华蟾素辅助顺铂化疗对H22肝癌小鼠的抑瘤作用及其相关机制研究

为了观察华蟾素对H22肝癌小鼠的抑瘤作用,并探讨其调控机制,取50只昆明小鼠,采用腋窝皮下接种H22腹腔传代细胞建立H22肝癌小鼠模型,随机分为模型组、华蟾素低剂量组、华蟾素高剂量组、顺铂组、顺铂+华蟾素组,分别给予0.01%乙醇溶液、1 mg·kg^-1华蟾素、5 mg·kg^-1华蟾素、5 mg·kg^-1顺铂、5 mg·kg^-1顺铂+5 mg·kg^-1华蟾素干预10 d。干预期间观察各组小鼠一般状况,并比较各组肿瘤质量、抑瘤率、胸腺指数、组织病理学变化、肿瘤细胞凋亡率及肿瘤组织中磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、凋亡相关基因(apoptosis related gene,Fas)、Fas配体(Fas ligand,FasL)mRNA和蛋白及磷酸化Akt(phosphorylated Akt,pAkt)蛋白表达情况。结果表明在建模期间小鼠出现进食量下降、毛色暗淡、精神状态不佳等情况,随时间延长情况逐渐转差;各干预组小鼠精神状态逐渐好转,其中顺铂+华蟾素组改善最为明显。与模型组相比,各干预组肿瘤质量较小(P<0.05);与华蟾素低剂量组相比,华蟾素高剂量组、顺铂组、顺铂+华蟾素组肿瘤质量较小,抑瘤率较高(P<0.05);与华蟾素高剂量组、顺铂组相比,顺铂+华蟾素组肿瘤质量较小,抑瘤率较高(P<0.05)。与模型组相比,华蟾素高剂量组、顺铂+华蟾素组胸腺指数较高,顺铂组较低(P<0.05);与华蟾素低剂量组相比,华蟾素高剂量组胸腺指数较高,顺铂组较低(P<0.05);与华蟾素高剂量组相比,顺铂组胸腺指数较低(P<0.05);与顺铂组相比,顺铂+华蟾素组胸腺指数较高(P<0.05)。病理染色结果显示,模型组肿瘤组织可见大量异质性细胞及核分裂现象,各干预组肿瘤组织内可见细胞碎片、中性粒细胞,呈现弥漫性变性坏死状态,且顺铂+华蟾素组弥漫性坏死现象更为明显。与模型组相比,各干预组肿瘤细胞凋亡率及Fas mRNA和蛋白相对表达量较高,PI3K和FasL mRNA和蛋白相对表达量及pAkt蛋白相对表达量较低(P<0.05);与华蟾素低剂量组相比,华蟾素高剂量组、顺铂组、顺铂+华蟾素组肿瘤细胞凋亡率及Fas mRNA和蛋白相对表达量较高,PI3K和FasL mRNA和蛋白相对表达量及pAkt蛋白相对表达量较低(P<0.05);与华蟾素高剂量组、顺铂组相比,顺铂+华蟾素组肿瘤细胞凋亡率及Fas mRNA和蛋白相对表达量较高,PI3K和FasL mRNA和蛋白相对表达量及pAkt蛋白相对表达量较低(P<0.05)。综上,华蟾素对H22肝癌小鼠有显著抑瘤作用,且能增强小鼠免疫功能、协同增强化疗效果,可能通过调控PI3K/Akt/Fas/FasL信号通路相关基因和蛋白表达发挥作用。