HPLC-MS/MS同时测定感冒安颗粒中5种黄酮成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS方法测定感冒安颗粒中5种黄酮成分含量。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm×4.6 mm,5μm,100Å),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0~20 min,35%A;20~40 min,45%A),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃;质谱条件:电喷雾电离源(ESI源)负离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测。5种黄酮检测的离子对:芦丁m/z 609.1→300.1、金丝桃苷和异槲皮苷m/z 463.0→300.1、槲皮素m/z 301.0→151.0、木犀草素m/z 285.0→132.9。结果5个成分在一定浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数r均>0.9991;平均加样回收率在100.63%~102.81%之间,RSD范围在0.67%~2.07%。10批感冒安颗粒中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素和木犀草素的含量测定结果分别为32.23~479.83、0.291~1.825、11.44~20.54、6.32~18.41、3.46~6.51μg/g。结论建立的HPLCMS/MS法灵敏度高、专属性强,适合同时测定感冒安颗粒中5种黄酮类成分的含量。

二仙汤含药血清外泌体经FN1促进成骨细胞骨形成

目的:探讨二仙汤含药血清外泌体蛋白的变化及其对成骨细胞骨形成的作用。方法:对二仙汤含药血清外泌体进行提取、鉴定。体外培养MC3T3-E1成骨细胞,分为正常对照组、空白血清外泌体2.5、5μg/mL组、二仙汤含药血清外泌体2.5、5、10μg/mL组。CCK8法检测成骨细胞增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)染色法观察成骨细胞ALP;茜素红染色观察成骨细胞矿化结节;Western blot法检测细胞中骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达。运用蛋白质组学技术对血清外泌体进行差异性蛋白分析。采用纤连蛋白(FN1)联合空白血清外泌体(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)处理成骨细胞,通过试剂盒检测成骨细胞ALP活力;Western blot法检测FN1对成骨细胞中BMP-2蛋白表达的影响。结果:与空白血清外泌体2.5μg/mL组相比,二仙汤含药血清外泌体组成骨细胞的增殖、ALP染色程度和茜素红染色程度明显升高(P<0.05或P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。从血清外泌体中共鉴定到256个蛋白,其中96个蛋白属于ExoCarta外泌体蛋白质数据库。差异统计分析显示有29个蛋白表达有明显变化(P<0.05)。针对显著差异蛋白进行生物信息学分析,与差异蛋白质相关的分子功能、生物过程和信号通路主要涉及氧化还原、细胞外泌体、PI3K/AKT信号通路、补体和凝血级联反应等过程。显著差异性蛋白主要包括FN1、白蛋白(ALB)、血清对氧磷酶/芳基酯酶1(PON1)和簇蛋白(CLU)等。与空白血清外泌体5μg/mL组相比,纤连蛋白联合空白血清外泌体组(3 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL、12 nmol/L纤连蛋白+5μg/mL)成骨细胞ALP活力显著升高(P<0.01),BMP-2的蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:二仙汤含药血清外泌体促进成骨细胞骨形成与血清外泌体中的蛋白变化有关,FN1在其中发挥重要作用。

西瓜霜是这么做出来的

口腔溃疡、咽喉肿痛怎么办?用西瓜霜效果不错哦。那么,西瓜霜的原料究竟是什么?它真的是用西瓜做出来的吗?本期“科学用药”让我们来了解一下西瓜霜的制作过程.