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研究生培养方案制定的思考与分析——以黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院为例
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作者 于欣卉 王彦杰 +2 位作者 王艳红 宋博翠 毕少杰 《现代畜牧科技》 2023年第12期158-161,共4页
研究生培养方案既是质量保证体系,也是培养研究生的基本教学文件。研究生人才培养对于生命科学领域的发展具有重要意义,它既是高校研究生培养质量的必要前提,也是研究生教育改革创新的必然要求。该文以黑龙江八一农垦大学生命科学技术... 研究生培养方案既是质量保证体系,也是培养研究生的基本教学文件。研究生人才培养对于生命科学领域的发展具有重要意义,它既是高校研究生培养质量的必要前提,也是研究生教育改革创新的必然要求。该文以黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院生物学一级学科研究生培养方案建设现状为例,对当前研究生培养方案所存在的问题进行了深入剖析,并提出了针对性的解决对策。 展开更多
关键词 研究生教育 培养方案 课程体系 生物学
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基于CDIO理念的地方高校生物工程专业创新人才培养模式的探索与实践——以黑龙江八一农垦大学为例
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作者 王艳红 王景伟 +4 位作者 王锐 戴凌燕 李志江 晏磊 姜春宇 《现代畜牧科技》 2024年第8期173-176,共4页
该文以黑龙江八一农垦大学生物工程专业教育教学为例,阐述了在培养目标、理论教学、实践教学、课程达成度考核及第二课堂开展等培养模式方面应用CDIO的教学理念所进行的探索,在分析成效的基础上提出所存在的问题及相关解决措施,实践表明... 该文以黑龙江八一农垦大学生物工程专业教育教学为例,阐述了在培养目标、理论教学、实践教学、课程达成度考核及第二课堂开展等培养模式方面应用CDIO的教学理念所进行的探索,在分析成效的基础上提出所存在的问题及相关解决措施,实践表明,CDIO教学理念可满足黑龙江八一农垦大学学生自我价值实现的需要,能够增强学生的动手能力,还可以培养其创新意识和团队精神,同时也能带动校风和学风的建设,是促进高校教育教学行之有效的途径。 展开更多
关键词 CDIO 生物工程 创新 培养模式 构思能力
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黑龙江省大庆地区猫下泌尿道疾病的调查与分析
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作者 李玉丹 王峥 +3 位作者 罗春海 孙悦 杨春雪 武瑞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期126-132,共7页
为了解黑龙江省大庆地区猫下泌尿道疾病(FLUTD)的发病规律,本调查收集大庆地区4家宠物医院在2019年1月—2020年12月期间704例有完整病史、临床检查、血液和尿液分析结果的病例,对其病因、患猫年龄、发病季节、品种、性别和去势(绝育)情... 为了解黑龙江省大庆地区猫下泌尿道疾病(FLUTD)的发病规律,本调查收集大庆地区4家宠物医院在2019年1月—2020年12月期间704例有完整病史、临床检查、血液和尿液分析结果的病例,对其病因、患猫年龄、发病季节、品种、性别和去势(绝育)情况、体重、食用粮、共同居住猫数量、发病史、临床症状和血液生化检查结果进行统计分析。结果显示,引起猫FLUTD的病因主要包括猫自发性膀胱炎(FIC,n=351,49.9%)、尿石症(UC,n=227,32.2%)、细菌性膀胱炎(BC,n=70,9.9%)、尿道阻塞(UO,n=52,7.4%)和膀胱肿瘤(BT,n=4,0.6%);1~6岁猫多发(n=649,92.2%);春季和冬季(发病率分别为43.6%和22.7%)是高发季节;短毛猫易发(n=606,86.1%);公猫发病率(n=478,67.9%)明显高于母猫(n=226,32.1%),尤其是去势公猫(n=265,37.6%);各诊断结果组间体重差异不显著(P>0.05);食用干粮猫的患病率(n=393,55.8%)高于食用湿粮的猫(n=160,22.7%)和干湿混合粮的猫(n=151,21.5%);饲养单猫占比较高(n=438,62.2%);FIC、UC和UO患猫复发率较高;FLUTD患猫临床表现出尿频、尿闭和血尿症状较明显,其中UO和BT患猫的尿闭症状较明显。本调查704例FLUTD患猫中,313例患猫(44.5%)发生了急性肾损伤(AKI),BT、UC和UO患猫发生AKI的占比较高(分别为100%、75.3%和67.3%),共占调查样本总体AKI数量的67.1%(210/313)。结果表明,大庆地区FLUTD的主要原因是FIC和UC,但年龄、季节、品种、性别、去势(绝育)情况、体重、食用粮、共同居住猫数量、发病史、临床症状和血液生化检查结果也对该病的发生有影响,梗阻性因素(BT、UO和UC)是猫发生AKI的风险因素。 展开更多
