半边旗提取物5F对HepG2细胞凋亡的影响及其机制

目的：研究半边旗（PsL）提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid（5F）诱导的HepG2细胞凋亡及其可能机制。方法：通过MTT法检测细胞活性以研究HepG2细胞经不同浓度（5-80 mg/L）5F处理24 h所导致的5F细胞毒作用。采用Hoechst/PI实验定性分析细胞凋亡。采用Western blotting实验检测经5F处理的HepG2细胞线粒体内Bax水平及分析cyto-c与AIF在胞浆内的水平。结果：通过细胞活性分析证明,5F对HepG2细胞的细胞毒性随着5F浓度的提高而增强。HepG2经5F处理后,可观察到以细胞核凝聚为特征的凋亡细胞。经5F处理的HepG2细胞线粒体内Bax水平提高,胞浆内cyto-c及AIF水平增强。结论：5F介导的细胞凋亡涉及线粒体依赖途径,5F可能对人类癌细胞具有诱导凋亡作用,尤其是肝细胞癌（HCC）细胞。

5F诱导的HepG2细胞凋亡与NF-кB活性抑制有关

目的调查中草药半边旗(PsL)提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)诱导HepG2细胞凋亡的机制。方法通过生存及细胞凋亡分析检测5F对HepG2的增殖抑制效果。同时,采用免疫印迹法评价5F对细胞株HepG2细胞核NF-кB/p65、胞浆IкBα表达的影响。结果 MTT分析证实5F处理呈剂量依赖、时间依赖方式抑制了HepG2增殖。形态分析及Annexin V-EGFP染色则确认了5F诱导的细胞凋亡。而且,该凋亡伴随着IкBα表达的提高、NF-кB/p65表达的降低。结论 5F所诱导HepG2细胞凋亡与IкB生成导致的NF-кB活性抑制有关。

半边旗提取物5F诱导肝癌细胞株HepG2发生凋亡的机制

半边旗（Pteris Semipinnata L）是凤尾蕨属植物，生长于我国南方。民间常用于治疗疗疮、毒蛇咬伤、跌打损伤、疟疾等。广东医学院梁念慈教授在九十年代初筛选二十多种中草药的抗癌作用时，发现半边旗的水提液或醇提液显示对多种培养的癌细胞均有较强细胞毒作用。其中，从半边旗中分离出的具有抗癌活性的二萜类化合物5F（ent-1lct-hydroxy-15-oxo—ent-kaur-16-en-19-oic-acid）可抑制多种培养的癌细胞的增殖。本研究通过酶联免疫技术、流式细胞技术、免疫双染技术等多途径显示出5F可通过诱导肝癌细胞株HepG2发生凋亡来抑制肿瘤细胞的生长，分析了该凋亡与p53、NFKB、IKB、HIF、VEGF、Bax、cyto-c及AIF等细胞因子表达变化的关系，并检测了癌细胞内活性氧浓度的变化与5F及凋亡的相关性。

半边旗提取物5F诱导HepG2细胞凋亡与p53活化及血管内皮生长因子抑制有关

目的观察半边旗提取物Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)对人肝癌细胞HepG2增殖的影响,并探讨p53、血管内皮生长因子(VEGF)及Caspase-3在5F诱导的HepG2细胞凋亡中的作用。方法采用MTT分析检测5F对HepG2细胞增殖的影响,并通过细胞凋亡检测ELISA试剂盒分析经5F处理的HepG2细胞胞浆核小体片段,以确定5F能否诱导细胞凋亡,采用Hoechst/PI分析鉴定凋亡细胞核形态。通过免疫印迹(Western blotting)分析测定p53及VEGF蛋白表达水平,并通过Caspases-3分光光度法检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果通过细胞活性分析证实,5F对HepG2的细胞毒作用随着5F质量浓度的升高而增强。5F诱导HepG2产生胞浆核小体片段,并且该诱导作用具有剂量依赖性。5F处理后,凋亡变化,如染色质浓缩,被Hoechst/PI染色所确定。5F处理后HepG2细胞核内p53表达水平显著提高,而胞浆VEGF表达水平却下降,同时,Caspase-3活性通过浓度依赖方式增强。结论5F所诱导的HepG2细胞凋亡与p53及Caspase-3活化、VEGF负调控有关。5F可能具有抗癌尤其是抗肝细胞癌价值。

ROS不参与Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid诱导的HepG2细胞凋亡

目的:确定活性氧(ROS)生成在Ent-11α-hydroxy-15-oxo-kaur-16-en-19-oic-acid(5F)所诱导的HepG2细胞凋亡中的作用。方法:采用MTT分析检测5F对HepG2细胞增殖的影响,再以Hoechst/PI法分析凋亡细胞的形态变化。为了评价细胞内ROS水平,采用了GENMED试剂盒。HepG2细胞经5F处理24 h,或1 mmol.L-1GSH预处理1 h再经5F处理24 h,然后以Cell Death Detection ELISA试剂盒检测胞浆核小体片段。结果:通过细胞活性分析证实,5F对HepG2的细胞毒作用随着5F浓度升高而增强。而凋亡变化,如染色质浓缩,则被Hoechst/PI染色所证实。经5F处理的HepG2细胞内ROS生成减少被观察到。5F诱导的胞浆核小体片段并不由于GSH降低ROS介导的信号转导水平而发生变化。并且,顺铂(CDDP)诱导的ROS生成可被5F清除,同时5F还显示了与CDDP协同杀伤细胞作用。结论:5F不仅能通过非ROS依赖途径诱导细胞凋亡,还可缓解氧化应激。

急性淋巴细胞性白血病患儿中枢神经系统白血病预防的研究进展

采用联合化疗以来，儿童急性淋巴细胞性白血病（ALL）的预后大为改观。上世纪60年代的研究证实，约65％的白血病患儿在缓解期出现中枢神经系统（CNS）白血病，从而导致全身复发。所以，儿童ALL治疗成功与CNS的预防性治疗密切相关，进行CNS治疗的患儿有较高的无事件生存（EFS）及长期生存率。CNS预防性治疗最初使用的颅脑放射治疗，剂量是24Gy，同时加短期的鞘内注射。然而，生存者的长期随访发现，该治疗有严重的毒性反应，如：生长迟缓及内分泌紊乱、神经心理方面的问题等；继发性颅脑肿瘤的风险明显增加。由于颅脑放疗引起的晚期毒性反应逐渐被认识，随后发展为逐渐减少放疗剂量和（或）使用全身（或鞘内）化疗取代放疗。新的治疗包括延长鞘注的疗程、采用中～大剂量甲氨蝶呤（MTX）持续静脉输注以及在应用泼尼松的基础上使用地塞米松。任何形式的CNS治疗都可以引起急性的或晚期的毒性反应。后来对病情评估越来越详细，如：初诊时根据CNS情况、病情危险度分组等进行不同方法CNS预防治疗，这些临床研究的目的是为了减少治疗产生的毒性反应的风险，改善治疗效果。