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链霉菌壳聚糖酶的纯化及其酶学性质
被引量:
4
1
作者
杨立红
程仕伟
+3 位作者
冯志彬
周楠楠
孔云红
明永飞
《生物加工过程》
CAS
CSCD
2013年第3期52-58,共7页
分离纯化从烟台近海土壤筛选的链霉菌来源壳聚糖酶,并对其酶学性质进行研究。通过(NH4)2SO4分级沉淀分离得粗酶,透析后经Sephadex G-100柱纯化,得到2种壳聚糖酶(ChA和ChB)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Sephadex G-75凝胶过滤确定ChA的相...
分离纯化从烟台近海土壤筛选的链霉菌来源壳聚糖酶,并对其酶学性质进行研究。通过(NH4)2SO4分级沉淀分离得粗酶,透析后经Sephadex G-100柱纯化,得到2种壳聚糖酶(ChA和ChB)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Sephadex G-75凝胶过滤确定ChA的相对分子质量,研究ChA的最适底物水解条件、热稳定性、水解动力学及金属离子对酶活性影响。结果表明:ChA为单亚基蛋白,相对分子质量为4.16×104,在220和280 nm处呈现两个紫外吸收峰,催化水解壳聚糖的最适pH为5.0~5.5,最适温度为55℃。热稳定性实验表明:30℃温育1 h后酶活为初始酶活的33.3%,40℃温育1 h后酶活为初始酶活的22.2%。ChA的酶促反应初速率为6.2×10-3μmol/(mL.min),Vmax为0.318μmol/(mL.min),Km为1×10-2mg/mL,且对底物表现相对专一性。K+、Na+、Li+、Mg2+、Ca2+、Ba2+Zn2+、Cu2+和Co2+对ChA活力均表现为抑制作用,过渡金属离子Mn2+对酶有激活作用,重金属离子Hg2+、Ag+、Cd2+和Pb2+对酶均有较强的抑制作用。Mn2+和Zn2+的动力学研究表明,Mn2+对酶为混合型激活作用,Zn2+对酶为竞争性抑制作用。
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关键词
酶学性质
壳聚糖酶
分离纯化
链霉菌
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职称材料
产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究
被引量:
6
2
作者
程仕伟
崔海洋
+2 位作者
黄田红
马玉岳
刘进杰
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2013年第3期94-97,104,共5页
从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为:20 g/L葡萄糖,10 g/L胰蛋白胨,3 g/L K2HPO4,3 g/L NaH2PO...
从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为:20 g/L葡萄糖,10 g/L胰蛋白胨,3 g/L K2HPO4,3 g/L NaH2PO4,2 g/L氯化铁,pH 6.5,培养温度32℃,接种量为2%(v/v)。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活性为最高,为72.37 U/mL,其次是β-糖苷酶和微晶纤维素酶。
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关键词
枯草芽孢杆菌
纤维素酶
培养条件
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职称材料
壳聚糖酶产生菌筛选及产酶培养优化
被引量:
2
3
作者
程仕伟
杨立红
+1 位作者
洪波
缪静
《烟台大学学报(自然科学与工程版)》
CAS
2013年第1期53-57,共5页
以胶体壳聚糖为唯一碳源和DNS酶活鉴定法从烟台近海土壤中分离得到一株高产壳聚糖酶菌株,初步鉴定为白色链霉菌.经发酵培养组分与条件优化,获得最佳培养组分(g.L-1):葡萄糖55,壳聚糖0.5,胰蛋白胨1,尿素8,(NH4)2SO42,NH4Cl 1,KH2PO43,FeS...
以胶体壳聚糖为唯一碳源和DNS酶活鉴定法从烟台近海土壤中分离得到一株高产壳聚糖酶菌株,初步鉴定为白色链霉菌.经发酵培养组分与条件优化,获得最佳培养组分(g.L-1):葡萄糖55,壳聚糖0.5,胰蛋白胨1,尿素8,(NH4)2SO42,NH4Cl 1,KH2PO43,FeSO4·7H2O 1,ZnSO4·7H2O 2,CaCl2·6H2O2,MnSO4·H2O2,NaCl2.最适产酶pH 7.0,温度28℃,装液量50 mL,接种量2%.优化后菌株培养48 h时产酶量为51.65 U.mL-1.
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关键词
壳聚糖酶
菌株筛选
白色链霉菌
发酵优化
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职称材料
Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养条件研究
被引量:
3
4
作者
王艳华
刘飞飞
程仕伟
《食品与药品》
CAS
2012年第2期84-87,共4页
目的优化Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养组分和发酵条件,为后续深入研究提供数据资料。方法优化不同碳源、氮源、金属离子和培养基复配发酵培养组分:优化培养温度、pH、培养时间进一步提升菌株产酶能力。结果最佳利用碳源...