关键词 猫下泌尿道疾病 流行病学调查 急性肾损伤 猫自发性膀胱炎
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黑龙江八一农垦大学人工湖原生动物种类构成及水质评价
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作者 罗慧 陈晶 +2 位作者 李洪鑫 王秉政 包丹 《黑龙江科技信息》 2015年第20期139-140,共2页
采用PFU法和直接取水法对黑龙江八一农垦大学校园人工湖内原生动物的种类构成进行研究,结合Margalef多样性指数等各项指标对水质进行评价。
关键词 原生动物 PFU法 Margalef多样性指数 水质
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大学生成功素质训练模式初探--以黑龙江八一农垦大学为例
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作者 张岩 《科教导刊(电子版)》 2013年第32期16-17,共2页
大学生成功素质训练是一种能有效提升大学生综合素质、促进大学生全面发展、加强大学生就业能力的科学训练方法,在高校开展成功素质训练,不仅有利于加强大学生素质教育,也有利于提高高校就业层次。
关键词 大学生素质提升 成功素质训练 科学就业
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案例教学与专业学位研究生培养的教学改革实践——以“发酵工程原理与技术”课程为例
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作者 毕少杰 于思淼 +3 位作者 刘涛 王宝柱 李喜梅 王彦杰 《黑龙江水产》 2024年第5期633-638,共6页
案例教学法是一种重要的教学方法,通过引导学生研究和剖析实际问题的案例,培养他们在真实环境中分析和解决问题的能力。在当前深化专业学位研究生培养模式改革的宏观背景下,案例教学法被认为是一项关键措施。然而,目前中国专业学位研究... 案例教学法是一种重要的教学方法,通过引导学生研究和剖析实际问题的案例,培养他们在真实环境中分析和解决问题的能力。在当前深化专业学位研究生培养模式改革的宏观背景下,案例教学法被认为是一项关键措施。然而,目前中国专业学位研究生教学对案例教学的重视程度还有待提高。该研究以生物与医药专业学位硕士研究生课程“发酵工程原理与技术”为例,着重探讨研究生课程中案例建设的重要性及其现状,并通过具体实例详细阐述案例教学在提高学生的学术能力、实践能力和综合素质方面的重要作用。 展开更多
关键词 研究生培养 发酵工程原理与技术 案例库建设 教学改革
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食源性甲型肝炎病毒快速检测技术研究进展
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作者 魏莹 杨艳歌 +4 位作者 赵健淞 李涛 李红娜 孙冬梅 袁飞 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第6期74-82,共9页
病毒在食源性疾病的爆发中起着至关重要的作用,其中,甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)感染后能够致人衰弱,并引发急性肝衰竭。由于其传染迅速,影响范围广,HAV污染已经给消费者带来了严重的健康风险,且在全球范围内造成了大规模的食... 病毒在食源性疾病的爆发中起着至关重要的作用,其中,甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)感染后能够致人衰弱,并引发急性肝衰竭。由于其传染迅速,影响范围广,HAV污染已经给消费者带来了严重的健康风险,且在全球范围内造成了大规模的食源性疫情和经济损失。因此,早期快速准确的检测HAV对于食品安全和疫情暴发的溯源至关重要,以便及时确定并召回受污染的食品,防止感染的进一步发生。传统的HAV检测方法由于检出率不高以及病毒在细胞内的培养周期长等问题,往往耗时费力,无法快速有效地对其进行检测。本文对目前报道较多的HAV快速检测技术进行了阐述和梳理,对各项技术的检出限、检测时间以及优缺点进行了比较,并对HAV快速检测技术研究进行了展望,为后续HAV的快速检测研究提供依据,也有助于进一步探讨与开发HAV快速检测的新技术,以有效防止HAV的传播与危害。 展开更多
关键词 甲型肝炎病毒 快速检测 分子生物学 免疫学
