刺五加叶精油的制备及挥发性成分分析

本研究旨在比较水蒸气蒸馏法和超临界CO_(2)萃取法在制备刺五加叶精油方面的得率,并对所提取的精油进行质量分析。以刺五加叶为原料,分别采用上述2种方法提取精油,并利用GC-MS对其挥发性成分进行分析。同时,通过抑菌和抗氧化活性测试评估了所提取精油的生物活性。结果显示,水蒸气蒸馏法得到的刺五加精油得率为0.10%,而超临界CO_(2)萃取法得到的刺五加油的得率为0.47%。经GC-MS分析,从水蒸气蒸馏法制备的刺五加叶精油中共分离出57种成分,其中35种成分得到了鉴定;超临界CO_(2)萃取法制备刺五加叶精油中分离出94种成分,其中57种成分得到了鉴定。抑菌试验结果表明,刺五加叶精油具有一定的抑菌效果。此外,刺五加叶精油也具有较好的抗氧化活性,DPPH自由基清除率为30.7%,IC_(50)值为3.510±0.175μg/mL。综上所述,刺五加叶精油中含有多种芳香成分,这些芳香成分不仅是刺五加叶精油的风味特性,也显示出多样的生物活性。本研究为刺五加叶资源的合理利用及精油的制备提供科学依据。

贝莱斯芽胞杆菌次生抗生物质的研究进展

贝莱斯芽胞杆菌广泛分布于自然界,其次生抗生物质丰富,具有开发新型生物防治剂制剂的潜力。其基因组含有多种抗生物质的生物合成基因簇,如表面活性素、丰原素、杆菌霉素D等脂肽类化合物,杆菌烯、大环内酰亚胺、艰难菌素等聚酮类化合物,以及杆菌素和杆菌溶素等。除杆菌素以外,贝莱斯芽胞杆菌的绝大部分次生抗生物质依赖4′-磷酸泛酰转移酶(Sfp)途径合成。本文归纳和总结了贝莱斯芽胞杆菌抗生物质的化学结构、生物合成基因簇及其调控机制以及他们在控制植物、动物和人类疾病上的应用,以期为今后利用贝莱斯芽胞杆菌及其代谢产物研发生防制剂或临床药物提供科学依据。

不同产地黄芩主要化学成分含量及抗肿瘤活性比较研究

本研究旨在探究不同产地对黄芩的化学成分含量及抗肿瘤活性的影响。通过HPLC色谱法测定黄芩中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量差异,采用CCK-8法检测不同产地的黄芩对抑制A549肺癌细胞增殖的情况。结果表明,不同产地黄芩样品中的化学成分含量有显著差异,黄芩苷含量由高到低为黑龙江勃利>山东莒县>甘肃定西>山西运城,汉黄芩苷含量由高到低为黑龙江勃利>甘肃定西>山东莒县>山西运城,黄芩素含量由高到低为黑龙江勃利>山东莒县>山西运城>甘肃定西,汉黄芩素含量由高到低为黑龙江勃利>山西运城>山东莒县>甘肃定西。综上,黑龙江勃利地区黄芩中的化学成分含量高居于4个产地首位。黄芩提取物对A549肺癌细胞有抑制作用,且抑制作用与其化学成分含量有关,并呈现剂量依赖。实验结果可为寒地黄芩的开发及合理利用药用资源提供一些参考。

快速溶剂萃取技术在2种食药用真菌多糖提取中的应用

为建立快速溶剂萃取技术提取食药用真菌多糖的新方法,以猪苓、茯苓为研究对象,采用单因素及正交实验优选快速溶剂萃取法提取多糖的最佳工艺条件。结果表明,快速溶剂萃取法用于猪苓多糖提取的最佳工艺参数为提取温度110℃,提取压力110 bar,提取时间20 min,循环2次,在此条件下,猪苓多糖的含量为(7.8684±0.1096) mg/g。快速溶剂萃取法提取茯苓多糖的最佳工艺参数是提取温度110℃,提取压力120 bar,提取时间25 min,循环2次,在此条件下,茯苓多糖的含量为(8.6965±0.1087) mg/g。快速溶剂萃取技术能够快速、准确地适用于2种食药用真菌多糖的提取。

