麻黄-细辛药对提取物对哮喘模型小鼠气道重塑的影响

目的探讨麻黄-细辛药对提取物对哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法将30只Balb/c小鼠分为对照组、模型组、麻黄-细辛组,各10只。除对照组外,其他两组建立哮喘小鼠模型。建模后第18天起给予麻黄-细辛组麻黄-细辛药对提取物雾化吸入治疗,给予对照组和模型组小鼠等体积生理盐水雾化吸入。观察各组小鼠肺组织形态,检测各组小鼠增强呼气间歇值(Penh),肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中各类白细胞比例,BALF和血清的白细胞介素(IL)-6和IL-17水平,以及肺组织的Yes相关蛋白(YAP)、YAP mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果各组小鼠吸入相应浓度乙酰甲胆碱后,模型组小鼠Penh均高于对照组,麻黄-细辛组小鼠Penh均低于模型组(均P<0.05)。模型组小鼠的BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞比例,BALF和血清中IL-6及IL-17水平,以及肺组织中TGF-β1蛋白和α-SMA表达水平,YAP及其mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05);与模型组比较,麻黄-细辛组上述指标水平均降低(均P<0.05)。结论麻黄-细辛药对提取物能够减轻哮喘模型小鼠的气道反应性和炎症反应,并可能通过下调IL-17、IL-6、TGF-β1、α-SMA、YAP等因子的表达而抑制哮喘模型小鼠的气道重塑。

不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响

目的探讨不同剂量的地龙提取物对肺纤维化小鼠肺组织波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白表达水平及纤维化程度的影响。方法将90只C57雄性小鼠分为空白组、模型组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,每组18只。除空白组外,其余4组通过腹腔注射百草枯建立肺纤维化模型。建模后1周,分别给予高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠灌服80 mg/(kg·d)、40 mg/(kg·d)、20 mg/(kg·d)的地龙提取物,给予空白组和模型组灌服等量的生理盐水,干预14 d。于建模后第14天、第21天和第28天,检测各组小鼠肺组织波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平;建模后第21天,采用HE染色法和Masson染色法分别观察小鼠肺组织纤维化及胶原沉积情况。结果建模后第14天、第21天及第28天,模型组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均高于空白组(均P<0.05);建模后第21天、第28天,高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠肺组织的波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白表达水平均低于模型组(均P<0.05);建模后第28天,高剂量组小鼠肺组织的波形蛋白表达水平低于低剂量组,且α-平滑肌肌动蛋白表达水平均低于中剂量组与低剂量组(均P<0.05)。HE染色和Masson染色结果显示,模型组小鼠肺组织结构异常,正常肺泡结构消失,肺泡壁明显增厚,成纤维细胞增生明显,肺泡间隔和间质均可见到大量蓝色沉淀;相较于模型组,高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠肺部纤维化程度及胶原纤维沉淀程度明显减轻,肺泡结构相对完整,且高剂量组改善更明显。结论地龙提取物能有效抑制肺纤维化小鼠肺组织中波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白的表达,减少肺组织胶原沉积,延缓肺纤维化的进程,且高剂量[80 mg/(kg·d)]地龙提取物的改善效果更明显。

基于成纤维细胞的激活JAK2/STAT3信号通路探讨生地黄提取物对过敏性紫癜的机制研究

目的 探讨生地黄对过敏性紫癜(HSP)小鼠可能的作用机制研究。方法 将60只SPF级雄性实验小鼠,平均随机分成对照组、模型组、西咪替丁组(0.1 g/mL)、生地黄提取物低、中、高剂量组(10、20、30 mg/mL)。除对照组小鼠外,其余小鼠造模HSP,成功后按实验要求每日灌胃等量对应生地黄提取物,模型组和对照组灌胃等量生理盐水,连续21 d。结束后,采用碘酸雪夫染色肾脏组织的病理学变化,采用ELISA试剂盒检测小鼠血清IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-10水平,Western blot法检测小鼠肾组织中p-JAK2(Janus Kinase 2,JAK2)、p-STAT3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白相对表达。结果 西咪替丁组和生地黄提取物组病理评分都明显远低于模型组,给药后小鼠肾脏组织学损害显著减轻。与对照组比较,模型组小鼠IFN-γ、IL-2表达均明显降低,IL-4、IL-10表达均明显升高(P <0.05);与模型组比较,西咪替丁组、生地黄提取物低、高剂量组小鼠IFN-γ、IL-2水平均升高,IL-4、IL-10水平均降低(P <0.05),且与生地黄提取物低、中剂量组相比,生地黄提取物高剂量组表达更明显(P <0.05)。与对照组相比,模型组小鼠肾组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均显著升高(P <0.01);生地黄提取物高剂量组小鼠肾组织中p-JAK2、p-STAT3蛋白表达明显低于西咪替丁组、生地黄提取物低、中剂量组(P <0.05)。结论 生地黄提取物具有显著的抗氧化活性和抗炎作用,可减轻HSP小鼠的症状,其作用机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活,从而调节p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达水平有关。