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“发酵工程原理与技术”课程思政元素的探索与教学实践
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作者 于欣卉 于思淼 +3 位作者 王彦杰 王艳红 宋博翠 毕少杰 《黑龙江水产》 2024年第1期92-95,共4页
课程思政作为立德树人的根本遵循,对于提升人才培养品质具有至关重要的意义。发酵工程原理与技术是一门研究生学位课程,其目的是运用生物学知识和工程概念,解决生物技术产业化过程中涉及发酵和生产的关键问题。文章通过有效地挖掘该课... 课程思政作为立德树人的根本遵循,对于提升人才培养品质具有至关重要的意义。发酵工程原理与技术是一门研究生学位课程,其目的是运用生物学知识和工程概念,解决生物技术产业化过程中涉及发酵和生产的关键问题。文章通过有效地挖掘该课程中的思政元素并融于教学当中,形成“融教书育人、知识传授、能力培养、素质教育于一体”的教学理念,以期提高课程教学吸引力和思政育人效果。 展开更多
关键词 课程思政 发酵工程原理与技术 思政元素
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基于BP神经网络技术的我国饲料产量预测
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作者 张宏波 贾玉川 韦春波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第3期44-49,共6页
畜牧业的发展与饲料生产密不可分,精准预测饲料产量对于畜牧业和饲料业的生产规划至关重要,也是实现可持续发展的重要保障。研究利用我国1990年至2022年的饲料产量面板数据,运用MATLAB软件模拟构建了BP神经网络预测模型,旨在科学预测我... 畜牧业的发展与饲料生产密不可分,精准预测饲料产量对于畜牧业和饲料业的生产规划至关重要,也是实现可持续发展的重要保障。研究利用我国1990年至2022年的饲料产量面板数据,运用MATLAB软件模拟构建了BP神经网络预测模型,旨在科学预测我国2023年至2024年的饲料产量。结果表明:BP神经网络模型的预测值与实际值的相关系数高达0.999 8,对我国2022年饲料产量进行的模型验证显示预测误差仅为1.07%,说明该模型的迭代学习效果良好。预测结果显示,我国2023年和2024年的饲料产量分别为33 041.62和29 986.32万t,这一研究为我国饲料生产的可持续发展提供重要的理论参考。 展开更多
关键词 BP神经网络技术 预测模型 饲料产量 预测
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如何发挥学术型社团在高校生命科学专业创新创业教育中的作用
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作者 申贵男 李婧 +3 位作者 罗英花 曹荣安 葛文中 金成浩 《西部素质教育》 2021年第1期76-77,共2页
文章首先阐述了学术型社团在高校生命科学专业创新创业教育中的作用,然后论述了学术型社团在高校生命科学专业创新创业教育中作用的发挥策略,包括为学生创新创业提供有效的实践平台、积极营造创新创业氛围。
关键词 创新创业教育 学术型社团 生命科学专业 高校
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羊口疮病毒黑龙江省分离株的分离鉴定 被引量:17
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作者 于永忠 谭强 +2 位作者 赵文博 包凯 崔玉东 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期678-680,共3页
为确定黑龙江大庆地区某羊场发生的疑似羊口疮(Orf)的病原,本研究采用MDBK细胞培养途径从病羊的口唇部位的痂皮病料中分离出1株病毒。通过电镜观察和IFA鉴定证明该分离株为Orf病毒,命名为OV/HLJ/04。其F1L基因核苷酸序列测定和进化分析... 为确定黑龙江大庆地区某羊场发生的疑似羊口疮(Orf)的病原,本研究采用MDBK细胞培养途径从病羊的口唇部位的痂皮病料中分离出1株病毒。通过电镜观察和IFA鉴定证明该分离株为Orf病毒,命名为OV/HLJ/04。其F1L基因核苷酸序列测定和进化分析显示,OV/HLJ/04与国内报道的山西株(HQ221964)的遗传关系密切,同源性达到98.2%。将该病毒分离株进行回归本动物试验,接种羔羊发生严重的羊口疮。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 病毒分离与分子特征 进化分析
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利用播期研究气候条件对黑龙江春玉米产量性状的影响 被引量:13