刺五加果多糖ASPF的结构表征及其体外抗肺癌活性研究

从刺五加果实体中纯化得到一种均一分子量多糖ASPF,对其结构表征及体外抗肺癌活性进行研究。将提取得到的粗多糖通过DEAE-52柱层析分离得到3个组分,进行体外抗肺癌活性筛选后,将ASPB-3通过Sephadex G-200凝胶柱色谱得到ASPF,选择GPC、IR、HPLC方法对该多糖进行结构解析,并采用CCK-8法研究其对肺癌细胞体外存活率的影响。测得ASPF的糖醛酸含量为22.9%,是一种酸性果胶类结构多糖,其相对分子质量MW为9.7462×10^(4),IR扫描结果显示其具有吡喃环结构,单糖测定结果显示其由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成,对A549细胞存在抑制效果,其机制可能与作用于凋亡基因Bcl-2/Bax有关。ASPF对人肺癌细胞具有一定体外抑制作用。

控制pH值和溶解氧对地衣芽孢杆菌HDYM-04分批发酵产β-甘露聚糖酶的影响

为了探究地衣芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的能力,探究在发酵过程中pH值和溶氧水平对产β-甘露聚糖酶的影响。以地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) HDYM-04为试验菌株,通过3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法)测定酶活力。结果表明,控制pH值至7.0直至发酵结束,在发酵的初始阶段(12~20 h)效果明显,酶活力水平均处于3200 U/mL以上,同时菌体密度达到5.5以上。其次,控制溶氧在25%左右时,保持菌体的生长状态,酶活力高峰持续时间较长(6~20 h保持在3000 U/mL左右)。因此控制pH值7.0,溶氧在25%左右时,在发酵的初始阶段,有良好的产酶能力。

一株纤维素降解菌的筛选与鉴定

为了解决玉米秸秆降解率低下问题,本研究从以氨基酸尾液为氮源的自然发酵堆肥中筛选稳定的纤维素降解菌,为制备高效的秸秆腐熟剂奠定基础。采用刚果红染色法进行初筛、采用纤维素酶活测定及玉米秸秆降解率测定来进行复筛,并通过形态学及分子生物学方法对高效降解菌株进行鉴定。结果表明筛选得到一株高效降解纤维素的菌株SC2,其滤纸酶活、内切葡聚糖酶活、外切葡聚糖酶活和β-葡聚糖苷酶活分别为17.70、58.97、16.85和79.26 U/mL,对玉米秸秆的降解率达到33.07%,根据其菌落特征、产孢结构、孢子形态及ITS序列鉴定SC2为黑曲霉(Aspergillus niger)。菌株SC2具有较好的纤维素降解能力,能够有效的促进秸秆的降解,可以用于制备玉米秸秆腐熟剂。

昆虫体液免疫负向调控因子的研究进展

昆虫种类繁多,不具备获得性免疫而仅依赖进化保守的先天性免疫应答抵御病害,免疫负向调控在昆虫防御病原体入侵和维持免疫稳态方面具有重要作用。为昆虫免疫防御调控深入研究及应用提供参考,从丝氨酸蛋白酶级联放大系统的负向调控、昆虫体液免疫蛋白类效应分子合成与降解的负向调控及昆虫体液免疫模式识别过程的负向调控3个方面对昆虫先天性免疫应答方面的功能特征和研究进展进行总结和归纳,指出了存在的问题,对今后的研究方向进行了展望。

产紫丁香苷内生真菌CJ7的鉴定及发酵条件研究

为高效利用刺五加内生真菌资源,推动紫丁香苷的生产,采用HPLC法,以紫丁香苷为对照,分析内生真菌CJ7的次生代谢产物;采用琼脂糖扩散法,对内生真菌CJ7进行抑菌活性分析,并采用单因素实验及正交实验法对内生真菌CJ7发酵条件进行优选;采用形态学观察及ITS序列分析法对内生真菌CJ7进行菌种鉴定。结果表明,在内生真菌CJ7发酵液中含有紫丁香苷。抑菌活性实验结果表明,内生真菌CJ7对10种致病菌均有较好的抑制作用,尤其对金黄色葡萄球菌抑菌效果较为明显。经优化,CJ7的最佳发酵工艺为培养基中葡萄糖质量浓度2.5%,牛肉膏质量浓度2.0%,初始pH 7.0,装液量40%,接种量2%,培养8天,摇床转数120 r/min,发酵温度28℃。经鉴定,内生真菌CJ7为产烟曲霉(Aspergillus fumigatus)。上述研究说明,内生真菌CJ7为紫丁香苷产生菌。研究结果可为采用微生物发酵法生产紫丁香苷提供参考。

