Ferrostatin-1对脊髓损伤大鼠的治疗作用及其机制

目的:探讨Ferrostatin-1对脊髓损伤大鼠的治疗作用和作用机制。方法:30只大鼠(河南省实验动物中心)按照数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组10只。模型组和治疗组大鼠采用20 g的撞击针实施脊柱打击伤,对照组仅行脊柱暴露,不打击。治疗组大鼠经腹腔注射5 mg/kg Ferrostatin-1,模型组和对照组大鼠经腹腔注射等体积生理盐水。3组大鼠治疗6 d后,采用Basso、Beattie和Bresnahan(BBB)评分评定3组大鼠后肢功能恢复情况;采用试剂盒检测3组大鼠组织内谷胱甘肽的相对含量;蛋白质印迹法(Western blot)分析3组大鼠组织GPX4和4HNE的表达水平;免疫荧光和尼氏染色分析各组大鼠神经元的存活和数量。组间计量数据比较采用单因素方差分析。结果:治疗组大鼠脊髓提取液中GSH水平[(61.80±7.28)μmol/L]低于模型组[(32.90±6.24)μmol/L],差异有统计学意义(t=9.525,P<0.05)。治疗组大鼠脊髓组织中GPX4蛋白表达水平(1.20±0.05)明显高于模型组(0.82±0.08),差异有统计学意义(t=9.131,P<0.05)。治疗组大鼠脊髓组织中4HNE蛋白表达水平(0.93±0.29)明显低于模型组(1.40±0.09),差异有统计学意义(t=9.525,P<0.05)。治疗组大鼠神经元标志物NeuN阳性率[(51.70±8.58)%]高于模型组[(30.70±9.29)%],差异有统计学意义(t=28.020,P<0.05)。治疗组大鼠尼氏小体数量[(21.50±2.17)个]高于模型组[(15.30±1.49)个],差异有统计学意义(t=7.434,P<0.05)。治疗组大鼠BBB评分(15.60±1.71)高于模型组(7.70±2.36),差异有统计学意义(t=8.569,P<0.05)。结论:Ferrostatin-1可显著抑制脊髓损伤大鼠神经细胞的铁死亡,保护神经元,进而促进大鼠运动能力恢复。

转化生长因子-β对兔胫骨平台骨折愈合的影响及机制

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对兔胫骨平台骨折愈合的影响及机制。方法:75只大白兔随机数字表法分为对照组、骨折模型组和TGF-β组,骨折模型组和TGF-β组兔构建胫骨平台关节塌陷性骨折;对照组仅暴露皮肤,不行胫骨平台骨折。TGF-β组兔经骨折部位注射过表达TGF-β的腺相关病毒1×1011 vg;对照组和骨折模型组经相同部位注射空载腺相关病毒1×1011 vg。治疗4周后,采用X线测定骨折愈合情况;测量3组兔膝关节活性度和肿胀程度变化;采用X线扫描测定3组兔胫骨骨密度;采用马松三色法测定3组兔膝关节韧带纤维化程度;采用三点弯曲法测定胫骨平台生物力学变化。计量资料比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD法。结果:TGF-β组大白兔骨折部位X线片评分[(17.09±4.18)分]明显高于骨折模型组[(13.69±3.71)分],差异有统计学意义(t=4.109,P<0.05)。TGF-β组大白兔骨密度(0.48±0.03)明显高于骨折模型组(0.27±0.02),差异有统计学意义(t=3.710,P<0.05)。TGF-β组大白兔膝关节活动度[(118.38±12.43)度]明显高于骨折模型组[(109.22±12.54)度],差异有统计学意义(t=4.011,P<0.05)。TGF-β组大白兔膝关节肿胀程度[(0.20±0.03)cm]明显高于骨折模型组[(0.25±0.03)cm],差异有统计学意义(t=4.381,P<0.05)。TGF-β组大白兔内侧韧带胶原纤维(蓝色)[(37.14±4.79)%]明显低于骨折模型组[(20.15±4.81)%],差异有统计学意义(t=4.193,P<0.05)。TGF-β组大白兔胫骨平台最大载荷、弹性载荷和刚度等三点弯曲指标[(129.75±7.62)N、(85.33±8.01)N、(168.39±9.38)N/mm]明显高于骨折模型组[(71.59±6.09)N、(60.43±6.19)N、(125.41±11.26)N/mm],差异有统计学意义(t=2.761、3.018、2.995,P<0.05)。结论:腺相关病毒介导TGF-β可显著促进胫骨平台骨折愈合,改善膝关节功能,提高胫骨平台的生物力学特性。