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小鼠多亚型热休克蛋白/肽疫苗联合PD-L1免疫检查点抑制剂的抗肿瘤实验研究 被引量:1
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作者 李浩江 王振勇 +9 位作者 沈师 高超 张彬 王泽昊 眭翔 崔雪梅 袁玫 刘舒云 郭全义 王桂琴 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期278-283,共6页
目的:应用小鼠肉瘤组织制备混合多亚型热休克蛋白/肽疫苗(mHSP/P),联合程序性死亡配体(PD-L1)抑制剂治疗小鼠肉瘤。方法:免疫组织化学染色和Elisa蛋白定量鉴定肉瘤细胞MCA207中的热休克蛋白(HSP70、HSP90、Grp94)的表达。制备蛋白悬液,... 目的:应用小鼠肉瘤组织制备混合多亚型热休克蛋白/肽疫苗(mHSP/P),联合程序性死亡配体(PD-L1)抑制剂治疗小鼠肉瘤。方法:免疫组织化学染色和Elisa蛋白定量鉴定肉瘤细胞MCA207中的热休克蛋白(HSP70、HSP90、Grp94)的表达。制备蛋白悬液,通过蛋白层析技术获取mHSP/P和Grp94/肽肉瘤疫苗(Grp94/P),以Western blot(WB)鉴定。流式细胞术测定细胞毒性作用。Elisa实验测定mHSP/P和Grp94/P刺激产生的干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)。小鼠实验探究肉瘤疫苗对肉瘤生长以及小鼠生存状况的影响。免疫荧光染色MCA207肉瘤细胞表面PD-L1的表达,WB测定IFN-γ对PD-L1表达的影响。动物实验探究PD-L1抑制剂联合mHSP/P对肿瘤的影响。结果:肿瘤组织携带多种亚型的HSP(HSP70、HSP90、Grp94);成功制备肉瘤组织来源的mHSP/P和Grp94/P,Western blot对肿瘤疫苗鉴定并且流式细胞学测定未发现细胞毒性;制备的mHSP/P较Grp94/P刺激产生更多的IFN-γ和TNF-α细胞因子(P<0.05)。肉瘤细胞表面PD-L1的表达随着IFN-γ的介入而增高;动物实验显示PD-L1抑制剂联合mHSP/P提高了免疫反应的抗肿瘤作用(P<0.05)。结论:肿瘤来源的mHSP/P和Grp94/P可以作为肿瘤疫苗在动物实验中使用。mHSP/P比Grp94/P能诱发更强的抗肿瘤免疫反应。IFN-γ刺激肉瘤细胞PD-L1的表达而导致免疫逃逸。PD-L1抑制剂联合mHSP/P提高了抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 mHSP/P Grp94/P 层析 PD-L1免疫检查点抑制剂 IFN-γ IFN-α
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人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架修复山羊膝关节全层软骨缺损的实验研究 被引量:1
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作者 张雨 刘舒云 +8 位作者 郭维民 郝春香 王明杰 苑志国 黄靖香 眭翔 张莉 卢世璧 郭全义 《中国医药生物技术》 2016年第6期502-509,共8页
目的探索人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架构建组织工程软骨,用于修复山羊膝关节负重区全层软骨缺损的可行性。方法从人脐带中分离、扩增培养人脐带间充质干细胞,并进行鉴定;以猪源脱细胞软骨细胞外基质取向支架为... 目的探索人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架构建组织工程软骨,用于修复山羊膝关节负重区全层软骨缺损的可行性。方法从人脐带中分离、扩增培养人脐带间充质干细胞,并进行鉴定;以猪源脱细胞软骨细胞外基质取向支架为组织工程软骨支架载体;在成年山羊膝关节负重区股骨髁处造全层软骨模型;实验分为两组,以人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架修复组为实验组,单纯全层软骨缺损造模作为对照组,每组3只山羊。术后7 d、14 d分别抽取关节液涂片行H&E染色,观察炎症反应。在术后3、6个月后分别处死两组实验动物,取材进行大体形态学观察及评分、组织学染色及评分、软骨特异性基质成分定量检测。结果①关节液涂片H&E染色结果显示,术后两组膝关节炎症反应未见明显差异。②大体形态学观察及组织学染色结果均证实,实验组修复区再生的关节软骨更加接近天然软骨,且与周边整合良好,获得更好的修复效果。大体形态学及组织学评分均证实,实验组的评分均要明显高于对照组(P<0.05);③糖胺多糖定量检测结果显示实验组明显高于对照组(P<0.05)。结论人脐带间充质干细胞复合脱细胞软骨细胞外基质取向支架构建组织工程软骨,可用于修复山羊膝关节负重区全层软骨缺损,是未来治疗软骨损伤较有应用前景的方法之一。 展开更多
关键词 充质干细胞 细胞外基质 组织支架 组织工程 软骨 关节
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甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架的制备与表征 被引量:1
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作者 袁勋 丁振罡 +7 位作者 付力伟 吴江 郑亚哲 张智超 田广招 眭翔 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第22期3517-3523,共7页