目的优化Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养组分和发酵条件,为后续深入研究提供数据资料。方法优化不同碳源、氮源、金属离子和培养基复配发酵培养组分:优化培养温度、pH、培养时间进一步提升菌株产酶能力。结果最佳利用碳源为甘油,无机氮源比有机氮源更有利于脂肪酶生产,优化培养组分为:10 g/L甘油,10 g/L NH_4Cl,8g/LNa_2HPO_4·12H_2O,2g/L K_2HPO_4,0.5 g/L MnSO_4。最适培养pH 6.0,温度30℃,发酵周期28 h。结论通过前期优化筛选,获得脂肪酶活性达24.16 U/mL,为后续深入优化和代谢调控提供了良好的数据资料。
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关键词
枯草芽胞杆菌
脂肪酶
培养条件
发酵优化
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职称材料
交联纤维素酶聚集体制备及其催化特性研究
被引量:
1
5
作者
程仕伟
梁会会
崔海洋
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2012年第2期81-83,96,共4页
用90%饱和度的硫酸铵盐析沉淀纤维素酶蛋白,将蛋白沉淀用3%戊二醛交联固定制得交联酶聚集体;研究交联酶聚集体的最适反应温度、最适反应pH、酸碱稳定性、热稳定性、批次稳定性。交联酶纤维素酶聚集体的最高比活性为559.2 U/g湿载体,最...
用90%饱和度的硫酸铵盐析沉淀纤维素酶蛋白,将蛋白沉淀用3%戊二醛交联固定制得交联酶聚集体;研究交联酶聚集体的最适反应温度、最适反应pH、酸碱稳定性、热稳定性、批次稳定性。交联酶纤维素酶聚集体的最高比活性为559.2 U/g湿载体,最适反应温度为60℃,最适pH为9.0。交联酶聚集体的热稳定性和pH稳定性均优于游离酶,重复使用10批活性基本稳定。交联纤维素酶聚集体稳定性较好,具有一定的工业应用前景。
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关键词
纤维素酶
交联酶聚集体
无载体固定化
催化性质
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职称材料
题名
链霉菌壳聚糖酶的纯化及其酶学性质
被引量:
4
1
作者
杨立红
程仕伟
冯志彬
周楠楠
孔云红
明永飞
机构
鲁东大学生命科学学院微生物工程系
出处
《生物加工过程》
CAS
CSCD
2013年第3期52-58,共7页
基金
山东省高等学校科技计划(J12LD02)
鲁东大学科研基金(LY20083305)
文摘
分离纯化从烟台近海土壤筛选的链霉菌来源壳聚糖酶,并对其酶学性质进行研究。通过(NH4)2SO4分级沉淀分离得粗酶,透析后经Sephadex G-100柱纯化,得到2种壳聚糖酶(ChA和ChB)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Sephadex G-75凝胶过滤确定ChA的相对分子质量,研究ChA的最适底物水解条件、热稳定性、水解动力学及金属离子对酶活性影响。结果表明:ChA为单亚基蛋白,相对分子质量为4.16×104,在220和280 nm处呈现两个紫外吸收峰,催化水解壳聚糖的最适pH为5.0~5.5,最适温度为55℃。热稳定性实验表明:30℃温育1 h后酶活为初始酶活的33.3%,40℃温育1 h后酶活为初始酶活的22.2%。ChA的酶促反应初速率为6.2×10-3μmol/(mL.min),Vmax为0.318μmol/(mL.min),Km为1×10-2mg/mL,且对底物表现相对专一性。K+、Na+、Li+、Mg2+、Ca2+、Ba2+Zn2+、Cu2+和Co2+对ChA活力均表现为抑制作用,过渡金属离子Mn2+对酶有激活作用,重金属离子Hg2+、Ag+、Cd2+和Pb2+对酶均有较强的抑制作用。Mn2+和Zn2+的动力学研究表明,Mn2+对酶为混合型激活作用,Zn2+对酶为竞争性抑制作用。
关键词
酶学性质
壳聚糖酶
分离纯化
链霉菌
Keywords
catalytic property
chitosanase
bioseparation
Streptomyces hygroscopious
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究
被引量:
6
2
作者
程仕伟
崔海洋
黄田红
马玉岳
刘进杰
机构
鲁东大学生命科学学院微生物工程系
烟台恒源
生物
股份有限公司
出处
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2013年第3期94-97,104,共5页
基金
山东省高等学校科技计划项目(J12LD02)
鲁东大学学生创新基金(11y023)
文摘
从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为:20 g/L葡萄糖,10 g/L胰蛋白胨,3 g/L K2HPO4,3 g/L NaH2PO4,2 g/L氯化铁,pH 6.5,培养温度32℃,接种量为2%(v/v)。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活性为最高,为72.37 U/mL,其次是β-糖苷酶和微晶纤维素酶。
关键词
枯草芽孢杆菌
纤维素酶
培养条件
Keywords
Bacillus subtilis
cellulase
culture condition
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
壳聚糖酶产生菌筛选及产酶培养优化
被引量:
2
3
作者
程仕伟
杨立红
洪波
缪静
机构
鲁东大学生命科学学院微生物工程系
出处
《烟台大学学报(自然科学与工程版)》
CAS
2013年第1期53-57,共5页
基金
山东省高等学校科技计划项目(J12LD02)
鲁东大学科研基金资助项目(LY20083305)
文摘
以胶体壳聚糖为唯一碳源和DNS酶活鉴定法从烟台近海土壤中分离得到一株高产壳聚糖酶菌株,初步鉴定为白色链霉菌.经发酵培养组分与条件优化,获得最佳培养组分(g.L-1):葡萄糖55,壳聚糖0.5,胰蛋白胨1,尿素8,(NH4)2SO42,NH4Cl 1,KH2PO43,FeSO4·7H2O 1,ZnSO4·7H2O 2,CaCl2·6H2O2,MnSO4·H2O2,NaCl2.最适产酶pH 7.0,温度28℃,装液量50 mL,接种量2%.优化后菌株培养48 h时产酶量为51.65 U.mL-1.