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作者 韩毅强 高亚梅 +1 位作者 郑殿峰 杜吉到 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2016年第3期132-138,共7页
不同播期致使作物所处的气候条件不同,进而影响作物的生长发育和产量。本文以哲单37(特早熟,生育期113 d)、先玉335(中早熟,118 d)、郑单958(中熟,120 d)等3个玉米品种为试验材料,于2012年到2014年在黑龙江林甸县进行了为期三年... 不同播期致使作物所处的气候条件不同,进而影响作物的生长发育和产量。本文以哲单37(特早熟,生育期113 d)、先玉335(中早熟,118 d)、郑单958(中熟,120 d)等3个玉米品种为试验材料,于2012年到2014年在黑龙江林甸县进行了为期三年分期播种试验,分析了玉米产量相关性状与各个生育阶段气象因子的关系。结果显示:分期播种对3个玉米品种均有影响,其中对早熟品种影响最大。播期主要通过影响玉米百粒重、穗长和秃尖引起产量的变化,贡献最大的因素是百粒重,总效应为0.847,其次是穗长,总效应为0.840,秃尖为负效应,总效应为-0.213。产量性状与气候条件相关性分析发现,玉米产量与抽雄~成熟期的日均温度、降雨呈显著正相关。因此在黑龙江第二积温带播种中早熟和中熟玉米品种(先玉335和郑单958)适当早播可增加抽雄~成熟期的日均温度,增加积温以达到增产的效果;晚播有利于避开早春易发生的干旱、冷害等自然灾害。采用偏最小二乘路径模型PLS-PM处理分析结果显示,播期对产量性状有较大的直接作用(0.763),同时通过影响各生育期的气候和土壤条件间接影响产量。综上所述,在黑龙江西部地区影响玉米产量最关键的气象因子是抽雄~成熟期的温度和降雨,此时适量的灌溉更有利于增加产量。 展开更多
关键词 玉米 分期播种 气象因子 产量
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黑龙江省1990~2007年审定大豆品种主要农艺性状改进 被引量:6
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作者 韩毅强 高亚梅 +2 位作者 杜吉到 王经纬 贾国英 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期177-179,共3页
对黑龙江省1990~2007年审定的148个品种的产量、蛋白质和脂肪含量等重要性状进行了统计分析。结果表明:试验产量由1990—1994年的2259.27kg·hm^-2提高到2005~2007年的2410.99kg·hm^-2,增幅6.72%;蛋白质含量高于45.... 对黑龙江省1990~2007年审定的148个品种的产量、蛋白质和脂肪含量等重要性状进行了统计分析。结果表明:试验产量由1990—1994年的2259.27kg·hm^-2提高到2005~2007年的2410.99kg·hm^-2,增幅6.72%;蛋白质含量高于45.0%的大豆品种5个;脂肪含量在22.0%以上的品种有30个,其中2000~2007年培育出27个高脂肪品种。 展开更多
关键词 大豆 审定品种 产量 品质
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黑龙江春玉米种植区高产品种籽粒灌浆、脱水特性及产量分析 被引量:12
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作者 戴凌燕 刘玉涛 +4 位作者 王宇先 殷奎德 唐呈瑞 迟莉 张树权 《中国农学通报》 2015年第6期75-79,共5页
为了研究不同高产玉米品种在黑龙江春玉米区种植的可行性,以‘先玉335’和‘郑单958’为试材,通过对比分析,探讨2个品种在该地区种植的灌浆和脱水特性。结果表明,‘先玉335’灌浆迅速,生理性脱水快,产量高;‘郑单958’灌浆持续期略长,... 为了研究不同高产玉米品种在黑龙江春玉米区种植的可行性,以‘先玉335’和‘郑单958’为试材,通过对比分析,探讨2个品种在该地区种植的灌浆和脱水特性。结果表明,‘先玉335’灌浆迅速,生理性脱水快,产量高;‘郑单958’灌浆持续期略长,前期和中期灌浆速率较‘先玉335’慢,但后期灌浆速率和自然性脱水速率都快,产量较高。从气温和降雨特点来看,在黑龙江春玉米种植区部分积温较高地区,可考虑将‘郑单958’作为品种更替及多样化的备选材料。 展开更多
关键词 玉米 黑龙江 灌浆 脱水 产量 气象条件
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健康仔猪肠道乳杆菌黑龙江地方株的鉴定与种属分析 被引量:6