背景:随着组织工程为关节软骨损伤修复这一世界难题带来了新的希望,构建成分仿生的光固化3D打印水凝胶支架对软骨组织工程具有重要意义。目的:通过数字光处理3D打印技术构建成分仿生的甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架,评... 背景:随着组织工程为关节软骨损伤修复这一世界难题带来了新的希望,构建成分仿生的光固化3D打印水凝胶支架对软骨组织工程具有重要意义。目的:通过数字光处理3D打印技术构建成分仿生的甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架,评价其生物相容性。方法:从人脐带中分离提取华通胶组织后进行脱细胞处理,冷冻干燥后磨成粉末,溶于PBS中制备50 g/L的脱细胞华通胶溶液。制备甲基丙烯酰化透明质酸,冻干后溶于PBS中制备50 g/L的甲基丙烯酰化透明质酸溶液。将脱细胞华通胶溶液与甲基丙烯酰化透明质酸溶液以体积比1∶1混合,加入光引发剂后作为生物墨水。通过数字光处理3D打印技术分别制备甲基丙烯酰化透明质酸水凝胶支架(记为HAMA水凝胶支架)与甲基丙烯酰化透明质酸/脱细胞华通胶水凝胶支架(记为HAMA/WJ水凝胶支架),表征支架的微观结构、溶胀性能、生物相容性与促软骨分化性能。结果与结论:①扫描电镜下见两组支架均呈三维立体的网状结构,其中HAMA/WJ水凝胶支架纤维连接更加均匀;两组支架均在10 h内达到溶胀平衡,HAMA/WJ水凝胶支架的平衡溶胀比低于HAMA水凝胶支架(P<0.05)。②CCK-8实验显示相较于HAMA水凝胶支架,HAMA/WJ水凝胶支架可促进骨髓间充质干细胞的增殖;死活染色显示骨髓间充质干细胞在两组支架上生长良好,并且HAMA/WJ水凝胶支架上的细胞立体分布均匀、细胞数量更多;鬼笔环肽染色显示相较于HAMA水凝胶支架,HAMA/WJ水凝胶支架上的骨髓间充质干细胞黏附与铺展更佳。③将骨髓间充质干细胞接种于两组支架后进行成软骨诱导培养,qRT-PCR检测结果显示,HAMA/WJ水凝胶支架组聚集蛋白聚糖、SOX9、Ⅱ型胶原mRNA表达量均高于HAMA水凝胶支架组(P<0.05,P<0.01)。④结果表明,数字光处理3D生物打印HAMA/WJ水凝胶支架可促进骨髓间充质干细胞的增殖、黏附及成软骨分化。 展开更多
关键词 华通胶 甲基丙烯酰化透明质酸 水凝胶 支架 数字光处理3D打印 软骨损伤 骨髓间充质干细胞 组织工程
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基于脱细胞方法制备3D植物肝组织工程支架及表征
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作者 胡婧婧 何松霖 +7 位作者 张大旭 赵烁 史潇楠 李伟龙 叶淑君 王静怡 郭全义 阎丽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第29期4645-4651,共7页
背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜... 背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜苹果分别采用磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠溶液进行脱细胞处理,然后用磷酸盐缓冲液进行脱毒获得处理后的苹果组织和苹果脱细胞支架材料,然后在扫描电镜下观察苹果材料的脱细胞效果。实验从BALB/C小鼠腹股沟脂肪中提取脂肪干细胞,并且通过流式细胞术鉴定其干细胞相关标记物(CD45,CD34,CD73,CD90,CD105)的表达。然后分为无支架对照组和有支架组,在两组中接种等量脂肪干细胞,通过CCK-8、苏木精-伊红染色、鬼笔环肽骨架染色评价该脱细胞支架与脂肪干细胞的生物相容性,在光学显微镜、扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附及生长情况。然后将支架分为非诱导组和成肝诱导组,将脂肪干细胞种植在脱细胞苹果支架上,分别在普通培养基和成肝诱导培养基中培养14 d后进行对比,通过肝细胞标记物(白蛋白、细胞角蛋白18、细胞色素P450家族1亚家族1)进行免疫荧光染色,通过酶联免疫吸附实验来检测白蛋白、甲胎蛋白的分泌情况,并通过扫描电镜观察支架上诱导培养的细胞形态,验证该脱细胞支架材料上肝细胞相关蛋白的表达。最后,实验通过将钴60照射消毒后的苹果脱细胞支架移植于小鼠肝脏表面,28 d后通过大体观及苏木精-伊红染色观察该支架的降解情况。结果与结论:①扫描电镜结果显示,脱细胞后的苹果支架材料具有约100μm大小的孔隙结构,不存在残余细胞。②通过流式细胞学鉴定,提取培养的细胞为脂肪间充质干细胞。③CCK-8结果表明,所制备的苹果组织脱细胞支架材料无细胞毒性;苏木精-伊红染色和鬼笔环肽骨架染色观察到脂肪间充质干细胞能够在苹果组织脱细胞支架上黏附和聚集生长。④免疫荧光染色、酶联免疫吸附实验结果显示,培养在苹果组织脱细胞支架上的脂肪间充质干细胞高表达白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白18及细胞色素P450家族1亚家族1肝脏相关蛋白,说明被诱导分化为了具有肝细胞功能的肝细胞样细胞。⑤干预7 d时植入的苹果脱细胞支架与肝脏融合,部分支架已经降解,干预28 d时苹果脱细胞支架已完全降解,被新生组织替代。⑥结果表明,来源于苹果组织制备的脱细胞支架材料具有良好的生物相容性,可促进脂肪间充质干细胞的增殖、黏附及成肝细胞分化。 展开更多
关键词 植物组织 支架 脱细胞 肝衰竭 脂肪间充质干细胞 组织工程 肝细胞样细胞
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低温沉积3D打印负载基质细胞衍生因子1的分级多孔软骨复合支架 被引量:1
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作者 吴江 殷瀚 +8 位作者 严子能 田广招 丁振罡 袁勋 付力伟 田壮 眭翔 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第30期4776-4782,共7页
背景:基于原位组织工程再生技术的飞速发展,促进体内干细胞募集策略为软骨损伤修复提供了新的方向。目的:通过低温沉积3D打印技术构建负载基质细胞衍生因子1的分级多孔细胞外基质支架。方法:采用化学法制备脱细胞软骨细胞外基质。制备... 背景:基于原位组织工程再生技术的飞速发展,促进体内干细胞募集策略为软骨损伤修复提供了新的方向。目的:通过低温沉积3D打印技术构建负载基质细胞衍生因子1的分级多孔细胞外基质支架。方法:采用化学法制备脱细胞软骨细胞外基质。制备脱细胞软骨细胞外基质匀浆,并加入基质细胞衍生因子1,作为生物墨水,采用低温沉积3D打印技术构建分级多孔细胞外基质支架,通过大体观及扫描电镜观察支架的微观结构,通过CCK-8、死活染色及鬼笔环肽骨架染色评价支架的生物相容性,检测支架的体外缓释性能,通过Transwell实验检测支架对骨髓间充质干细胞迁移的影响。结果与结论:①扫描电镜显示,打印的细胞外基质支架呈现分级多孔的结构,孔径分布均匀,纤维交错排列,孔与孔之间相互贯通;②CCK-8实验显示,细胞外基质支架无明显的细胞毒性;死活染色显示,骨髓间充质干细胞能够很好地在细胞外基质支架上生长;鬼笔环肽骨架染色显示,骨髓间充质干细胞在细胞外基质支架上能够很好地铺展开,呈梭形;③细胞外基质支架具有良好的缓释性能,在前7 d内较快速地释放基质细胞衍生因子1,累计释放率达约60%,1-4周释放细胞因子速度逐渐减缓,4-6周的释放规律类似于零级释放动力学,42 d累计释放率约达80%,并且仍有缓慢释放的趋势;④Transwell迁移实验显示,基质细胞衍生因子1可提升细胞外基质支架募集干细胞的能力;⑤结果表明,基质细胞衍生因子1可提高低温沉积3D打印细胞外基质支架募集骨髓间充质干细胞的能力。 展开更多