补益肺肾汤对哮喘模型大鼠血清及肺组织炎症因子的影响

目的观察补益肺肾汤对哮喘模型大鼠血清及肺组织炎症因子的影响。方法将105只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、生理盐水组、补益肺肾汤高剂量组、补益肺肾汤中剂量组、补益肺肾汤低剂量组、异丙肾上腺素组,每组15只。对模型组及各治疗组大鼠,应用氢氧化铝联合卵清蛋白进行致敏及激发,建立哮喘模型。于每次激发前30 min,低、中、高剂量补益肺肾汤组分别给予不同剂量的补益肺肾汤(每毫升含0.5 g、1.0 g、2.0 g生药)灌胃,生理盐水组给予同体积的生理盐水灌胃,异丙肾上腺素组给予尾静脉注射盐酸异丙肾上腺素。末次激发后处死大鼠,检测血清IgE、白细胞介素(IL)-4,以及肺组织IL-2、IL-4、IL-5、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,并观察肺组织核因子κB活化情况。结果正常对照组和各剂量补益肺肾汤组血清IgE和IL-4水平,肺组织IL-2、IL-4、IL-5、TNF-α和核因子κB水平均低于模型组(均P<0.05),且补益肺肾汤中、高剂量组上述指标均低于补益肺肾汤低剂量组(均P<0.05)。结论补益肺肾汤可降低哮喘大鼠血清及肺组织的炎症因子水平,从而减轻气道炎症反应,其中中、高剂量的效果更好。

橘皮苷对百草枯诱导小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制

目的分析橘皮苷对百草枯诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及可能机制。方法将60只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、橘皮苷高剂量组、橘皮苷中剂量组、橘皮苷低剂量组和地塞米松组,每组10只。正常组给予生理盐水一次性灌胃,其余组各给予百草枯水溶液(100 mg/kg)一次性灌胃建模。建模1周后,地塞米松组给予腹腔注射地塞米松,橘皮苷高、中、低剂量组分别给予0.10 mL/10 g、0.06 mL/10 g、0.03 mL/10 g的橘皮苷灌胃,正常组及模型组均给予等容量的生理盐水。给药3周后,检测各组血清转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ-干扰素水平,取肺组织观察组织病理变化,并检测肺组织丙二醛和髓过氧化物酶(MPO)水平、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达水平。结果(1)与正常组相比,模型组血清TGF-β1、TNF-α、丙二醛和MPO水平升高,血清γ-干扰素水平下降(均P<0.05);与模型组相比,橘皮苷不同剂量组和地塞米松组血清TGF-β1、TNF-α、丙二醛和MPO水平均降低,橘皮苷高/中剂量组和地塞米松组血清γ-干扰素水平均升高(均P<0.05);与地塞米松组、橘皮苷低/中剂量组相比,橘皮苷高剂量组的血清TGF-β1、TNF-α、丙二醛、MPO水平更低,γ干扰素水平更高(均P<0.05)。(2)模型组肺组织中p-Akt、p-ERK蛋白表达水平高于正常组(均P<0.05);与模型组相比,地塞米松组肺组织中p-Akt、p-ERK蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05),橘皮苷不同剂量组肺组织中p-Akt、p-ERK蛋白相对表达水平降低(均P<0.05);橘皮苷高剂量组肺组织中p-Akt蛋白表达水平低于地塞米松组和其他剂量组,且p-ERK蛋白表达水平低于地塞米松组和橘皮苷低剂量组(均P<0.05)。结论橘皮苷对百草枯导致的小鼠肺纤维化具有改善作用,这可能与其抗氧化应激作用以及通过调控蛋白激酶B/细胞外信号调节激酶信号通路发挥抗炎反应有关。

补益肺肾汤对变应性哮喘大鼠模型Th1/Th2的影响

目的观察补益肺肾汤对变应性哮喘大鼠模型辅助性T淋巴细胞(helper T cell,Th)1/Th2的影响,探讨其治疗变应性哮喘的作用机制。方法选取60只雄性SD大鼠,将其随机分成正常对照组、模型组、生理盐水组、补益肺肾组,每组15只,采用0.5%磷酸组胺溶液超声雾化法复制变应性哮喘大鼠模型,最后一次激发后处死大鼠,收集血清和支气管肺泡灌洗液(broncho alveolar lavage fluid,BALF),采用酶联免疫吸附法检测大鼠血清免疫球蛋白E(immunoglobin E,IgE)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)和干扰素γ(interferon-gamma,IFN-γ)水平,用流式细胞仪检测脾Th1、Th2细胞比例。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清IgE和IL-4水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,补益肺肾组血清IgE和IL-4水平均显著降低(P<0.05);补益肺肾组大鼠血清IgE和IL-4水平显著低于生理盐水组(P<0.05)。与模型组比较,生理盐水组和补益肺肾组大鼠BALF中IL-4水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平明显上升(P<0.05);补肾益肺组大鼠BALF中IFN-γ水平显著高于生理盐水组(P<0.05)。与模型组比较,生理盐水组和补益肺肾组大鼠脾中Th1/Th2明显上升(P<0.05);补肾益肺组大鼠脾中Th1/Th2显著高于生理盐水组(P<0.05)。结论补益肺肾汤可能通过下调IL-4水平和提高IFN-γ水平,调节变应性哮喘大鼠体内Th1/Th2失衡。