膜荚黄芪茎叶总黄酮对小鼠细胞免疫功能的影响

目的：研究黄芪茎叶总黄酮（ＦＡＭ）的免疫调节作用。方法：用单克隆抗体检测实验小鼠药物处理前后Ｔ细胞总数及亚群变化；用核素标记法测定ＬＡＫ细胞活性的变化。结果：ＦＭＡ能促进ＣｏｎＡ诱导的淋巴细胞增殖，增加Ｔ细胞总数并调整Ｔ细胞亚群紊乱；提高ｒＩＬ２所诱导的ＬＡＫ细胞活性。结论：ＦＡＭ对免疫功能低下小鼠具有免疫刺激和免疫调整作用，为临床应用提供了实验依据。

灵芝孢子粉对重症急性胰腺炎大鼠肠道微生态失调的调整作用

目的探讨灵芝孢子粉对重症急性胰腺炎(SAP)导致的肠道微生态失调的调整作用。方法采用胆胰管逆行注射5%牛磺胆酸钠法造成SAP模型;SD大鼠随机分为假手术组、模型组、奥曲肽治疗组、灵芝孢子粉治疗组及灵芝孢子粉奥曲肽联合治疗组;于给药7 d后处死大鼠,进行肠道菌群、肝脏及胰腺细菌易位检测。结果SAP时出现明显的肠道菌群紊乱,细菌易位。经治疗后发现,灵芝孢子粉能够扶植双歧杆菌、乳酸杆菌的生长,使肠杆菌的数量减少,并可控制细菌易位。将灵芝孢子粉与奥曲肽合用作用更佳,与其他治疗组相比差异有显著性(P<0.05)。结论灵芝孢子粉可调整SAP时出现的肠道微生态失调,其与奥曲肽联合应用治疗SAP可降低感染率,取得较好的疗效。

红花多糖对人PBMC增殖活性及分泌细胞因子的影响

[目的]探讨红花多糖(SPS)对人外周血单个核细胞(PBMC)的增殖作用及PBMC诱生细胞因子的影响。[方法]采集健康成人外周血,常规分离PBMC,体外与不同浓度的SPS共同培养,检测PBMC的增殖活性及白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)的水平。[结果]SPS对PBMC增殖有促进作用,以1.25g/L和0.625g/L剂量组增殖活性增加明显(P<0.05);红花多糖(SPS)各组IL-2和IFN-γ水平明显高于对照组(P<0.05),而各组TNF-α的水平无显著性差异。[结论]SPS可促进PBMC的增殖,提高IL-2和IFN-γ水平,增强免疫功能。

红花多糖对人PBMC和CD8＋T细胞增殖作用的影响

目的探讨红花多糖（safflower polysaccharide，sPs）体外对人外周血单个核细胞（PBMC）和CD8＋T细胞增殖作用的影响。方法采用葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法（ficoll-hypaque density gradient centrifugation）从健康成人外周血中分离PBMC，在体外与不同浓度的SPS共同培养，用3H-TdR法检测PBMC增殖活性；流式细胞术检测CI）8＋T细胞的增殖情况。结果SPS能够促进PBMC增殖，尤其1．25g·L-1和0．625g·L-1。两组PBMC增殖作用明显，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；SPS对CD8＋T细胞的增殖有促进作用，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论SPS可促进PBMC、CD8＋T细胞的增殖，增强机体非特异性和特异性免疫功能。

红花多糖抑制PI3K/Akt信号通路诱导人胃癌细胞凋亡的研究

目的 探讨红花多糖通过抑制PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制.方法 MTT比色法观察SPS对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用,流式细胞仪（FCM）分析细胞凋亡,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白的表达情况.结果 红花多糖在一定范围内以剂量依赖方式和时间依赖方式抑制SGC-7901胃癌细胞生长.流式细胞仪检测,SGC-7901细胞经红花多糖处理24h,其早期凋亡率、细胞坏死或晚期凋亡率显著增加,呈现明显的剂量依赖性.Real-time PCR和Western Blot检测发现,SPS处理的细胞Akt基因及蛋白表达量明显下降.结论 红花多糖对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用具有一定的时间依赖性和剂量依赖性;红花多糖能够下调Akt mRNA表达,降低Akt和p-Akt蛋白的表达量,抑制Akt通路发挥抗肿瘤作用.