黑木耳凝集素对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究

为解决黑木耳凝集素对RAW246.7细胞分泌IL-6、IL-1β、TNF-α、NO释放量与免疫调节作用的问题,通过40%(NH4)2SO4沉淀法对黑木耳凝集素进行分离提纯,并伴随凝血活性检测、氨基酸组分检测,得到黑木耳凝集素粗品。经过AKTA蛋白纯化系统得到黑木耳凝集素纯品。使用SDS-PAGE电泳对凝集素分子量进行分析。格里斯法检测巨噬细胞RAW264.7分泌NO的情况。ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α的释放量。结果表明,黑木耳凝集素分子量约为20 kDa。通过检测发现,黑木耳凝集素对巨噬细胞RAW264.7分泌细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α有促进作用,且呈现剂量依赖,具有免疫调节的作用。

2种中草药提取物对黑木耳活性成分形成的影响

为研究2种中草药提取物对黑木耳发酵过程中活性成分产生的影响,分别向黑木耳发酵基础培养基中添加不同比例的刺五加及五味子提取液,培养6天后,采用比色法及HPLC法分析黑木耳多糖成分及腺苷含量;同时,采用HPLC法分析黑木耳发酵过程中2种中草药活性成分的含量变化。结果表明:刺五加、五味子的添加量分别为4、3 g/L对黑木耳发酵液中多糖的形成具有显著促进作用;刺五加、五味子的添加量分别为1、6 g/L对黑木耳菌丝体中腺苷的形成具有显著促进作用;在黑木耳发酵过程中,刺五加活性成分紫丁香苷及刺五加苷E降低到无法检测;五味子中木脂素成分存在增减变化。黑木耳发酵过程中存在活性成分的动态变化。

甘草内生菌研究概况

甘草内生菌能够产生与宿主植物相同、相似或全新的活性代谢物。采用内生菌发酵法生产甘草次生代谢物对可持续利用甘草资源及筛选新型活性代谢产物具有重要意义。在过去的几十年,尽管人们对甘草内生菌多样性、分离和鉴定、药理作用、次生代谢产物等方面进行了研究,并取得了一定的成果,但还远远不能满足生产的需要,甘草内生菌作为微生物资源是天然产物的重要来源。本研究综述了甘草内生菌及其次生代谢产物的相关研究,归纳出甘草内生菌可产甘草苷、甘草次酸、甘草素等次生代谢产物,并针对甘草内生菌次生代谢产物研究中存在的问题进行了展望,为合理利用甘草内生菌及进一步开发应用提供参考。

内生真菌发酵对刺五加异嗪皮啶合成的影响

采用内生真菌发酵刺五加以提高其活性成分异嗪皮啶的含量,并对其进行分离纯化。分别选取4株内生真菌对刺五加进行发酵,以异嗪皮啶为对照,采用HPLC法分析发酵样品中异嗪皮啶的含量变化,确定能够定向提高发酵样品中异嗪皮啶含量的目的菌株;采用硅胶柱色谱法分离纯化发酵样品中的异嗪皮啶;采用形态学观察和ITS rDNA序列同源性分析对目的菌株进行种属鉴定。结果表明,内生真菌AJ14能显著提高刺五加发酵样品中异嗪皮啶成分含量。采用硅胶柱色谱法从刺五加发酵样品中分离到异嗪皮啶;经鉴定,目的菌株AJ14为赭曲霉(Aspergillus ochraceus)。采用内生真菌发酵刺五加可定向提高异嗪皮啶的含量,研究结果可为微生物发酵法生产异嗪皮啶提供参考。

