生物技术专业细胞生物学实验教学发展方向探讨

细胞生物学实验教学在培养学生创新思维能力上具有独特的作用,通过优化实验内容、改革教学方法和手段、优化教师素质、完善考评体系等措施,激发学生的想象力、创造力,提高学生分析问题、解决问题的能力。为了更好的提高生物技术专业学生的综合素质,提出了生物技术专业细胞生物学实验教学发展方向。

急性肝损伤大鼠肝组织Caspase-3和Caspase-8的表达及其相关性研究

目的观察银杏叶提取物(GBE)对硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤大鼠的肝脏保护作用及其对肝组织Caspase-3、Caspase-8表达的影响。方法将70只Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)及GBE组(n=45),GBE组再分为GBE低剂量组(n=15)、GBE中剂量组(n=15)及GBE高剂量组(n=15)。GBE低、中、高剂量组大鼠分别灌服GBE 50、100、200mg/kg,1次/d,连续30d;正常对照组及模型组大鼠灌服生理盐水。模型组及GBE低、中、高剂量组大鼠于灌服第28天用TAA(300mg/kg)行腹腔注射,隔天注射1次,共3次;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水。所有大鼠均于末次注射后24、48、72h采血,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平。用逆转录PCR检测大鼠肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA的表达情况,并对Caspase-3、Caspase-8的活性进行检测。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST水平明显升高,肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA水平上调;而与模型组比较,GBE组大鼠血清ALT、AST水平明显降低,肝组织Caspase-3、Caspase-8mRNA水平下调。结论 GBE可通过调节Caspase-3、Caspase-8的表达抑制急性肝功能衰竭患者的肝细胞凋亡,从而对肝损伤发挥保护作用。

银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠FADD表达的影响

目的观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对硫代乙酰胺(TAA)损伤的大鼠肝脏的作用及对FADD的影响,并探讨其作用机制。方法实验分5组,GBE低、中、高剂量组(50、100、200 mg/kg)连续灌服GBE 30 d,1次/d,正常对照组和模型组分别给与等体积的生理盐水;模型组、GBE低、中、高剂量组第28 d用TAA(300 mg/kg)腹腔注射,正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水。用试剂盒检测血清中AST、ALT的水平,并分别用RT-PCR和Western blot的方法检测各组肝脏FADD在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果模型组与正常组相比,血清中ALT、AST水平明显升高,肝组织中FADD在mRNA和蛋白水平均上调;而GBE组与模型组相比,血清中ALT、AST水平明显降低,肝组织中FADD在mRNA和蛋白水平均下调。结论肝衰竭过程中FADD参与肝细胞的凋亡,GBE可通过FADD抑制急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡,从而对肝脏起到保护作用。

银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠肝脏组蛋白去乙酰化酶2表达的影响

目的观察银杏叶提取物(GBE)对由硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤的大鼠肝脏的保护作用及其对组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)的影响,并探讨其作用机制。方法实验分5组,正常对照组用生理盐水灌胃和腹腔注射,模型组用生理盐水灌胃,TAA(300 mg/kg)腹腔注射连续3次,间隔24 h,GBE组(50、100、200 mg/kg)用GBE生理盐水灌胃,TAA(300 mg/kg)腹腔注射连续3次,间隔24 h。用试剂盒检测血清中谷草氨酸转移酶(AST)、谷丙氨酸转移酶(ALT)的水平,并用RT-PCR和Western印迹的方法检测各组肝脏HDAC2在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果模型组与正常组相比,血清中谷丙氨酸转移酶(ALT)、谷草氨酸转移酶(AST)水平明显升高,肝组织中HDAC2在mRNA和蛋白水平均下调;而GBE组与模型组相比,血清中ALT、AST水平明显降低,肝组织中HDAC2在mRNA和蛋白水平均上调。结论 GBE可通过HDAC2抑制急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡,从而对肝脏起到保护作用。

银杏叶提取物对急性肝衰竭大鼠肝脏Bcl-2及Bax表达的影响

为了观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对由硫代乙酰胺(TAA)所致肝损伤大鼠肝脏的作用及其对Bcl-2、Bax的影响,并探讨其作用机制,试验将大鼠分5组,其中GBE低、中、高剂量组(50,100,200 mg/kg)连续灌服GBE 30 d,1次/d,正常对照组和模型组分别给予等体积的生理盐水;模型组和GBE低、中、高剂量组在第28天用300 mg/kg的TAA腹腔注射,正常对照组腹腔注射等体积的生理盐水,连续3 d,于末次注射后24,48,72小时采血,用试剂盒检测血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的水平,并用RT-PCR和Western-blot方法检测各组肝脏Bcl-2、BaxmRNA和蛋白水平的表达情况。结果表明:与正常对照组相比,模型组血清中ALT、AST水平明显升高,在肝脏中Bcl-2 mRNA表达水平下调,Bcl-2蛋白水平在48小时时达到最低点,而Bax mRNA和蛋白水平均上调;与模型组相比,GBE组血清中ALT、AST水平明显降低,肝脏中Bcl-2 mRNA和蛋白水平均上调,Bax mRNA和蛋白水平均下调。