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作者 刘宇 朱战波 +4 位作者 赵星成 袭莹 王洪伟 崔玉东 杨焕民 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期210-212,共3页
为了从健康仔猪肠道中分离筛选用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,选择黑龙江省大庆、哈尔滨及宝泉岭地区部分猪场,采集12-60日龄健康仔猪肠道粪样64份。选用MRS乳酸杆菌专用培养基分离培养乳酸杆菌,通过分离株的形态特征和培养特性筛... 为了从健康仔猪肠道中分离筛选用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,选择黑龙江省大庆、哈尔滨及宝泉岭地区部分猪场,采集12-60日龄健康仔猪肠道粪样64份。选用MRS乳酸杆菌专用培养基分离培养乳酸杆菌,通过分离株的形态特征和培养特性筛选出革兰阳性,厌氧,无芽胞杆菌48株。再通过生化试验鉴定和PCR种属分析,确定18株为乳酸杆菌。其中,罗伊乳杆菌7株,嗜酸乳杆菌5株,约氏乳杆菌2株,短乳杆菌1株,干酪乳杆菌假植物亚种1株,植物乳杆菌1株,詹氏乳杆菌1株。 展开更多
关键词 仔猪 乳酸杆菌 生理生化鉴定 PCR鉴定
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黑龙江省种植大豆品种遗传多样性分析及与性状关联SSR标记筛选 被引量:3
16
作者 李志江 牛江帅 +4 位作者 李忍 姜鹏 鹿保鑫 张东杰 阮长青 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第4期37-44,共8页
为从分子水平鉴定黑龙江省种植大豆品种的遗传多样性,并筛选与蛋白质、脂肪、百粒重和水分等大豆主要性状显著关联的SSR分子标记,利用18对SSR引物,采用荧光毛细管电泳法分析黑龙江省75个种植大豆品种遗传多样性,并与性状进行关联分析。... 为从分子水平鉴定黑龙江省种植大豆品种的遗传多样性,并筛选与蛋白质、脂肪、百粒重和水分等大豆主要性状显著关联的SSR分子标记,利用18对SSR引物,采用荧光毛细管电泳法分析黑龙江省75个种植大豆品种遗传多样性,并与性状进行关联分析。结果表明:18个SSR标记中的10个标记可以实现单对引物准确鉴别42个大豆品种,18个SSR标记的等位变异的数目变化为3(Satt387)~12个(Satt100),平均每个位点等位变异数为7.333个,多态信息指数范围为0.146(Sat_084)~0.675(Satt442),平均多态信息指数为0.405;群体结构分析发现,该群体分为3个亚群;性状关联分析表明,标记Satt175和Satt100与脂肪存在显著关联,标记Satt514和Satt294与百粒重存在显著关联,其中Satt294与百粒重和水分均存在显著关联。研究结果为探索大豆品种间的亲缘关系,挖掘大豆相关性状的关联位点,验证大豆种质资源的真实性,以及保障黑龙江省大豆品牌和食品安全提供参考。 展开更多
关键词 大豆 SSR标记 毛细管电泳 遗传多样性 关联分析
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黑龙江省西部半干旱地区大豆性状的相关性和主成分分析 被引量:4
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作者 韩毅强 杜吉到 +2 位作者 郑殿峰 张玉先 张文慧 《安徽农业科学》 CAS 2012年第19期10059-10060,10114,共3页
[目的]为了掌握不同大豆(Glycine max)品种(系)主要农艺性状在黑龙江省西部半干旱地区环境下的相关变异及适应性。[方法]以93份大豆为材料,对大豆17个农艺性状进行了相关性和主成分分析。[结果]产量与单株有效荚数、单株3粒荚数、单株4... [目的]为了掌握不同大豆(Glycine max)品种(系)主要农艺性状在黑龙江省西部半干旱地区环境下的相关变异及适应性。[方法]以93份大豆为材料,对大豆17个农艺性状进行了相关性和主成分分析。[结果]产量与单株有效荚数、单株3粒荚数、单株4粒荚数、单株粒数、百粒重和脂肪含量等性状呈显著相关。主成分分析表明,前6个主成分的方差累计贡献率大于80%,可解释生物学性状的绝大部分信息,其中主成分1、2、4主要反映产量相关性状,主成分3、5、6主要反映品质相关性状。[结论]该研究可为大豆杂交亲本的选择和资源的利用提供理论依据。 展开更多
关键词 大豆 农艺性状 相关性分析 主成分分析
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黑龙江东部地区猪瘟病毒分子流行病学研究 被引量:2
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作者 于立权 李鹏 +2 位作者 崔玉东 潘兴广 朴范泽 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期271-273,共3页