甘草产香内生真菌RP2的初步鉴定及挥发性成分分析

为了开发甘草内生真菌RP2次生代谢产物的资源,丰富挥发性香味成分的获取途径,以甘草内生真菌RP2为研究对象,采用形态学观察及ITS序列分析法对其进行菌种鉴定,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对甘草内生真菌RP2挥发性成分进行分析。甘草内生真菌RP2经鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。在甘草内生真菌RP2发酵液中分离并鉴定出11种挥发性成分;在甘草内生真菌RP2菌丝体中分离并鉴定了6种挥发性成分。甘草内生真菌RP2挥发性成分中含有多种现有工业生产中广泛应用的挥发性香味成分,如2-苯基乙醇等。本研究对开发利用甘草内生真菌RP2具有重要意义。

汉麻黄酮类成分研究进展

为了高效利用汉麻黄酮类成分及系统开展汉麻黄酮类化合物的研究,本文综述了汉麻黄酮类化合物的结构、合成途径、生物活性及分析方法。归纳总结出汉麻中共含有26种黄酮类化合物,其主要结构类型以黄酮和黄酮醇为主;此外,在黄酮类化合物经典合成途径的基础上,明确了2种特征性汉麻黄酮成分-大麻黄素A和大麻黄素B的生物合成途径;同时,也总结了汉麻黄酮类化合物具有抗肿瘤、神经保护、抗抑郁等生物活性,并针对其结构特点和活性作用,建立了汉麻黄酮类化合物高效、快速的分析方法为LC-MS等功效。上述归纳可为开展汉麻黄酮类化合物的研究及应用提供参考。

响应面法优化刺五加高产异嗪皮啶的发酵工艺

为提高发酵刺五加中异嗪皮啶的含量,采用单因素实验及响应面法对其发酵条件进行优化。采用单因素实验,分别测定发酵时间、初始pH、发酵温度、摇床转速、发酵菌株AJ14的菌悬液加入量及底物质量浓度对发酵刺五加中异嗪皮啶含量的影响,以获取单因素实验的最优值,然后采用响应面法中的Box-Behnken设计模块,分析初始pH、发酵温度、发酵菌株AJ14的菌悬液加入量3个自变量及其交互作用对异嗪皮啶得率的影响,确定最佳发酵工艺。结果表明,在初始pH 7.5、发酵温度27℃、发酵菌株AJ14菌悬液(1×10^(7) CFU/mL)加入量6 mL的条件下,异嗪皮啶含量为(0.6629±0.0007)mg/g,与预测值的相对误差较小。研究结果可为采用微生物发酵法高效生产异嗪皮啶奠定基础,也可为其他中药发酵工艺提供数据参考。

产油单针藻的最适培养基筛选及产油特性提升

为了研究培养基种类及成分对单针藻产油特性的影响,充分挖掘单针藻产油潜能,以Monoraphidium sp.HDMA-11为供试藻株,以细胞数监测、干重法和尼罗红染色法检测了BG-11培养基、BBM培养基、TAP培养基、D1培养基和SE培养基对藻株生长速度、生物量及含油量的影响,并对藻株可利用的碳源、氮源种类及浓度进行筛选与优化。结果表明,TAP培养基可极大缩短藻株培养周期,使藻株生物量生产率提升了127%,油脂生产率提升了117%。当乙酸添加量为2 mg/L,氯化铵浓度为750 mg/L,藻株的产油指标进一步提高。优化后藻株的生物量生产率为70 mg/(L·d),较初始培养条件提升了218%,优化后藻株的油脂生产率为315 RFU/(L·d),较初始培养条件提升了116%。本研究优化了Monoraphidium sp.HDMA-11的培养条件,明确了乙酸和氯化铵浓度对藻株生长特性及产油指标的影响,为进一步挖掘藻株产油潜能提供了数据支持。

灵杆菌脂多糖的研究进展

灵杆菌脂多糖是粘质沙雷氏菌细胞壁中提取的中性脂多糖,可刺激机体先天免疫系统释放多种免疫活性因子,具有增强机体免疫、抗肿瘤、抗炎、抗感染等功能。当灵杆菌脂多糖进入机体后,首先与LBP相结合,LBP将灵杆菌脂多糖运送到免疫细胞的膜表面,随后CD14将灵杆菌脂多糖转运至TLa4及MD-2蛋白复合体,进而调节免疫系统发挥功能。该文对灵杆菌脂多糖的来源、结构、作用机制及相关受体及应用等方面进行总结和归纳,并提出目前存在的问题,在此基础上分析了灵杆菌脂多糖开发应用前景。