一氧化氮和氧自由基诱导缺氧再给氧心肌细胞凋亡的bcl-2和p53信号通路研究

观察了心肌缺氧再给氧损伤的一氧化氮（nitric oxide,NO）和氧自由基机制.新生 Wistar大鼠心肌细胞置于95％N2/5％CO2环境培养24 h,然后置于95％O2/5％CO2环境培养4h造成缺氧再给氧心肌细胞损伤模型.单纯缺氧组心肌细胞置于95％N2/5％CO2环境培养24h,但不再给氧.NO供体硝普钠（SNP,5μmol/L）、NO合酶抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME,100μmol/L）和其异构体Nω-硝基-D-精氨酸甲酯（D-NAME,100μmol/L）以及超氧化物歧化酶/过氧化氢酶（SOD/CAT,各100U/mL）分别于缺氧前加入培养基.正常对照组心肌细胞置于95％空气/5％CO2环境下培养.结果显示,缺氧24h能增加培养介质中NO,NO2-/NO3-,硫代巴比妥酸反应产物（TBARS）和乳酸脱氢酶（LDH）水平,再给氧降低培养介质中NO和NO2-/NO3-水平,增加TBARS和LDH水平.缺氧上调bcl-2,p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平,而再给氧下调bcl-2蛋白表达水平,上调p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平.同时,缺氧增加心肌细胞凋亡率,而再给氧增加心肌细胞坏死率.NO供体硝普钠（SNP）增加培养介质中NO2-/NO3-和TBARS水平,下调bcl-2蛋白表达而上调p53和p21/wafl/cipl蛋白表达水平,增加DNA断裂、凋亡及坏死细胞率.L-NAM日和SOD/CAT分别降低培养介质中NO2-/NO3-和TBARS水平。