刺五加注射液对脑缺血再灌注大鼠转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨刺五加注射液对脑缺血再灌注大鼠转化生长因子-β1表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注大鼠脑组织中转化生长因子β1蛋白含量。结果:应用刺五加注射液的治疗组大鼠脑组织中TGF-β1在各时间点的表达与模型组相应时间点相比明显增加(P<0.01或P<0.05)。结论:刺五加注射液能显著提高脑缺血再灌注大鼠脑组织中TGF-β1蛋白表达,对缺血性损伤脑组织具有保护作用。

桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨桂枝茯苓丸诱导肿瘤细胞凋亡机制,为桂枝茯苓丸(GFW)开发应用提供实验依据。方法:计算抑瘤率,流式细胞仪测定细胞凋亡率,免疫组化法测定P21waf/cip蛋白表达,原位杂交法检测Survivin mRNA表达,电镜观察肿瘤细胞超微结构。结果:GFW抑瘤率为38.93%,流式细胞仪检测GFW组凋亡率17.79%,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。GFW上调肿瘤细胞P21waf/cip蛋白表达,下调Survivin mRNA表达。GFW组镜下可见瘤细胞以凋亡变化为主。内膜结构完好,核膜清晰,细胞核固缩,染色质团块状散布核内或边集核膜下,并可见凋亡小体。结论:GFW诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与上调P21及下调Survivin mRNA表达密切相关。

活脑康对大鼠脑缺血后p53和Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨急性脑梗死大鼠脑组织p53和Bc l-2的变化及中药活脑康的保护作用。方法将40只健康W istar大鼠随机分为5组:正常对照组(A)、假手术组(B)、模型组(C)、活脑康治疗组(D)、步长脑心通组(E),采用线栓法制备局灶性脑缺血模型,应用免疫组化方法,测定各组p53和Bc l-2的表达水平及活脑康治疗后对其影响。结果活脑康能降低缺血周围区p53蛋白的表达,增高缺血周围区Bc l-2蛋白的表达,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论活脑康可抑制脑细胞凋亡,减轻缺血性损伤,保护损伤脑组织。

灯盏花素对阿霉素肾病鼠肾组织MCP-1表达影响的研究

目的观察灯盏花素对阿霉素肾病(AN)大鼠肾组织核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达及对肾组织病理损伤的影响。方法制备AN鼠模型,免疫组织化学方法检测肾组织中MCP-1的表达,生物显微镜观察肾组织病理形态学改变,测定阿奇霉素(ADR)注射前、注射后1周、治疗2周、3周后的24 h尿蛋白(24HUP)定量及血生化指标。结果灯盏花素能明显抑制AN大鼠肾组织MCP-1的表达、减轻肾脏免疫病理损伤、降低24HUP等。结论灯盏花素能降低模型鼠MCP-1表达,减轻肾脏病理损伤等,对AN鼠肾脏起到保护作用。

痤疮颗粒对痤疮患者血清中白细胞介素-8和肿瘤坏死因子-α水平的影响

[目的]探讨痤疮颗粒对痤疮患者血清中细胞因子变化。[方法]采用放射性免疫学方法检测痤疮颗粒对痤疮患者血清中白细胞介素-8(IL-8),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。[结果]应用痤疮颗粒治疗痤疮患者后,其血清中的IL-8和TNF-α水平均较用药前有显著变化(P<0.01);并且疗后患者血清中IL-8和TNF-α水平与正常对照组无差异(P>0.05)。[结论]痤疮颗粒能够改变痤疮患者血清中细胞因子水平。

血清促血管生成素在肝癌中的表达及影响

目的探讨促血管生成素-2（angiogehin-2，Ang-2）对肝细胞肝癌（Hepatocellularcarcinoma，HCC）诊断的临床意义，以期为临床提供有意义的诊断依据。方法采用酶联免疫吸附试验测定30例HCC患者、10例肝硬化患者和10例健康者血清Ang-2水平，同时监测AFP、CEA、CAl99、FERR等肝癌相关指标进行对比。结果HCC组血清Ang-2水平（1892．54±482．82）μg／L和肝硬化组Ang-2水平（1244．21±14．65）μg／L均显著高于健康对照组（943．01±12．52）pg／L（P〈0．01，P〈0．05），此外HCC组血清Ang-2水平亦显著高于肝硬化组（P〈0．01）。HCC患者血清AFP（4397．61±613．82）μg／L、CA199（64．88±10．71）U／mL、FERR（401．53±51．32）μg／L、CEA（4．69±1．00）μg／L水平显著高于健康对照组（P〈0．01）；其中合并肝硬化组血清Ang-2（2045．41±155．31）μg／L、AFP（5097．17±2830．22）μg／L、CAl99（67．53±9．35）U／mL、FERR（462．87±56．79）μg／L、CEA（5．41±2．25）μg／L水平均高于未发生肝硬化组，差别有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。结论肝癌患者血清Ang-2增高与HCC的发生、发展有关，血清中Ang-2水平检测可能为HCC临床诊断提供依据。

