欧前胡素调节HMGB1-RAGE-NF-κB信号通路对高糖诱导的视网膜内皮细胞损伤的影响

该研究探讨欧前胡素(IMP)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终产物受体(RAGE)-核转录因子κB(NF-κB)信号通路对高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤的影响。使用10~320μmol/L的IMP处理高糖诱导的视网膜血管内皮细胞hRECs,筛选最佳药物浓度;将视网膜血管内皮细胞hRECs细胞分为正常糖组(NG组,5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组,25 mmol/L葡萄糖)、低浓度欧前胡素组(IMP-L组,25 mmol/L葡萄糖+20μmol/L IMP)、中浓度欧前胡素组(IMP-M组,25 mmol/L葡萄糖+40μmol/L IMP)、高浓度欧前胡素组(IMP-H组,25 mmol/L葡萄糖+80μmol/L IMP)、高浓度欧前胡素+重组HMGB1蛋白组(IMP-H+rHMGB1组,25 mmol/L葡萄糖+80μmol/L IMP+200μg/L rHMGB1)。CCK-8试剂盒检测hRECs细胞活性;流式细胞仪检测hRECs细胞凋亡的情况;管腔形成实验检测细胞血管生成;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、MDA水平和SOD水平;Western blot检测HMGB1-RAGE-NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果显示,IMP可以促进高糖诱导的hRECs增殖,且呈浓度依赖性,选择浓度为20、40、80μmol/L的IMP进行后续实验;与NG组比较,HG组细胞存活率、SOD活性降低,细胞凋亡率,管腔形成数,IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、RAGE、NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05);与HG组比较,IMP-L组、IMP-M组、IMP-H组细胞存活率、SOD活性升高,细胞凋亡率,管腔形成数,IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、RAGE、NF-κB p65蛋白表达水平降低,且呈浓度依赖性(P<0.05);与IMP-H组比较,IMP-H+rHMGB1组细胞存活率、SOD活性显著降低,细胞凋亡率,管腔形成数,IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、RAGE、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结果表明,IMP可能通过抑制HMGB1-RAGENF-κB信号通路,降低炎症反应和细胞凋亡水平,进而减轻高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤。