鹅不食草中倍半萜内酯成分及其抗肿瘤活性的研究

目的从鹅不食草Centipeda minima(L.)A. Br. et Aschers.中分离鉴定具有抗肿瘤活性的倍半萜内酯成分,并评价其抗肿瘤生物活性。方法利用95%乙醇提取,应用正、反相硅胶(RP-C18)柱层析,葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)柱层析,制备高效液相等进行分离纯化;运用1H-NMR、13C-NMR和MS等波谱技术对化合物的结构进行鉴定;采用MTT法测试化合物对肿瘤细胞增殖的抑制作用。结果从鹅不食草中分离得到5个倍半萜内酯化合物,分别鉴定为:短叶老鹳草素(brevilin A)(1)、小堆心菊素C(microhelenin C)(2)、minimolide F(3)、山金车内酯C(arnicolide C)(4)、山金车内酯D(arnicolide D)(5)。化合物1～5对4种肿瘤细胞株[CNE-1(鼻咽癌)、CNE-2(鼻咽癌)、Hela(子宫颈癌)、HepG2(肝癌)]的增殖均有一定的抑制作用,而对正常肝细胞LO2抑制作用较小。其中化合物1、4、5对鼻咽癌细胞CNE-1和CNE-2具有较明显的抑制作用,其IC50值均小于10μmol·L-1,与阳性药物顺铂接近。结论倍半萜内酯化合物是鹅不食草抗肿瘤的活性成分,化合物1、4、5对鼻咽癌细胞抑制作用明显,有望成为潜在的抗肿瘤先导化合物,其作用机制值得进一步探索。

HPLC/UV测定鹅不食草中五种倍半萜内酯成分含量

目的:建立高效液相同时测定鹅不食草中5种倍半萜内酯成分:山金车内酯D、山金车内酯C、minimolideF、小堆心菊素C和短叶老鹳草素的含量测定方法。方法:采用AlltimaTMC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min^-1,检测波长223nm,柱温35℃。结果:在线性范围内5个成分线性良好(r≥0.9999),精密度RSD均小于2%;重现性RSD均小于3%;平均回收率94.09%~106.32%,RSD均小于2%。10批样品中5种成分含量范围为:423.3~1437.2、144.1~498.0、29.8~159.2、66.8~188.8、1290.1~3476.4μg·g^-1。5种成分在不同批次的药材中的含量差异显著,短叶老鹳草素和山金车内酯D的含量较高,可作为鹅不食草质量控制指标性成分。结论:该方法操作简单、准确、灵敏度高、重复性好,对鹅不食草的质量评价与控制具有一定的参考意义。