高通量测序从聚丙烯酰胺凝胶回收DNA侦破命案积案

目的 从1999年案件中保留关键物证的凝胶电泳谱带中回收DNA,重新检测STR基因座重复单位序列和重复次数。方法 首先,确定凝胶电泳谱带中检测的STR基因座及引物序列,通过NCBI数据库查找获得STR基因座扩增序列范围,并在序列范围内重新设计扩增片段更小的引物,并验证引物扩增的特异性;其次,将凝胶中STR基因座谱带切割回收,每个基因座谱带单独回收;最后,用新设计的引物,扩增回收的模板DNA,再高通量测序。结果 从聚丙烯酰胺凝胶中成功回收到10个STR基因座DNA,并通过高通量测序获得10个STR基因座的重复单位序列和重复次数。结论 通过获得10个STR基因座的重复单位序列和重复次数排查侦破命案积案。