食管癌原发灶与淋巴结转移灶细胞染色体变化特征的比较

背景与目的:食管癌早期可发生局部淋巴或血行转移,这是导致复发和预后差的主要原因。但是,食管癌转移发生的分子机制尚不清楚。本研究旨在分析食管癌原发灶和淋巴结转移灶肿瘤细胞染色体变化的特征,寻找或定位与食管癌转移相关基因,加深对其转移机制的了解。方法:应用比较基因组杂交技术(comparativegenomichybridization,CGH)分析15例食管癌患者原发灶和其对应的淋巴结转移灶的染色体基因组改变。结果:最常见染色体DNA拷贝数增加的部位是3q,8q,6p,20p,5p,18p,2p,2q,1q;常见的染色体DNA拷贝数丢失的部位是10p,10q,17p,18q,4p,13q。其中,最有意义的发现是6p增加(原发灶:2/15,13%,转移灶:7/15,47%),20p增加(原发灶:5/15,33.3%,转移灶:11/15,73.3%)。第二个发现是10p丢失(原发灶:2/15,13.3%,转移灶:8/15,53%),10q丢失(原发灶:2/15,13.3%,转移灶:7/15,46.6%)。结论:食管癌原发灶和淋巴结转移灶细胞染色体基因组改变最显著的部位是6p,20p的增加和10p,10q的丢失;这些部位可能存在与食管癌细胞淋巴结转移相关的基因。

携带IL-12的增殖腺病毒对鼻咽癌细胞的杀伤作用

目的 肿瘤选择性增殖腺病毒携带小鼠白细胞介素 1 2 (mIL1 2 )基因 ,增强对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法 用非增殖腺病毒Ad LacZ测定腺病毒对鼻咽癌细胞CNE3和 91 5的转染率 ,用E1B 55 0 0 0u蛋白缺失的腺病毒dl1 52 0和E1B 55 0 0 0u蛋白缺失的腺病毒CNHK2 0 0 mIL1 2分别转染培养的CNE3和 91 5 ,并瘤内注射到裸鼠皮下的CNE3移植瘤。结果 Ad LacZ病毒数量与细胞数量之比 (MOI)为 1 0 0时 ,转染率分别为 63 %和 56 % ;MOI为 1 0时 ,分别为 1 2 %和 8%。在体外不加入淋巴细胞的条件下 ,CNHK2 0 0 mIL1 2和dl1 52 0在MOI为 1 0 0时都可在 7d内完全杀灭鼻咽癌细胞CNE3和 91 5。对裸鼠CNE3移植瘤 ,CNHK2 0 0 mIL1 2治疗组疗效显著高于dl1 52 0治疗组 (P <0 .0 5) ,表明在选择性腺病毒中插入mIL1 2增强了其杀伤功能。结论 选择性增殖腺病毒携带mIL1 2后能够增强病毒对鼻咽癌细胞的杀伤作用 ,为鼻咽癌临床治疗探索一种新的基因病毒治疗方法。

携带mIL-12基因的增殖腺病毒在鼻咽癌细胞中增殖及mIL-12高效表达

目的联合选择性增殖腺病毒溶肿瘤细胞和小鼠白细胞介素12(mouse interleukin-12, mIL12)免疫治疗的作用,提高对肿瘤细胞的杀伤作用。方法用携带mIL12的选择性增殖腺病毒CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞株CNE3和915,测定其在鼻咽癌细胞株中的增殖能力和mIL12的表达水平。结果CNHK200-mIL12转染鼻咽癌细胞后,免疫组化染色显示大部分细胞腺病毒六联体蛋白(hexon)阳性,用流式细胞仪检测,转染24 h 后CNE3和915细胞的阳性率分别比0 h增高39%和4%,转染72 h后,病毒增殖超过1 000倍,增殖能力同dl1520相似,并能高水平表达mIL12,在1×104个CNE3和915细胞中分别达到(84.5±4.6)和(75.6±3.4)ng/105空斑形成单位(plaque forming unit, PFU)。结论携带mIL12 的CNHK200在p53缺陷的鼻咽癌细胞中增殖,并且高效表达mIL12,为进一步研究体内外对肿瘤杀伤作用奠定基础。

食管癌淋巴结转移组织中COL21A1,RUNX2,COAS基因定量检测

目的:探讨 3种可能的食管癌转移相关基因COL21A1、RUNX2和COAS与食管癌淋巴结转移的相关性。方法:选择 4例经病理证实为食管鳞状细胞癌伴淋巴结转移病例,应用实时荧光定量PCR(RQ- PCR)技术测量其淋巴结转移灶中COL21A1、RUNX2和COAS基因的扩增倍数。结果:COL21A1扩增倍数分别为 2. 50, 31. 34, 0. 68,6. 45;RUNX2扩增倍数分别为 4. 44, 1. 29, 0. 23, 3. 25; COAS扩增倍数分别为 2. 11, 10. 13, 0. 44, 4. 99。3种基因在3 /4食管癌转移淋巴结组织中表达增强。结论:COL21A1,RUNX2和COAS基因可能与食管癌的淋巴结转移有关。

高转移肺腺癌细胞系Anip973中存在3p24的断裂重排

目的 确认一对细胞来源相同、转移能力不同的人肺腺癌细胞系 AGZY83- a和 Anip- 973中3号染色体短臂的分子细胞遗传学差异。方法 采用 3p涂染探针对两细胞系进行 G显带后荧光原位杂交。结果 两细胞系共同存在标记染色体 der(3;5 ) (3pter→ 3p10∷ 5 q10→ 5 qter)和 der(1) t(1;12 ;3)(3pter→ 3q12∷ 12 q2 4→ 12 q15∷ 1p2 2→ 1qter)。不同的是 ,低转移细胞系 AGZY83- a中存在 1条正常的 3号染色体 ;而在高转移细胞系 Anip973中 ,存在 1条涉及 3号染色体断裂重排的标记染色体 +(?∷ 3p2 4→3qter) ,断裂点发生于转移相关基因 RAB5 A的染色体区域。结论 高转移肺腺癌细胞系 Anip973中 3号染色体上 RAB5 A基因区 3p2 4的断裂重排与该基因的高表达一致。