本研究参考公开发表的Alfort株基因组全序列 ,用计算机软件Dnastar的PrimerSelect程序设计了两对SCFVE2基因高变区的特异性引物 ,对黑龙江东部地区分离的 5株猪瘟野毒 (HL、JN、MSND、MSPD和MSHT株 )进行RT_PCR扩增、克隆和序列测定 ,... 本研究参考公开发表的Alfort株基因组全序列 ,用计算机软件Dnastar的PrimerSelect程序设计了两对SCFVE2基因高变区的特异性引物 ,对黑龙江东部地区分离的 5株猪瘟野毒 (HL、JN、MSND、MSPD和MSHT株 )进行RT_PCR扩增、克隆和序列测定 ,并将这 5株野毒的高变区基因序列与国内外公开发表的参考毒株的相应部分进行了比较。结果表明 ,5株分离毒均为基因II群 ,且形成两个独立的分支 ,HL、JN株与HCLV株氨基酸差异在 60 %以上 ,而MS株与HCLV株氨基酸差异在 3 0 %左右。 展开更多
关键词 猪瘟 分子流行病学 遗传关系分析
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黑龙江奶牛肠外致病大肠埃希菌种系分类群研究 被引量:4
19
作者 佟春玉 曹宏伟 +2 位作者 朱战波 刘振华 崔玉东 《黑龙江八一农垦大学学报》 2013年第4期32-35,共4页
研究黑龙江省奶牛主要肠外致病(奶牛乳房炎、子宫内膜炎)大肠埃希菌的种系分类群。用PCR扩增具有种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2 DNA片段的方法,对黑龙江省84株来源于奶牛乳房炎和41株来源于奶牛子宫内膜炎的大肠埃希菌进行... 研究黑龙江省奶牛主要肠外致病(奶牛乳房炎、子宫内膜炎)大肠埃希菌的种系分类群。用PCR扩增具有种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2 DNA片段的方法,对黑龙江省84株来源于奶牛乳房炎和41株来源于奶牛子宫内膜炎的大肠埃希菌进行种系进化群分类。奶牛乳房炎所检测菌株中A进化种系群占11.90%。B1种系进化群占88.10%。奶牛子宫内膜炎所检测菌株中A种系进化群占14.63%,B1种系进化亚群占85.37%。未检测到属于B2和D群的肠外强毒力株。大肠杆菌分离株接种小鼠剖检可见明显病变。通过遗传进化分析,引起黑龙江奶牛肠外致病大肠埃希菌主要属于B1种系进化群,为奶牛乳房炎和子宫内膜炎疫苗的研制提供理论依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 子宫内膜炎 大肠埃希菌 种系分类群
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猪流行性腹泻病毒黑龙江分离株ORF3基因的克隆、表达及分子进化分析 被引量:3
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作者 邹德华 郑亮 +6 位作者 程丽鑫 李兴志 张雅婷 徐嘉欣 武雪宁 张华 曹宏伟 《黑龙江八一农垦大学学报》 2018年第3期52-58,共7页
克隆2017年黑龙江省大庆地区流行PEDV毒株(HLJ/DQ/2017)ORF3基因,通过真核表达及分子进化分析方法,为研究ORF3蛋白生物学功能提供重要的实验基础。TRIzol裂解法提取病毒RNA,RT-PCR技术扩增ORF3基因片段并测序,克隆至p EGFP-N1载体上,转... 克隆2017年黑龙江省大庆地区流行PEDV毒株(HLJ/DQ/2017)ORF3基因,通过真核表达及分子进化分析方法,为研究ORF3蛋白生物学功能提供重要的实验基础。TRIzol裂解法提取病毒RNA,RT-PCR技术扩增ORF3基因片段并测序,克隆至p EGFP-N1载体上,转染至HeLa细胞。应用DNAStar、DNAMAN、MEGA5.0软件进行序列比对和发育树绘制,应用Western Blot技术、Immunofluorescence技术检测ORF3蛋白的表达和细胞定位。经过酶切和测序验证p EGFP-N1载体中正确插入了ORF3基因,Western Blot法、Immunofluorescence法证实ORF3-EGFP融合蛋白聚集成核表达在HeLa细胞质的局部,由进化树分析显示,该毒株和2015年黑龙江地区流行的两个株毒株(HLJ/2015/116、HLJ/2015/DP1-1)位于同一群,但相比2011年黑龙江地区爆发的毒株(CH/HLJ/HH-2/2011),前者亲缘关系更近一些。融合蛋白ORF3-EGFP在HeLa细胞中聚集成核表达,遗传进化分析表明,该毒株与2015年黑龙江省流行的PEDV毒株相比无较大变异,且为目前世界最为流行的PEDV毒株类型。 展开更多
关键词 PEDV ORF3蛋白 载体构建 表达定位 进化分析
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