联,不同亚型的 PNET 之间 RASSF1A 基因的不同甲基化状态提示髓母细胞瘤和 SPNET 是表遗传学上存在差异的两类肿瘤。

肝细胞肝癌中外周血浆DNA基因甲基化检测及意义

目的评估外周血浆DNA甲基化检测在肝细胞肝癌(HCC)诊断中的作用,筛选血浆灵敏度及特异性高的甲基化抑癌基因。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)检测34例经病理检查证实的HCC患者血浆及其配对癌组织中的SLIT2及DAPK基因启动子甲基化状态,并分析其与HCC临床病理特征的关系。结果 34例HCC患者癌组织中SLIT2和DAPK基因甲基化率分别为70.6%(24/34)和79.4%(27/34),相应外周血浆中SLIT2和DAPK基因甲基化率分别为44.1%(15/34)和50.0%(17/34)。血浆SLIT2和DAPK基因甲基化检测的灵敏度分别为62.5%和63.0%,特异度均为100%,阴性预测值分别为52.6%和41.2%,阳性预测值均为100%。HCC癌组织和外周血浆中SLIT2及DAPK甲基化检出率与HCC各临床病理特征无关(P>0.05)。在AFP<400μg/L患者中SLIT2和DAPK基因甲基化联合检出率达61.1%(11/18)。结论基于MSP方法,血浆中SLIT2及DAPK基因甲基化仍有较高的检出率,HCC癌组织和血浆中SLIT2及DAPK基因甲基化具有明显的一致性。血浆DNA甲基化可作为一种独立非侵入性诊断HCC的标志物,尤其对AFP阴性者可提高HCC的诊断率。HBV感染可能仅与部分抑癌基因甲基化相关。

髓母细胞瘤的比较基因组杂交分析

髓母细胞瘤是儿童最常见的恶性脑肿瘤,并占其中枢神经系统肿瘤的10%～20%.临床上髓母细胞瘤表现为不良的生物学行为,患者的预后很差[1].

脑节细胞性胶质瘤的分子遗传学研究

目的通过研究脑节细胞性胶质瘤全基因组的遗传学改变,探讨该肿瘤的发病机制。方法应用比较基因组杂交技术,分析脑节细胞性胶质瘤全基因组的遗传学改变。结果收集脑节细胞性胶质瘤5例,男性3例,女性2例。其中,3例肿瘤发现有9号染色体短臂(9p)的丢失,2例有7号染色体的获得,该结果通过荧光原位杂交(FISH)技术得到了进一步的证实。应用免疫组织化学(ABC法)染色,位于染色体7p11-p13上的癌基因表皮生长因子受体(EGFR)在所有5例节细胞性胶质瘤中都无异常表达。此外,在染色体2q33-q34,8q12-q22,14q21-qter,15q-26qter和Y上也都发现了遗传物质的丢失或扩增。结论染色体9p的丢失及7号染色体的获得可能与脑节细胞性胶质瘤的发病机制有关。

几种三阴性乳腺癌标志物的临床病理意义

乳腺癌是一种高度异质性肿瘤，这种异质性体现在不同肿瘤类型之间以及同一肿瘤内部之间等多层次的差异，亦表现在传统的组织病理分型／免疫组织化学（ immunohistochemical ， IHC ）特征的分型和近期依据基因表达谱（ gene expression profiling ， GEP）的分子分型上［1］。根据最新版WHO分类，基于不同的生长方式、组织学结构和细胞学形态，乳腺癌可分为21种不同的组织学类型［2］。不同类型的肿瘤具有不同的组织学形态、基因表达及预后特征。使用分子分型可将乳腺癌分为不同的亚型，包括表达雌激素受体（ ER）相关因子的亚型（ luminal型）、表达人类表皮生长因子受体2（ HER2）相关通路因子的亚型（ HER2过表达亚型）和表达基底因子但不表达激素受体通路的亚型（ basal like breast cancer ， BLBC ）。在日常应用中，依据GEP分析的分子分型常常被IHC分型所替代。通过IHC分型方法［3］，乳腺癌被划分为激素受体（ ER、PR）阳性组和阴性组，后者根据HER2表达情况进一步分为HER2过表达乳腺癌和三阴性（ ER、PR、HER2阴性）乳腺癌（ triple negative breast carcinoma ， TNBC ）。2013年， St Gallen国际乳腺癌会议专家组再次确认IHC分类法，以乳腺癌IHC分型替代GEP分子分型：luminal A型（ ER ＋， PR≥20％， HER2－， Ki-67＜20％）；luminal B型（ ER＋， PR＜20％和／或HER2＋和／或Ki-67≥20％）；HER2过表达型（ ER －， PR －， HER2＋）；基底样型（ER－，PR－，HER2－）［4］。尽管这种IHC分类方法便于使用，但与GEP分型并不完全一致［4-5］。