硫化氢对去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大SD乳鼠的心肌保护作用机制研究

目的观察硫化氢对去甲肾上腺素(NE)诱导的心肌细胞肥大SD乳鼠的心肌保护作用,并探讨其机制。方法利用胶原酶消化分离培养SD大鼠乳鼠的心肌细胞,设置硫化氢组(100μmol/L NE+10μmol/L硫氢化钠)、模型组(100μmol/L NE+等量生理盐水)、对照组(等量生理盐水+等量生理盐水)、硫化氢对照组(等量生理盐水+10μmol/L硫氢化钠)。观察乳鼠原代心肌细胞光镜下变化;培养3 d后观察各组心肌细胞形态学变化,检测心肌细胞表面积、增殖和凋亡率,检测并对比丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量,对比鞘氨醇激酶1(Sph K1)、1-磷酸鞘氨醇受体1(S1P1)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B (AKT) mRNA和Sph K1、S1P1蛋白的相对表达量、磷酸化PI3K (p-PI3K)/PI3K、磷酸化AKT (p-AKT)/AKT蛋白表达相对值。结果培养期间细胞逐渐趋于心肌细胞的特性;对照组心肌细胞均正常生长,硫化氢对照组与对照组相近,模型组严重异常;心肌细胞表面积、凋亡率、MDA含量、Sph K1、S1P1 mRNA的相对表达量、Sph K1、S1P1蛋白的相对表达量比较,模型组最高,硫化氢组次之,对照组和硫化氢对照组均最低; OD值、SOD含量、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达相对值比较,对照组最高,硫化氢组次之,模型组最低,除对照组和硫化氢对照组差异无统计学意义(P> 0. 05),上述指标其余两组间对比差异均有统计学意义(P <0. 05);各组PI3K、AKT mRNA的相对表达量差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论硫化氢能够控制NE诱导的心肌细胞肥大病变,促进增殖、抑制凋亡,减轻心肌细胞氧化应激损伤,推测与通过S1P/S1P1信号通路降低Sph K1、S1P1表达,上调p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达相对值有关。