目的研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法。方法选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象。对所获得的标本进行10-1~10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检。主要采用三...目的研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法。方法选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象。对所获得的标本进行10-1~10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检。主要采用三种试剂盒进行实验:一种是Promega公司的Maxwell16全自动核酸提取仪以及该提取仪的配套试剂盒,为A组,一种是QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit,为B组,第三种则是国产的H生物公司的RNA提取试剂盒,为C组。对三种方法的核酸提取情况进行比较。结果对同一份咽拭子的核酸进行提取,A组所提取的总RNA浓度最高,B组的总RNA浓度次之,C组的总RNA浓度最低。A组在各个稀释浓度的流感病毒提取率均较高,差异均具有统计学意义(P<0.05);C组和B组随着稀释浓度的增大,流感病毒的提取率逐渐降低,尤其是C组当稀释浓度为10-4时,提取不到流感病毒。结论全自动核酸提取仪对核酸的提取效果较好,即使在高倍稀释的情况下也能够达到较高的核酸提取率,避免了手工提取的误差,是一种快捷有效的检测方法,值得在临床上推广使用。展开更多
文摘目的研究甲型H1N1流感病毒核酸提取的比较准确和有效的方法。方法选用2014年12月至2015年12月就诊的甲型H1N1流感患者的咽拭子共40份作为研究对象。对所获得的标本进行10-1~10-4的系列稀释,获得不同浓度的流感病毒标本备检。主要采用三种试剂盒进行实验:一种是Promega公司的Maxwell16全自动核酸提取仪以及该提取仪的配套试剂盒,为A组,一种是QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit,为B组,第三种则是国产的H生物公司的RNA提取试剂盒,为C组。对三种方法的核酸提取情况进行比较。结果对同一份咽拭子的核酸进行提取,A组所提取的总RNA浓度最高,B组的总RNA浓度次之,C组的总RNA浓度最低。A组在各个稀释浓度的流感病毒提取率均较高,差异均具有统计学意义(P<0.05);C组和B组随着稀释浓度的增大,流感病毒的提取率逐渐降低,尤其是C组当稀释浓度为10-4时,提取不到流感病毒。结论全自动核酸提取仪对核酸的提取效果较好,即使在高倍稀释的情况下也能够达到较高的核酸提取率,避免了手工提取的误差,是一种快捷有效的检测方法,值得在临床上推广使用。