关键词
壳聚糖酶
菌株筛选
白色链霉菌
发酵优化
Keywords
chitosanase
strain screening
Streptomyces albus
fermentation optimization
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养条件研究
被引量:
3
4
作者
王艳华
刘飞飞
程仕伟
机构
鲁东大学生命科学学院微生物工程系
出处
《食品与药品》
CAS
2012年第2期84-87,共4页
文摘
目的优化Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养组分和发酵条件,为后续深入研究提供数据资料。方法优化不同碳源、氮源、金属离子和培养基复配发酵培养组分:优化培养温度、pH、培养时间进一步提升菌株产酶能力。结果最佳利用碳源为甘油,无机氮源比有机氮源更有利于脂肪酶生产,优化培养组分为:10 g/L甘油,10 g/L NH_4Cl,8g/LNa_2HPO_4·12H_2O,2g/L K_2HPO_4,0.5 g/L MnSO_4。最适培养pH 6.0,温度30℃,发酵周期28 h。结论通过前期优化筛选,获得脂肪酶活性达24.16 U/mL,为后续深入优化和代谢调控提供了良好的数据资料。
关键词
枯草芽胞杆菌
脂肪酶
培养条件
发酵优化
Keywords
Bacillus subtilis
lipase
culture condition
fermentation and optimization
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
交联纤维素酶聚集体制备及其催化特性研究
被引量:
1
5
作者
程仕伟
梁会会
崔海洋
机构
鲁东大学生命科学学院微生物工程系
出处
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2012年第2期81-83,96,共4页
基金
鲁东大学科研基金项目(LY20083305)
文摘
用90%饱和度的硫酸铵盐析沉淀纤维素酶蛋白,将蛋白沉淀用3%戊二醛交联固定制得交联酶聚集体;研究交联酶聚集体的最适反应温度、最适反应pH、酸碱稳定性、热稳定性、批次稳定性。交联酶纤维素酶聚集体的最高比活性为559.2 U/g湿载体,最适反应温度为60℃,最适pH为9.0。交联酶聚集体的热稳定性和pH稳定性均优于游离酶,重复使用10批活性基本稳定。交联纤维素酶聚集体稳定性较好,具有一定的工业应用前景。
关键词
纤维素酶
交联酶聚集体
无载体固定化
催化性质
Keywords
cellulase
cross-linking cellulase aggregation
free-carrier immobilization
catalytic property
分类号
Q814.2 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
链霉菌壳聚糖酶的纯化及其酶学性质
杨立红
程仕伟
冯志彬
周楠楠
孔云红
明永飞
《生物加工过程》
CAS
CSCD
2013
4
下载PDF
职称材料
2
产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究
程仕伟
崔海洋
黄田红
马玉岳
刘进杰
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2013
6
下载PDF
职称材料
3
壳聚糖酶产生菌筛选及产酶培养优化
程仕伟
杨立红
洪波
缪静
《烟台大学学报(自然科学与工程版)》
CAS
2013
2
下载PDF
职称材料
4
Bacillus subtilis CICC 20034产脂肪酶的培养条件研究
王艳华
刘飞飞
程仕伟
《食品与药品》
CAS
2012
3
下载PDF
职称材料
5
交联纤维素酶聚集体制备及其催化特性研究
程仕伟
梁会会
崔海洋
《西华大学学报(自然科学版)》
CAS
2012
1
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职称材料
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