柿叶黄酮对阿霉素肾病鼠尿蛋白与血生化影响作用

目的观察柿叶黄酮(PLF)对阿霉素肾病(AN)大鼠尿蛋白、血生化及肾组织免疫病理损伤的影响,初步探讨柿叶黄酮对阿霉素肾病作用机制。方法 70只SD大鼠随机分为7组:正常对照组(A组)、病理对照组(B组)、低中高剂量柿叶黄酮组(C1、C2、C3组)、阳性药物组(D组)及联合用药组(E组)。阿霉素肾病鼠模型建立后,用药组实验鼠分别经胃给予相应药物7周。模型鼠阿霉素(ADR)注射前、注射后及药物干预后测定24 h尿蛋白(24HUP)定量变化,药物干预后测定模型鼠血生化指标,显微镜观察模型鼠肾组织病理形态改变。结果各剂量柿叶黄酮、强的松及联合用药均能明显降低阿霉素肾病鼠24HUP(P<0.01),改善肾脏病理损伤,调节血清蛋白与血脂含量(P<0.05)等。结论柿叶黄酮能降低阿霉素肾病鼠24HUP、调节血生化及改善肾脏病理损伤等,对阿霉素肾病鼠肾脏起到一定的保护作用。

中药活脑康对脑缺血大鼠脑组织中P38和TGF—β1表达的实验研究

目的观察中药活脑康对脑缺血大鼠脑组织中突触素P38和TGF—β1表达影响的实验研究。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型；应用SABC免疫组化染色法观察脑组织中P38和TGF-β1的表达。结果P38和TGF－β1在正常脑神经细胞中均呈弱阳性表达，脑缺血后P38和TGF－β1的表达量均明显增强（与正常对照组相比，P〈0．01）；中药活脑康对缺血脑组织中P38和TGF—β1的表达有上调作用（与模型组相比，分别为P〈0．01和P〈0．001）。结论中药活脑康可能是通过增加P38和TGF—β1的表达，从而减少脑细胞的凋亡，促进突触再建，增强和完善再建突触效能发挥脑保护作用。

柿叶黄酮对阿霉素肾病大鼠肾组织TIMP-1表达的影响

目的观察柿叶黄酮(PLF)对阿霉素肾病大鼠肾组织金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)表达及对肾组织病理损伤的影响。方法制备阿霉素肾病大鼠模型及药物干预模型鼠,测定模型鼠24 h尿蛋白(24hUP)变化,用免疫组化法检测肾组织中TIMP-1表达,光学显微镜观察肾组织病理形态。结果 PLF能明显降低阿霉素肾病大鼠24hUP(P<0.01),减轻肾脏免疫病理损伤及抑制肾组织TIMP-1的表达(P<0.01)。结论 PLF能降低模型鼠肾组织TIMP-1的表达、抑制肾组织纤维化等,对阿霉素肾病大鼠肾脏起到保护作用。

柿叶黄酮对阿霉素肾病鼠肾组织纤维连接蛋白表达的影响

目的探讨柿叶黄酮(PLF)对阿霉素肾病大鼠肾组织纤维连接蛋白(FN)表达及对肾脏免疫病理损伤的影响。方法制备阿霉素肾病鼠模型,采用PLF干预模型鼠,测定模型鼠各阶段24 h尿蛋白变化(于模型制备前、制备后1周、给药3周及给药5周后测定),应用苏木精-伊红(HE)染色法观测肾脏病理形态变化,用免疫组化法观测肾组织中FN表达。结果 PLF能明显降低模型鼠24 h尿蛋白水平(P<0.01)、改善肾脏病理损伤以及抑制肾组织FN表达(P<0.01)等。结论 PLF能通过降低模型鼠肾组织FN表达、改善肾组织纤维化,对模型鼠肾脏起到一定的保护作用。