关键词 细胞外基质 支架 基质细胞衍生因子1 低温沉积3D打印 软骨损伤 骨髓间充质干细胞 迁移
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四氧化三锰纳米颗粒抗氧化损伤保护骨髓间充质干细胞的伸展功能 被引量:1
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作者 田沁玉 田兴贵 +4 位作者 田壮 眭翔 刘舒云 鲁晓波 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第6期821-826,共6页
背景:由于干细胞移植微环境原位产生的大量自由基造成移植干细胞伸展功能受损,进而降低细胞的移植存活率。近10年来,大量抗氧化应激纳米酶研究的出现为保护干细胞伸展功能提供了新的方法。四氧化三锰(Mn_(3)O_(4))作为一种新型纳米酶,... 背景:由于干细胞移植微环境原位产生的大量自由基造成移植干细胞伸展功能受损,进而降低细胞的移植存活率。近10年来,大量抗氧化应激纳米酶研究的出现为保护干细胞伸展功能提供了新的方法。四氧化三锰(Mn_(3)O_(4))作为一种新型纳米酶,含有的锰作为人体微量元素之一,具有抗氧化应激性能以及生物可降解性,可作为一种保护干细胞伸展功能的新型纳米材料。目的:制备纳米酶四氧化三锰颗粒,检测其在氧化应激环境中对骨髓间充质干细胞抗氧化作用和伸展功能的影响。方法:水热法制备四氧化三锰纳米颗粒,用扫描电子显微镜、X射线衍射分别表征材料形貌和结构;动态光散射仪检测模拟人体环境下的颗粒粒径和Zeta电位;在中性环境下检测四氧化三锰的抗氧化能力,使用CCK-8和活-死染色法检测四氧化三锰对骨髓间充质干细胞的生物毒性;过氧化氢诱导骨髓间充质干细胞氧化应激,检测四氧化三锰对骨髓间充质干细胞在氧化应激状态下抗氧化能力及伸展能力的影响。结果与结论:①扫描电子显微镜和X射线衍射测试结果显示该材料为平均直径70-80 nm的四氧化三锰纳米颗粒;动态光散射仪检测显示,在模拟人体缓冲环境下的四氧化三锰的粒径约为100 nm,Zeta电位约为+20 mV,抗氧化性能实验显示四氧化三锰具有一定的抗氧化能力;②CCK-8、活-死染色、活性氧清除实验显示四氧化三锰在40 mg/L的质量浓度下对骨髓间充质干细胞无生物毒性且有一定的活性氧清除能力;③细胞伸展实验显示过氧化氢对骨髓间充质干细胞的伸展功能具有明显抑制作用,而四氧化三锰加入细胞培养微环境后,细胞伸展面积较对照组无明显统计学差异(P>0.05),且单独使用四氧化三锰不会抑制骨髓间充质干细胞的伸展功能(P>0.05);④结果表明,在细胞微环境中加入四氧化三锰纳米颗粒能够抵抗氧化应激,并且对骨髓间充质干细胞的伸展功能具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 四氧化三锰 纳米颗粒 纳米酶 抗氧化应激 活性氧清除 干细胞移植 干细胞伸展 干细胞保护
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双能CT的虚拟去钙技术对非创伤性股骨头坏死周围骨髓水肿的检出价值
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作者 杨淑辉 李天然 +5 位作者 卢晶 武艳斌 张鹏举 尚柳彤 钟燕 杨本涛 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期533-539,共7页
目的以MRI为参考标准,评价双能CT的虚拟去钙(VNCa)技术对非创伤性股骨头坏死(ONFH)周围骨髓水肿(BME)的检出价值。方法前瞻性纳入2022年10月至2023年5月解放军总医院第四医学中心非创伤性ONFH患者,分析其MRI及双能CT图像。以MRI图像的... 目的以MRI为参考标准,评价双能CT的虚拟去钙(VNCa)技术对非创伤性股骨头坏死(ONFH)周围骨髓水肿(BME)的检出价值。方法前瞻性纳入2022年10月至2023年5月解放军总医院第四医学中心非创伤性ONFH患者,分析其MRI及双能CT图像。以MRI图像的评价结果作为参考标准,计算两名放射科医师在VNCa彩色编码图像上主观判断ONFH周围BME的诊断效能。比较VNCa图像和MRI显示的BME范围的差异,并比较正常骨髓和BME的传统CT值及VNCa CT值的差异。对于差异有统计学意义的CT值勾画受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),找出区分正常骨髓和BME的阈值,评价诊断效能。结果共纳入ONFH患者30例,男24例,女6例,年龄(39±12)岁;其中双侧髋关节18例,单侧髋关节12例,共48个髋关节,其中34个髋关节在MRI上显示BME。两名医师在VNCa彩色编码图上主观检出BME的灵敏度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确度分别为97.1%(33/34)和97.1%(33/34)、92.9%(13/14)和71.4%(10/14)、97.1%(33/34)和89.2%(33/37)、92.9%(13/14)和90.9%(10/11)、95.8%(46/48)和89.6%(43/48),差异均无统计学意义(均P>0.05)。VNCa彩色编码图像与MRI对BME范围的显示差异无统计学意义(P=1.160)。两名放射科医师测量的传统CT值和VNCa CT值的一致性较好,组内相关系数(ICC)分别为0.948(95%CI:0.908~0.971)、0.982(95%CI:0.969~0.990)。正常骨髓的传统CT值为(400.7±82.8)HU,BME的传统CT值为(443.7±65.7)HU,差异无统计学意义(P=0.062);正常骨髓的VNCa CT值为(-103.1±27.8)HU,BME的VNCa CT值为(-32.9±25.7)HU,差异有统计学意义(P<0.001)。基于VNCa CT值区分正常骨髓和BME的AUC为0.958(95%CI:0.857~0.995),最佳截断值为-74.5 HU,当VNCa CT值>-74.5 HU时,诊断BME的灵敏度、特异度、PPV、NPV和准确度分别为97.1%、92.9%、97.1%、92.9%和95.8%。结论双能CT的VNCa技术对非创伤性ONFH周围BME的检出效能较高,且能准确显示BME的范围。 展开更多
