骨髓干细胞移植治疗急性胰腺炎的动物实验研究

目的观察骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)移植后对急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的修复作用,并探讨其治疗机制。方法体外培养、扩增BMMSCs并用荧光染料PKH26进行标记。采用L-精氨酸诱导急性胰腺炎模型,实验随机分为对照组和干细胞移植治疗组(BMMSCs移植治疗组)。移植后,被PKH26标记的BMMSCs出现在损伤的胰腺组织中,通过免疫荧光和免疫组化检测胰腺组织表面标记物Pax-4、Ngn3来判定BMMSCs的定植。结果病理组织学检查证实L-精氨酸诱导大鼠急性胰腺炎模型成功;移植术后3周,在大鼠急性胰腺炎损伤胰腺中可检测出PKH26标记的荧光细胞,PKH26标记的细胞表达胰腺组织表面标志物包括Pax-4、Ngn3。结论 BMMSCs移植可以促进损伤胰腺组织的再生。

骨髓间充质干细胞传代扩增培养与干细胞干性的维持关系的研究

目的建立一种体外分离、培养骨髓间充质干细胞（BMMSCs）的方法，研究BMMSCs传代扩增培养与干细胞干性的维持关系。方法采用全骨髓细胞贴壁培养法对大鼠BMMSCs进行分离、培养、传代。采用倒置显微镜观察各代细胞的形态，通过流式细胞术（FACS）观察各代BMMSCs干细胞干性，通过免疫荧光检测各代BMMSCS在肝硬化模型的表达。结果大鼠BMMSCs呈均一的成纤维细胞样。连续传代干细胞始终保持着旺盛的生长力及扩增力。FASC结果表明，CD29、CD44、CD90的表达率随着传代的进行逐渐增高，P5-P6时表达最高，之后其表达率逐渐下降，免疫荧光检测发现P5-P6代干细胞在大鼠肝硬化模型中表达最强。结论随着传代BMMSCs的干性逐渐增强，传代至P5-P6时干细胞干性最强，随着传代的继续其干性逐渐下降。