苦参碱对白血病细胞癌基因和细胞周期调控蛋白表达的影响

目的：探讨在苦参碱诱导下，白血病细胞株Ｋ５６２增殖和分化时相关癌基因及细胞周期调控蛋白表达的改变及意义。方法：应用分子生物学 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ和 Ｄｏｔ Ｂｌｏｔ杂交技术检测人红白血病细胞株 Ｋ５６２在苦参碱作用后的ｃ－ｍｙｃ、Ｎ－ｒａｓ 及 ｐ５３ ｍＲＮＡ表达；同时用 Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ－ＥＣＬ分析苦参碱作用前、后２４、４８、７２，小时Ｋ５６２ 细胞ＣｙｃｌｉｎＤ１，ＣｙｃｌｉｎＥ，Ｃｄｋ２，Ｃｄｋ５的不同表达水平。结果：在增殖的 Ｋ５６２细胞（培养４８小时）中，伴随着 ＤＮＡ合成增加，ＣｙｃｌｉｎＥ和 Ｃｄｋ２保持高表达；而在苦参碱作用２４小时分化启动的细胞中，随着ＤＮＡ合成减少，Ｎ－ｒａｓ、ｐ５３ｍＲＮＡ表达增强； ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ表达明显受抑；同时 ＣｙｃｌｉｎＤ， Ｃｄｋ５表达增强。结论：苦参碱抑制 Ｋ５６２细胞增殖并诱导分化可能与相关癌基因表达和 ＣｙｃｌｉｎＤ１／Ｃｄｋ５，ＣｙｃｌｉｎＥ／Ｃｄｋ２不同表达有关。

用双向电泳分析日本血吸虫雌虫和雄虫抗原

目的 研究日本血吸虫雌虫和雄虫的可溶性抗原。方法 用 SDS- PAGE和双向电泳方法 ,对日本血吸虫两性成虫全虫可溶性抗原进行分析。结果 用 SDS- PAGE分析日本血吸虫雌虫和雄虫分别有 10条和 17条蛋白带 ,其中有 9条相同蛋白带 ;用双向电泳分析雌雄虫体多肽斑点分别有 111个 (主多肽斑点有 19个 )和 132个 (主多肽斑点有 2 8个 ) ,分子量范围在 2 7k D～ >10 0 k D,而p I范围为 3.2 0～ 8.15 ,两性有 35个相同多肽点 ,但其多肽含量略有差异。结论 日本血吸虫雌、雄成虫存在许多共同蛋白带和多肽斑点 (其中有些蛋白和多肽含量差异明显 ) 。

用聚丙烯酰胺凝胶电泳和双向电泳分析阴道毛滴虫滋养体抗原

目的 研究阴道毛滴虫滋养体可溶性抗原。 方法 用聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)、酶联免疫电转移印迹 (EITB)和双向电泳等方法 ,对阴道毛滴虫滋养体全虫可溶性抗原进行分析。 结果 SDS- PAGE分离出 2 6条蛋白带 ,其中主带 9条 ,分子量 8条为 15～ 6 2 k Da、1条为 97k Da。EITB显示 2 4条带 ,仅在 75 k Da和2 2 k Da处缺如 ,其中主带 8条。双向电泳分离出 43个多肽斑点 ,多分布于 PI3.6 5～ 5 .84,分子量为 2 7～ >10 0k Da,其中有 9个主要多肽斑点。 结论 阴道毛滴虫滋养体可溶性抗原 2 6条蛋白带中 ,有 8条蛋白含量较高、免疫学反应较强。在 43个多肽斑点中有 9个多肽含量明显较高。

甲型流感病毒H5N1的系统进化分析简评

美国加州大学Robert G.Wallace,Richard H.Lathrop和Walter M.Fitch等人在2007年3月7日电子版(13日正式出版)的PNAS上发表文章,题目是:甲型流感病毒H5N1的系统进化地理学统计分析学(Astatistical phylogeography of influenza A H5N1)。该文发表以后,国内外流感病毒学者对此发生浓厚的兴趣,提出了一些对该文的评论。采用先进的生物信息学、数学模型等跨学科的先进方法进行病毒学的研究,特别是用来指导传染病预防和控制,是值得提倡和鼓励的,我国科学家应当认真学习;但是任何采用生物信息学方法做出的预测,还须经过病毒学实验研究的验证。以下发表的评述,仅供参考。百家争鸣才有利于科学的进步。

苦参碱对K562细胞株端粒酶活性和细胞周期的影响

目的为寻找新的肿瘤细胞诱导分化剂，探讨了苦参碱对Ｋ５６２细胞的诱导分化作用及其机制。方法采用ＰＣＲＥｌｉｓａ方法检测苦参碱作用前后端粒酶活性的改变，以流示细胞仪分析细胞周期的改变。结果苦参碱作用后的Ｋ５６２细胞，其端粒酶活性明显受抑，且细胞周期明显改变，Ｓ期细胞数显著降低。结论苦参碱对Ｋ５６２细胞有诱导分化作用，其机制可能与抑制端粒酶活性、阻止细胞周期的进程有关。

Cdx1和Cdx2基因表达异常与先天性结肠性肠炎的关系

目的 结肠炎是先天性巨结肠患儿常见的并发症,组织学研究表明巨结肠性肠炎患儿肠粘膜内的内分泌细胞减少和粘膜内分泌型 IgA不足。而Cdx1和Cdx2基因调控结肠粘膜上皮细胞的分化和增殖,本研究的目的是明确Cdx1和Cdx2基因表达与先天性巨结肠性肠炎之间的关系。方法 采用半定量RT-PCR反应和原位杂交方法,11例先天性巨结肠患儿(年龄1～30个月,4例合并结肠炎)的无神经节细胞段、移行段和扩张段的手术切除标本为病例组,12例年龄相符(1～30个月)的非巨结肠患儿的远端结肠标本为对照组,观察Cdx1和Cdx2基因在其中的表达情况。结果Cdx1和Cdx2基因在对比组和先天性巨结肠的结肠粘膜上皮细胞均有表达,但是此二基因在先天性巨结肠性肠炎患儿的标本中表达明显减弱。结论 本研究结果表明Cdx1和Cdx2基因表达减弱与先天性巨结肠性肠炎的病因密切相关。