关键词 股骨头坏死 骨髓水肿 虚拟去钙 双能CT
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逆行螺钉置入固定骨盆耻骨上支骨折的数字解剖学参数 被引量:8
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作者 孟昊业 汪爱媛 +4 位作者 许文静 王玉 郭全义 彭江 卢世璧 《解放军医学院学报》 CAS 2018年第6期520-522,550,共4页
目的对骨盆3D模型进行数字螺钉模拟及置入,以获取逆行螺钉在耻骨联合下角入钉时的最佳通道参数,为临床安全置入螺钉固定骨盆耻骨上支骨折提供理论依据。方法随机收集解放军总医院CT室于2016年7月-2017年9月归档的50例非骨盆骨折患者的C... 目的对骨盆3D模型进行数字螺钉模拟及置入,以获取逆行螺钉在耻骨联合下角入钉时的最佳通道参数,为临床安全置入螺钉固定骨盆耻骨上支骨折提供理论依据。方法随机收集解放军总医院CT室于2016年7月-2017年9月归档的50例非骨盆骨折患者的CT图像,导入MIMICS软件重建骨盆3D模型。分别用数字螺钉进行模拟置入,从耻骨结合处开始测量逆行钉道的直径和钉道长度以及钉道与矢状面和冠状面的夹角。结果男性最狭窄区平均直径为(7.54±1.02)mm;女性最狭窄区平均直径为(6.23±1.61)mm;以φ4.5 mm数字螺钉模拟置入时,样本中钉道与矢状面、冠状面和横截面的平均夹角:男性[(51.10±3.26)°、(8.24±1.33)°、(39.47±2.58)°],女性[(53.44±3.78)°、(8.45±2.15)°、(35.26±4.76)°]。结论根据Nakatani骨折分型,当耻骨上支骨折发生在Ⅰ区时,以耻骨联合下角作为穿针点,参考上述夹角可以获得内侧骨折部分足够的螺钉通道长度。 展开更多
关键词 耻骨上支骨折 逆行螺钉 CT三维重建 数字解剖
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改善骨髓间充质干细胞迁移归巢方法的研究进展 被引量:5
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作者 杜春彦 戴鑫 +5 位作者 冯泽国 郭全义 杨静 张娜 余军 张卫东 《解放军医学院学报》 CAS 2017年第2期167-170,共4页
骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,已有研究证实BMSCs移植可治疗多种疾病,并取得理想结果。然而,当前研究表明移植后的BMSCs仅有少量能到达并停留在靶组织,限制了BM... 骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,已有研究证实BMSCs移植可治疗多种疾病,并取得理想结果。然而,当前研究表明移植后的BMSCs仅有少量能到达并停留在靶组织,限制了BMSCs的治疗效果。本文主要对当前研究中提高BMSCs的迁移及归巢效应的策略进行综述,旨在为BMSCs的临床应用提供理论依据。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 迁移 归巢
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重组人脂联素对SD大鼠胫骨骨折愈合过程的影响 被引量:2
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作者 王洋 王良宸 +5 位作者 万丽娟 张宇轩 廖思达 孟昊业 李春霖 龚燕平 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2021年第2期197-201,206,共6页
背景脂联素是血清中最普遍的脂肪因子,可以影响骨形成和骨吸收。而脂联素能否促进骨折愈合仍未确定。目的研究重组人脂联素对SD大鼠胫骨闭合性骨折愈合的影响。方法使用2月龄SD雄性大鼠24只,体质量约200 g,采用骨折造模器制作SD大鼠胫... 背景脂联素是血清中最普遍的脂肪因子,可以影响骨形成和骨吸收。而脂联素能否促进骨折愈合仍未确定。目的研究重组人脂联素对SD大鼠胫骨闭合性骨折愈合的影响。方法使用2月龄SD雄性大鼠24只,体质量约200 g,采用骨折造模器制作SD大鼠胫骨骨折模型。造模成功后,将大鼠随机分为3组(每组n=8),并即刻局部注射0.5 mL药物1次,治疗1组注射脂联素剂量为1 mg/kg、治疗2组注射脂联素剂量为2 mg/kg,对照组注射等量0.9%氯化钠注射液。在造模成功后第6周时处死大鼠并取出双侧胫骨,通过HE染色观察骨痂结构,Masson染色评价骨痂成熟度,免疫荧光染色观察成骨相关因子表达,micro-CT检测骨痂微结构评价脂联素对SD大鼠胫骨骨折愈合的影响。结果骨折后6周时HE染色显示:治疗组骨痂明显增厚,板层骨形成均优于对照组。Masson染色显示:治疗组大鼠胫骨骨痂处胶原蛋白更多,骨痂成熟度优于对照组。免疫荧光染色显示:脂联素1 mg/kg组和2 mg/kg组在骨膜处、骨陷窝和生发层处的促成骨因子骨钙素(osteocalcin,OCN)表达量(0.61%±0.21%和0.44%±0.17%vs 0.27%±0.17%)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达量(0.85%±0.62%和0.70%±0.34%vs 0.35%±0.15%)均高于对照组(P<0.05)。micro-CT分析显示:脂联素1 mg/kg治疗组骨痂处骨体积分数(BV/TV)(53.76±7.89 vs 26.37±4.32)%、骨小梁厚度(Tb.Th)[(363.9±51.45)μm vs(269.6±36.80)μm]、骨小梁数量(Tb.N)[(15.68±2.11)/cm vs(10.51±1.49)/cm]和骨小梁分离度(Tb.Sp)[(344.6±98.79)μm vs(604.3±78.27)μm]均优于对照组(P<0.05)。脂联素2 mg/kg治疗组骨痂处BV/TV 45.10%±5.45%、Tb.N(14.4±1.83)/cm和Tb.Sp(436.1±63.75)μm也优于对照组(P<0.05),骨小梁厚度与对照组比较,差异无统计学意义。脂联素1 mg/kg组与2 mg/kg组各指标差异无统计学意义。结论脂联素可以促进SD大鼠的骨痂生长,骨微结构重建,促进成骨因子表达,缩短骨折愈合时间。 展开更多
