柚皮苷对H_2O_2诱导H9c2心肌细胞损伤保护作用

目的探讨柚皮苷对H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法体外培养H9c2心肌细胞,用H_2O_2诱导建立细胞凋亡模型。实验设对照组、模型组、柚皮苷低、中、高剂量组(10、20、40μmol/L),噻唑蓝法检测细胞活力并用显微镜观察各组细胞形态;原位末端标记法检测H9c2心肌细胞凋亡情况;RT-PCR及Western blot法检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax、caspase-3 m RNA及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组细胞凋亡率[(17.2±2.1)%]明显升高(P<0.01);与模型组比较,10、20、40μmol/L柚皮苷组细胞凋亡率[分别为(10.7±1.9)%、(5.7±1.2)%、(6.4±1.5)%]均下降(均P<0.05)。与对照组比较,模型组H9c2心肌细胞Bcl-2蛋白表达水平(0.76±0.16)明显下调,Bax、caspase-3蛋白表达水平[分别为(5.42±0.52)、(1.09±0.11)]均上调(均P<0.01);与模型组比较,10、20、40μmol/L柚皮苷组H9c2心肌细胞Bcl-2蛋白表达水平[分别为(1.37±0.11)、(1.65±0.09)、(1.65±0.15)]均上调,Bax、caspase-3蛋白表达水平[分别为(2.78±0.55)、(3.43±0.15)、(2.69±0.26)和(0.59±0.08)、(0.77±0.06)、(0.82±0.05)]均下调(均P<0.05)。结论柚皮苷对H_2O_2诱导的H9c2心肌细胞损伤具有一定保护作用,其机制可能与其对凋亡信号途径的抑制作用有关。

微小RNA-146a转染的H9c2心肌细胞高糖培养下核因子-κBp65和Ⅰ型胶原的表达

目的观察微小RNA(miRNA)-146a转染H9c2心肌细胞高糖培养下核因子-κBp65(NF-κBp65)和Ⅰ型胶原表达。方法高糖培养H9c2细胞系,分为增强组(EC)、阴性对照组(NC)、空白对照组(BC)。采用Lipofectamine 2000Transfection Reagent分别转染miRNA-146a增敏剂(50nmol/L)、错义链(50nmol/L)、PBS,于48h后Real-time PCR测定miRNA-146a水平,Western blot测定NF-κBp65和Ⅰ型胶原水平。结果转染后,EC组H9c2细胞miRNA-146a水平高于NC组和BC组(P<0.05),NF-κBp65和Ⅰ型胶原蛋白表达量低于NC组和BC组(P<0.05)。结论 miRNA-146a参与了高糖培养H9c2心肌细胞纤维化,其机制与NF-κBp65和Ⅰ型胶原表达有关。