遗传性骨软骨瘤软骨细胞的体外培养

目的:通过对人遗传性骨软骨瘤软骨细胞的体外培养,观察肿瘤软骨细胞的生长特性及相关生物学特点,为进一步研究骨软骨瘤细胞学起因奠定基础。方法:原代培养遗传性骨软骨瘤组织中的软骨细胞并进行传代,进行活细胞形态观察,同时测定细胞增殖能力及贴壁率,与正常人关节软骨细胞做对照。结果:原代细胞在经过完全消化后,细胞活力仍达到95%。传代后骨软骨瘤细胞体积增大,细胞呈现星形,树突增多,细胞内颗粒多且明显。骨软骨瘤细胞增殖随着传代的增加减慢,第2代细胞增殖能力已经与原代细胞产生明显差别(P<0.01,t=3.203)。原代骨软骨瘤细胞在24h内大部分贴壁,随着传代的增加,细胞贴附能力下降,第4代细胞贴壁率与原代细胞产生明显区别(P<0.01,t=4.611)。结论:体外培养的骨软骨瘤细胞从形态,生物学特性(细胞增殖情况、细胞贴附能力)均不同于正常软骨细胞,为今后更加深入的研究遗传骨软骨瘤的病因学奠定一定的体外培养基础。

遗传性骨软骨瘤软骨细胞的生物学特性

目的:观察遗传性骨软骨瘤软骨细胞的生物学特性。方法:采用透射电镜、细胞培养等方法观察肿瘤软骨细胞形态特征;同时观察肿瘤软骨细胞的增殖、贴附能力,与正常人关节软骨细胞做对照。结果:透射电镜(TEM)发现肿瘤软骨细胞膜附近含有大量的微丝结构,集结成束,与细胞突起有关;体外单层培养发现肿瘤软骨细胞突起增多,细胞呈现星形;骨软骨瘤软骨细胞的增殖与贴附能力随着传代的增加减慢和减低,传4代细胞增殖能力和贴附能力均与肿瘤原代细胞及正常关节软骨细胞具有明显差别(P<0.1)。结论:骨软骨瘤软骨细胞虽然与正常软骨细胞大体相似,但生物学特性存在明显区别:细胞形态改变,微丝增加,细胞增殖与贴附能力等均不同于正常软骨细胞。

蛋白多糖在遗传性多发性骨软骨瘤形成中的重要作用

目的 :了解遗传性多发性骨软骨瘤 (HereditaryMultipleExostosis ,EXT )中硫酸肝素 (HeparanSulfate ,HS)链及蛋白多糖 (Perlecan)的表达 ,探讨蛋白多糖在遗传性多发性骨软骨瘤发病机制中的作用。方法 :采用免疫组织化学方法 (SABC)对 4例EXT患者骨软骨瘤软骨组织标本中HS及Perlecan的表达进行检测。与正常髂骨嵴软骨 (2例 )及小关节突软骨 (2例 )对照。结果 :遗传性多发性骨软骨瘤软骨组织不具有典型生长板软骨分层结构 ,细胞呈巢状分布 ;4例骨软骨瘤软骨细胞及基质组织中几乎都没有HS的表达 ;Perlecan定位及表达异常 :主要表达于细胞膜内侧 ,而细胞膜表面及细胞外基质表达明显减少。结论 :蛋白多糖侧链HS链及Perlecan的表达改变说明蛋白多糖在遗传性多发性骨软骨瘤发病中起重要作用。