关键词 脂联素 骨折 骨微结构 骨折愈合 大鼠
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骨软骨一体化仿生支架的研究现状与展望 被引量:5
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作者 张学亮 刘舒云 +8 位作者 郭维民 张雨 陈明学 荆晓光 张增增 张彬 沈师 李建伟 郭全义 《中国医药生物技术》 2017年第4期350-355,共6页
关节软骨在日常关节活动中发挥着重要的作用,而随着社会人口老龄化所导致的退行性软骨损伤与年轻患者不恰当的运动带来的运动损伤等,使得关节软骨损伤的发病率在不断地上升,且损伤患者也渐趋于年轻化。关节软骨虽有其相应的代谢活动,但... 关节软骨在日常关节活动中发挥着重要的作用,而随着社会人口老龄化所导致的退行性软骨损伤与年轻患者不恰当的运动带来的运动损伤等,使得关节软骨损伤的发病率在不断地上升,且损伤患者也渐趋于年轻化。关节软骨虽有其相应的代谢活动,但因其缺乏神经、血管及淋巴组织,软骨一旦破坏便难以自我恢复与再生。如图1所示,常见的关节软骨损伤中, 展开更多
关键词 关节软骨损伤 仿生支架 骨软骨 支架材料 骨层 透明软骨 组织工程 软骨细胞 软骨支架 细胞外基质
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CD146阳性亚群有作为软骨组织工程种子细胞的应用潜力
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作者 眭翔 田广招 +3 位作者 杨振 李旭 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第19期2997-3003,共7页
背景:再生医学的发展、组织工程技术的出现为软骨缺损重建提供了新的解决思路。在组织工程中,间充质干细胞是应用广泛的种子细胞,然而干细胞作为一个异质性的细胞群体其不同亚群发挥着不同的功能。因此,应用间充质干细胞关键功能亚群进... 背景:再生医学的发展、组织工程技术的出现为软骨缺损重建提供了新的解决思路。在组织工程中,间充质干细胞是应用广泛的种子细胞,然而干细胞作为一个异质性的细胞群体其不同亚群发挥着不同的功能。因此,应用间充质干细胞关键功能亚群进行软骨修复具有广泛应用前景。目的:从人脂肪间充质干细胞中分离出CD146阳性亚群细胞,验证其生物学特性及其作为软骨组织工程种子细胞的潜力。方法:人脂肪间充质干细胞由浙江金时代生物技术有限公司提供,通过流式细胞术对人脂肪间充质干细胞表面标志物进行鉴定,应用免疫磁珠分选方法从人脂肪间充质干细胞中分选出CD146阳性表达的细胞亚群。通过基因芯片检测技术及生物信息学分析技术揭示2种细胞的分子特性;体外诱导2种细胞成软骨分化并进行鉴定;冻存复苏前后检测2种细胞的细胞活性及凋亡情况。结果与结论:①人脂肪间充质干细胞表达高水平干细胞相关标志物CD73、CD90,不表达造血干细胞相关标志物CD34、CD45、HLA-DR;②生物信息分析结果表明CD146阳性亚群细胞与脂肪间充质干细胞相比在炎症通路及骨骼肌肉系统疾病有不同功能;③CD146阳性亚群细胞能够成球软骨分化,并且其成软骨分化能力要优于人脂肪间充质干细胞;④CD146阳性亚群细胞复苏后凋亡情况和活性均要优于人脂肪间充质干细胞;⑤结果表明,CD146阳性亚群细胞具有良好的成软骨分化潜力,是一种具有前景的软骨组织工程种子细胞。 展开更多
关键词 软骨损伤 脂肪间充质干细胞 CD146阳性亚群细胞 基因芯片 生物信息学 成软骨分化
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共培养系统在软骨组织工程中的应用和发展
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作者 张雨 刘舒云 +5 位作者 郭维民 郝春香 王明杰 鹿亮 卢世壁 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第12期1926-1932,共7页
背景:近年来大量的研究证明,共培养应用到软骨组织工程中能够成功构建具有更好生物学特性的组织工程软骨。目的:通过对共培养概念的提出及共培养系统中种子细胞来源、细胞混合比率、共培养空间模式及生物材料各方面分别进行整理和深入阐... 背景:近年来大量的研究证明,共培养应用到软骨组织工程中能够成功构建具有更好生物学特性的组织工程软骨。目的:通过对共培养概念的提出及共培养系统中种子细胞来源、细胞混合比率、共培养空间模式及生物材料各方面分别进行整理和深入阐述,归纳分析各因素对组织工程软骨生物学特性的效应,展望未来共培养系统在组织工程软骨研究中的发展方向。方法:第一作者检索1976年1月至2016年5月Pub Med数据库、Web of Science数据库和中国知网中的相关文献,检索关键词为"Co-culture,Co-culture systems;articular cartilage,chondrocytes,mesenchymal stem cells;tissue engineering,articular cartilage tissue engineering;共培养,共培养系统;关节软骨,软骨细胞,间充质干细胞;组织工程,软骨组织工程"。最后纳入文献共计60篇,中文1篇,英文59篇。结果与结论:(1)共培养强调了细胞处理过程中生物微环境的重要性,即在体外为细胞生长提供物理-化学-生物三位一体的刺激因素;(2)在软骨组织工程中,共培养很好地维持了软骨细胞的活性和天然细胞表型,能够诱导具有多项分化潜能的间充质干细胞分化成软骨。另外,为软骨组织工程软骨细胞的来源受限问题和骨软骨复合伤的治疗带来新的途径;(3)但是共培养中细胞间相互作用的具体机制仍然有待进一步研究,从而为优化共培养系统培养条件提供有力依据,以更好地应用到软骨组织工程中构建优良的组织工程软骨组织。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织工程 共培养 软骨细胞 间充质干细胞 生物材料 软骨组织工程 国家自然科学基金