噬菌体7肽文库筛查类风湿关节炎相关抗体及分析

目的筛选和鉴定与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清特异性结合的噬菌体7肽,并分析其实际意义。方法采用30例正常人混合血清和30例RA患者混合血清作为筛选配基对噬菌体随机7肽库进行亲和筛选、扩增,获得RA血清特异性结合的噬菌体克隆。用患者混合血清进行Dot-ELISA实验鉴定获得的噬菌体克隆,进一步用RA患者及正常人血清各12例筛选阳性噬菌体的混合克隆。对鉴定的噬菌体克隆进行测序,并分析其同源性。结果获得17个与RA患者混合血清特异性结合的阳性克隆。阳性噬菌体混合克隆与RA患者个体血清反应阳性率明显高于其与正常人血清的反应率。序列分析显示阳性噬菌体克隆的抗原表位之间无共有序列,但与杆菌、球菌等有一定的同源性。结论 RA患者血清中存在与病原体抗原表位结合的抗体成分,提示RA的发病可能与病原体感染有关。

SELEX技术在自身免疫病中的研究进展

SELEX技术利用大容量的随机寡核苷酸文库与靶分子的相互作用，从中筛选出高亲和力和高特异性的寡核苷酸适配体。适配子和靶分子结合后可阻断靶分子的生物学活性，与相应抗体分子相比适配子具有许多优越性，如分子量小、易于修饰、无免疫原性等。该技术在多种疾病的诊断、治疗方面都有广泛的应用前景。

红花多糖的提取与含量测定

目的:研究红花多糖的提取及含量测定,为开展红花多糖的抗肿瘤作用机制提供理想药物。方法:采用水提醇沉法从红花药材中提取并分离出红花粗多糖,用Sevage法除去蛋白质,过氧化氢脱色;采用苯酚-硫酸显色,用分光光度法测定多糖含量。结果:红花多糖的浓度与吸光度在5～50μg·mL-1呈良好的线性关系,回归方程:Y=0.01749X-0.03165,r=0.9994。多糖质量分数为96.048%。结论:含量测定方法操作简便,灵敏度高,稳定,重现性好。该方法可为开展红花多糖的抗肿瘤作用研究提供理想的实验药物。

红花多糖抗肿瘤活性及对T739肺癌鼠CTL,NK细胞杀伤活性的影响

目的:研究红花多糖(safflower polysaccharide,SPS)体内外的抗肿瘤活性及对荷瘤鼠CTL,NK细胞杀伤活性的影响。方法:利用昆明种小鼠(KM)制备小鼠肉瘤S180的体内移植性肿瘤模型,腹腔连续给予SPS 10 d,称肿瘤质量;利用T739小鼠制备小鼠肺腺癌LA795的体内移植性肿瘤模型,腹腔连续给予SPS 10 d,称肿瘤质量,测定CTL及NK细胞杀伤活性;用台盼蓝拒染法观察SPS对3种肿瘤细胞的体外抗肿瘤作用。结果:SPS 40 mg.kg-1对小鼠肉瘤S180的抑制作用最明显,抑瘤率为51.33%(P<0.01);对小鼠肺癌LA795也有抑制作用,使肿瘤体积明显减小为3.29 mm3(P<0.05);能明显提高荷瘤小鼠脾CTL细胞、NK细胞杀伤活性(P<0.05)。结论:SPS具有抗肿瘤作用,其作用机制可能与增强CTL,NK细胞的细胞毒活性有关。

红花多糖对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长及转移的影响

目的研究红花多糖（SPS）对T739小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的抑制作用和对肺转移的影响，并初步探讨其作用机制。方法皮下移植Lewis肺癌细胞建立小鼠移植瘤肺转移模型，随机分为4组：对照组、SPS高、中、低剂量组，每日灌胃1次，共28次。测量各组移植瘤体积和重量，镜下观察肺转移灶数目，应用MTT法检测SPS对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用以及对T细胞增殖能力的影响。结果体外SPS对肺癌细胞增殖无抑制作用。体内SPS可促进T淋巴细胞增殖，抑制瘤细胞生长及转移，SPS各剂量组移植瘤体积、重量及肺转移灶数目与对照组比较差异显著有统计学意义（P〈0．05）。结论红花多糖具有抑制肿瘤生长及转移的作用，其作用机制可能与提高自身免疫力有关。