地黄饮子对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞RACE／p3aMAPK／NF—κB信号通路的影响

目的探讨地黄饮子对β-淀粉样蛋白1-42（Aβ1-42）诱导的人神经母细胞瘤细胞株（SH-SY5Y）晚期糖基化终产物受体（RAGE）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/核转录因子kappa-B（NF-κB）信号通路的影响。方法将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组及给药组（每组20只），分别配制正常血清培养液及地黄饮子含药血清培养液。（1）将SH-SY5Y细胞分为3组，其中对照组采用正常血清培养液培养，模型组采用正常血清培养液＋Aβ1-42寡聚体培养，地黄饮子组采用地黄饮子含药血清培养液＋Aβ1-42寡聚体培养。采用Western blotting检测各组SH-SY5Y细胞NF-κB p65、p38、磷酸化（p）-p38蛋白表达。（2）将SH-SY5Y细胞单独设为转染RAGE地黄饮子组，于Aβ1-42寡聚体作用不同时间（15 min、30 min、60 min、12 h、24 h、48 h、72 h）时，采用Western blotting检测各时间点SH-SY5Y细胞p-p38、p38蛋白表达。（3）将SH-SY5Y细胞分为6组，其中模拟转染RAGE对照组采用正常血清培养液＋空载体质粒转染培养，转染RAGE对照组采用正常血清培养液＋RAGE质粒转染培养，模拟转染RAGE模型组采用正常血清培养液＋Aβ1-42寡聚体＋空载体质粒转染培养，转染RAGE模型组采用正常血清培养液＋Aβ1-42寡聚体＋RAGE质粒转染培养，模拟转染RAGE地黄饮子组采用地黄饮子含药血清培养液＋Aβ1-42寡聚体＋空载体质粒转染培养，转染RAGE地黄饮子组培养方法同前。采用ELISA法和流式微球分析（CBA）法检测各组SH-SY5Y细胞炎症因子白介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α含量。结果（1）与模型组比较，地黄饮子组SH-SY5Y细胞NF-κB p65蛋白、p-p38/p38表达水平明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。（2）p-p38蛋白表达水平在Aβ1-42作用30 min时开始明显升高，持续至24 h时表达最高，48 h时开始出现下调趋势。（3）模拟转染RAGE模型组和转染RAGE模型组比较，模拟转染RAGE地黄饮子组和转染RAGE地黄饮子组比较，后者IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显升高，差异均有统计学意义（P〈 0.05）。与模拟转染RAGE模型组比较，模拟转染RAGE地黄饮子组IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。与转染RAGE模型组比较，转染RAGE地黄饮子组IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论地黄饮子通过抑制Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞RAGE/p38 MAPK/NF-κB信号通路，改善炎症反应，起到细胞保护作用。