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早中期股骨头坏死样本的骨微结构分析 被引量:6
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作者 李获 孟昊业 +9 位作者 马海洋 高健明 廖思达 赵军 王鹏 黄波 王皓 赵金娟 鲁晓波 彭江 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2021年第2期189-196,共8页
背景股骨头坏死患者常处于青壮年,如果不及时治疗,会快速进展,发生股骨头的塌陷,严重影响工作生活,最终需要接受全髋关节置换。目的观察早期股骨头坏死标本不同区域微观结构,研究其内部结构变化规律,为早期股骨头坏死的治疗提供指导。... 背景股骨头坏死患者常处于青壮年,如果不及时治疗,会快速进展,发生股骨头的塌陷,严重影响工作生活,最终需要接受全髋关节置换。目的观察早期股骨头坏死标本不同区域微观结构,研究其内部结构变化规律,为早期股骨头坏死的治疗提供指导。方法收集2019年3月-2020年1月因股骨头坏死于解放军总医院第一医学中心行全髋关节置换术患者的10个股骨头标本,其中女性5例,男性5例,年龄41~66岁,平均52岁。术前起病时间3~24个月,平均9.5个月。根据改良的国际骨循环研究学会(ARCO)分期标准,放射学分期均为Ⅱ期。将骨坏死标本沿冠状位切成厚约2 mm切片,采用micro-CT、高精度X线检查、病理学等方法研究股骨头坏死不同区域内部结构变化规律。结果通过micro-CT及病理切片染色发现早中期股骨头坏死标本软骨下骨正常的屏障作用减退或消失,部分区域有新生血管侵入,坏死区骨小梁结构完整性消失,骨小梁表面新生骨较少,且存在大量空骨陷窝。硬化区骨小梁数量和厚度均明显增加,新生类骨质较多,硬化区成骨相对于坏死区和正常区更为活跃。骨计量参数统计分析显示硬化区骨矿密度(bone mineral density,BMD)(mg/cc)(202.83±38.95 vs 79.00±24.50和102.12±17.44)、骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)(50.35%±7.40%vs 29.14%±8.80%和33.68%±5.70%)相对于坏死区和正常区明显增加(P均<0.05)。同时坏死修复反应区血管面积也较坏死区和正常区明显增加(P<0.05)。结论早中期股骨头坏死已发生软骨下骨屏障作用减退。坏死区保留死骨,改变成骨方式,对于早中期骨坏死的治疗及塌陷的预防具有积极意义。 展开更多
关键词 股骨头坏死 显微CT 病理 新生血管 骨小梁结构
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3D生物打印负载转化生长因子β3的软骨复合支架 被引量:4
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作者 杨振 李浩 +11 位作者 付力伟 高仓健 姜双鹏 王福鑫 苑志国 孙志强 查康康 田广招 曹福洋 眭翔 刘舒云 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第34期5445-5452,共8页
背景:通过募集内源性干细胞原位再生软骨损伤的治疗策略,是未来软骨组织工程研究的新方向。目的:构建既能募集干细胞又能促进其黏附和增殖,且有利于新生组织成熟的组织工程软骨复合支架。方法:将脱细胞软骨细胞外基质(extracellular mat... 背景:通过募集内源性干细胞原位再生软骨损伤的治疗策略,是未来软骨组织工程研究的新方向。目的:构建既能募集干细胞又能促进其黏附和增殖,且有利于新生组织成熟的组织工程软骨复合支架。方法:将脱细胞软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)与甲基丙烯酸酯化明胶(methacrylated gelatin,GelMA)混合配制光敏性生物墨水,利用3D生物打印技术分别制备单纯聚己内酯[poly(Ɛ-caprolactone),PCL]支架、PCL/GelMA/ECM支架。将转化生长因子β3(transforming growth factorβ3,TGF-β3)负载于生物墨水中制备PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架,检测其缓释性能。从形态学、组织学、生物化学、生物力学等角度评价PCL/GelMA/ECM支架的物理化学性质。利用CCK-8法检测PCL/GelMA/ECM支架的细胞毒性。将脂肪间充质干细胞接种于PCL/GelMA/ECM支架上,1,4,7 d后,共聚焦显微镜下观察细胞活性,扫描电镜观察细胞黏附。将PCL/GelMA/ECM支架植入SD大鼠皮下,组织学观察炎性细胞浸润与支架降解。利用Transwell小室实验检测PCL/GelMA/ECM支架、PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架对脂肪间充质干细胞迁移的影响,以单独培养的细胞为阴性对照。结果与结论:①PCL/GelMA/ECM支架呈现三维立体多孔网状结构,无细胞成分,含有Ⅱ型胶原和糖胺聚糖等软骨特异性成分,支架弹性模量为(14.24±2.44)MPa;②PCL/GelMA/ECM支架无明显的细胞毒性;③脂肪间充质干细胞紧密贴附于PCL/GelMA/ECM支架上,细胞活性良好,可分泌细胞外基质;④PCL/GelMA/ECM支架植入大鼠皮下1周后有轻度急性炎症反应,3周后炎性反应减轻,并可见逐步支架降解;⑤PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架具有良好的缓释性能,可持续释放TGF-β3达60 d;⑥相对于阴性对照组,PCL/GelMA/ECM支架、PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架均可促进脂肪间充质干细胞的迁移,其中以PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架促迁移作用更显著;⑦结果表明,3D打印PCL/GelMA/ECM/TGF-β3支架可促进脂肪间充质干细胞的增殖、黏附与迁移。 展开更多
关键词 材料 支架 转化生长因子Β3 3D生物打印 软骨损伤 脂肪间充质干细胞 招募 迁移
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静电纺丝技术在肩袖损伤修复中的应用 被引量:3
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作者 高仓健 杨振 +8 位作者 刘舒云 李浩 付力伟 赵天元 陈威 廖志垚 李品学 眭翔 郭全义 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第4期637-642,共6页
背景:应用静电纺丝技术制备的纳米纤维结构与天然肌腱组织细胞外基质相似,并具有纳米纤维本身的固有特性。目的:综述各类静电纺丝支架的构成方式及其在肌腱和肩袖组织工程中的应用。方法:通过中国知网、万方、Pub Med、Web of Science... 背景:应用静电纺丝技术制备的纳米纤维结构与天然肌腱组织细胞外基质相似,并具有纳米纤维本身的固有特性。目的:综述各类静电纺丝支架的构成方式及其在肌腱和肩袖组织工程中的应用。方法:通过中国知网、万方、Pub Med、Web of Science数据库进行在线文献检索,检索时间范围为2000-2020年。中、英文关键词为"静电纺丝,纳米纤维,肌腱,肩袖,组织工程;electrospun or electrospinning,nanofibers,tendon,rotator cuff,tissue engineering",纳入与静电纺丝、肩袖、肌腱及组织工程有关的文章,最终对69篇文献进行分析。结果与结论:静电纺丝的支架构建在材料选择、纤维构成及改性与载药上的策略多种多样。天然材料与合成材料各有优势,两种及以上材料的混合电纺能产生独特的性质。非取向纤维具有更好的拉伸长度,取向纤维在弹性模量、断裂强度及生物相容性上均具有优势。改性、载药等手段均能使纳米纤维支架获得特殊的性质,有助于肩袖和肌腱损伤修复。 展开更多
关键词 材料 静电纺丝 纳米纤维 组织工程 肩袖 肌腱 综述
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不同交联密度甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能 被引量:3
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作者 周建 田壮 +9 位作者 田沁玉 罗旭江 彭礼庆 李坤 眭翔 黄靖香 刘舒云 郝利波 郭全义 姚琦 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第16期2493-2499,共7页
背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能... 背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能的影响。方法:配制甲基丙烯酰酯明胶溶液,然后加入脱细胞半月板细胞外基质溶液与LAP溶液,制备预凝胶溶液,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60s,检测3种水凝胶的压缩弹性模量、溶胀倍率与降解性能。将半月板纤维软骨细胞加入预凝胶溶液中,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60 s,检测培养对应时间的细胞活性、形态与聚集。结果与结论:①交联60 s水凝胶的压缩模明显高于交联10,30 s的水凝胶(P<0.05);②交联10 s水凝胶的溶胀倍率明显高于交联30,60 s的水凝胶(P<0.05),交联30,60 s的水凝胶的溶胀倍率比较差异无显著性意义(P>0.05);③随着交联时间的延长,水凝胶的降解时间延长,交联60 s的水凝胶需要80 min完全降解,交联10 s的水凝胶50 min就可以完全降解;④培养24h后,3组水凝胶中的细胞活性均在95%以上,各组之间无差异(P>0.05);⑤培养1 d时,3组水凝胶中的细胞均呈球形且均匀分布;4 d时,3组细胞均开始伸展,交联10 s水凝胶中有较小的细胞团;7 d时,3组细胞树突状伸展更为明显,其中交联10 s水凝胶中形成了较为明显的细胞团;⑥培养1,7,14 d时,交联10 s水凝胶中的细胞活性均在85%以上。培养1 d时,交联10 s水凝胶中的细胞呈球形分布,且分布均匀;培养28 d时,细胞呈树突状伸展,并聚集形成网状结构;⑦结果表明,甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能可通过调整交联密度进行优化。 展开更多
关键词 水凝胶 甲基丙烯酰酯明胶 脱细胞外基质 性能 交联密度 细胞相容性 光交联 半月板
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脱细胞软骨基质对巨噬细胞极化的调控 被引量:2
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作者 田广招 杨振 +6 位作者 查康康 孙志强 李旭 眭翔 黄靖香 郭全义 刘舒云 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第22期3545-3550,共6页
背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注。目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extracellular matrix,DCM)及胃蛋白酶处理脱细胞软骨基质(pepsin t... 背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注。目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extracellular matrix,DCM)及胃蛋白酶处理脱细胞软骨基质(pepsin treated decellularized cartilage extracellular matrix,PDCM)对巨噬细胞表型极化的调控作用。方法:采用物理粉碎、反复冻融及差速离心方法制备猪关节软骨脱细胞软骨基质(DCM),溶解于胃蛋白酶溶液内得到其生物降解产物(PDCM)。将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分5组培养:对照组加入巨噬细胞完全培养基,M1型阳性对照组加入含脂多糖+干扰素γ的完全培养基,M2型阳性对照组加入含白细胞介素4的完全培养基,PDCM组加入含PDCM的完全培养基,胃蛋白酶组加入含胃蛋白酶的完全培养基,培养18 h后进行CD86(M1型巨噬细胞)、CD206(M2型巨噬细胞)免疫荧光染色鉴定。另外将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分6组培养:对照组、M1型阳性对照组、M2型阳性对照组、胃蛋白酶组、DCM涂布组与PDCM涂布组,培养24 h后进行CD86、CD206流式细胞术检测。结果与结论:①免疫荧光结果显示,PDCM组诱导巨噬细胞CD86表达阳性比约为0.13,诱导巨噬细胞CD206表达阳性比约为0.5;②流式细胞术检测结果显示,DCM诱导巨噬细胞表达CD86(20.1%)及CD206(28.8%),PDCM只诱导巨噬细胞表达CD206(23.2%);③结果表明,DCM及其生物降解产物PDCM具有促进巨噬细胞M2型极化的作用。 展开更多
关键词 软骨 材料 组织工程 脱细胞 软骨基质 巨噬细胞极化 巨噬细胞表型
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电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜预防腱周粘连的相关研究 被引量:4
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作者 李鹏昊 刘舒云 +7 位作者 王亚洁 全琦 王玉 汪爱媛 彭江 许文静 卢世璧 郭全义 《中国医药生物技术》 2017年第4期289-296,共8页
目的探讨聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜的结构、成分、亲水性、组织相容性和细胞毒性,以及该膜对鼠L929成纤维细胞黏附和活性的影响,从而明确该电纺膜在预防肌腱断裂后腱周粘连的可行性。方法制备单纯电纺聚乳酸-羟基... 目的探讨聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜的结构、成分、亲水性、组织相容性和细胞毒性,以及该膜对鼠L929成纤维细胞黏附和活性的影响,从而明确该电纺膜在预防肌腱断裂后腱周粘连的可行性。方法制备单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜和电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜。通过扫描电镜、红外光谱、接触角检测分析电纺膜的超微结构、成分以及亲水性能;通过溶血试验、热原试验、致敏试验和MTT法验证电纺膜的组织相容性和细胞毒性;将鼠L929细胞种植在单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜和电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜上,体外培养4 d后进行死/活细胞染色,通过共聚焦显微镜观察比较L929细胞在两组膜上的黏附和活性情况。结果两种电纺膜由纳米级-微米级的纤维丝有序排列,形成致密多孔的网状结构。且溶血试验、热原试验、致敏试验结果均呈阴性。MTT检测发现,L929细胞在电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜的DMEM浸提液组和正常培养液组中的OD570值的差异没有统计学意义(P>0.05);死/活细胞染色提示,鼠L929成纤维细胞在电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜的Ⅰ型胶原-聚己内酯层上第4天的黏附率和生存率显著高于对照组(P<0.05),而L929细胞在单纯电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物膜上的黏附率和生存率显著低于对照组(P<0.05)。结论电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜是由纳米级-微米级有序排列的纤维丝构成的多孔膜片,而且组织相容性良好,无明显细胞毒性。其聚乳酸-羟基乙酸共聚物层可以有效抑制成纤维细胞的黏附和生存,Ⅰ型胶原-聚己内酯层可以促进细胞的黏附和存活。电纺聚乳酸-羟基乙酸共聚物/Ⅰ型胶原-聚己内酯双层膜对预防肌腱断裂后腱周粘连具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 组织粘连 生物相容性材料 胶原I型 肌腱断裂 静电纺丝
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采用Gal抗原缺失鼠评价GGTA1/B4GalNT2/CMAH基因敲除猪软骨组织的免疫原性 被引量:2
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作者 王泽昊 邵安良 +4 位作者 魏利娜 刘舒云 眭翔 徐丽明 郭全义 《解放军医学院学报》 CAS 2019年第6期561-564,共4页
目的比较在Gal抗原缺失小鼠皮下分别植入GGTA1/B4GalNT2/CMAH基因敲除猪软骨组织与野生型猪软骨组织所引起的免疫反应。方法将三基因敲除猪软骨组织(KO组)与野生型猪软骨组织(WT组)分别植入Gal抗原缺失小鼠皮下4周,设立假手术组(con)作... 目的比较在Gal抗原缺失小鼠皮下分别植入GGTA1/B4GalNT2/CMAH基因敲除猪软骨组织与野生型猪软骨组织所引起的免疫反应。方法将三基因敲除猪软骨组织(KO组)与野生型猪软骨组织(WT组)分别植入Gal抗原缺失小鼠皮下4周,设立假手术组(con)作为阴性对照。4周后抽取小鼠血清检测总IgM抗体和抗Gal抗体。结果野生型猪软骨(WT)材料植入组小鼠总IgM含量平均在(0.525±0.224)mg/ml,显著高于阴性对照(Con)组小鼠总IgM平均含量(0.121±0.050)mg/ml(P<0.05),但与三基因敲除猪软骨(KO)组小鼠总IgM平均含量(0.313±0.061)mg/ml无统计学差异。野生型猪软骨组织具有比三基因敲除猪软骨组织组和对照组更高的抗α-Gal IgM水平(P<0.05),而三基因敲除组与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论上述结果表明GGTA1/B4GalNT2/CMAH基因敲除猪软骨组织在体内几乎没有免疫反应,可作为软骨缺损修复材料。 展开更多
关键词 GGTA1/B4GalNT2/CMAH基因敲除猪 Gal抗原缺失小鼠 软骨缺损修复 免疫原性
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