花生粕在水产动物饲料中应用研究进展

花生粕是优质的植物蛋白原料,具有花生的香味,适口性较好,营养价值高等优势,但由于易受黄曲霉菌污染,释放大量毒素,对动物生产造成严重的伤害。而花生粕经发酵、酶解及菌酶协同发酵技术处理,能够改善其饲用品质,提高其在饲料中的利用率。本文对花生粕的营养价值、花生粕在水产动物饲料中的应用及花生粕未来应用前景等三个方面进行综述,为花生粕在水产饲料中的合理应用奠定基础。

小球藻的营养价值及其在水产动物饲料中的应用

小球藻(Chlorella)是一种单细胞绿藻,含有较高的蛋白质、多种矿物质和微量元素。在水产动物饲料中作为植物蛋白源,营养物质丰富且分布广泛,在促进鱼类生长、提高免疫力中发挥重要作用。饲料中添加小球藻可以替代部分鱼粉,提高营养价值。近年来,随着微藻的大力推广,小球藻逐渐成为优质的饲料添加剂。文章简述了小球藻的营养组成、适宜添加水平以及对鱼类生长性能、消化能力、免疫和体色影响等。

水产动物苏氨酸营养免疫研究进展

苏氨酸是动物体内代谢途径中唯一不经过脱氨基和转氨基作用的氨基酸。苏氨酸作为水产动物生长所需的必需氨基酸,在促进机体生长、强化体蛋白质合成及增强机体免疫力等方面发挥着重要作用。本文主要就水产动物对苏氨酸营养需求,苏氨酸对肉质、蛋白质代谢、消化吸收、抗氧化能力、免疫功能的影响进行了综述,以期为苏氨酸在水产动物营养免疫与健康养殖方面的进一步研究奠定理论基础。

水产动物异亮氨酸营养研究进展

异亮氨酸是支链氨基酸中唯一的生糖兼生酮氨基酸,对水产动物的生长、发育和代谢起着重要作用。本文从水产动物异亮氨酸需要量、异亮氨酸与其他支链氨基酸之间的相互作用以及异亮氨酸对水产动物营养健康等方面的作用进行综述,以期为异亮氨酸在水产动物饲料中的应用提供参考。

水产动物色氨酸研究进展

色氨酸是一种中性、芳香族氨基酸,是5-羟色胺、褪黑素、烟酸等代谢物的前体物质,也是水产动物生长和健康的必需氨基酸。色氨酸除蛋白质合成功能外,还具有调控摄食量、缓解应激反应及提高免疫、抗氧化能力等生理生化功能。本文就色氨酸的代谢途径、水产动物对色氨酸的需要量及色氨酸对摄食、免疫等方面的调控进行综述,以期为色氨酸在水产动物中的研究与应用提供参考。

水产动物蛋氨酸营养研究进展

蛋氨酸作为水产动物正常生长、代谢的必需氨酸,是低鱼粉饲料的主要限制性氨基酸,在合成蛋白质、提供甲基、生成半胱氨酸中发挥重要作用。蛋氨酸也是机体内多胺、肌酸、磷脂酰胆碱、谷胱甘肽、牛磺酸及辅酶A等生物合成的前体物质。本文综述了蛋氨酸的代谢途径、水产动物蛋氨酸的需求量、蛋氨酸与其他营养素的相互作用及其对水产动物健康的影响,以期为蛋氨酸在水产动物中开展深入研究提供参考。

传染性胰脏坏死病酵母展示疫苗的免疫效果评价

为了评价前期构建的传染性胰脏坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)VP2蛋白酵母展示疫苗(EBY100/pYD1-VP2)的免疫保护效果,以虹鳟Oncorhynchus mykiss为试验动物分析了口服免疫的保护效力,利用流式细胞仪和细胞免疫荧光检测方法确定疫苗株的最佳诱导时间为60 h,然后大量制备酵母口服疫苗,分别利用单次和多次口灌的方式对虹鳟进行免疫;单次免疫为连续免疫7 d,多次免疫为单次免疫一周后再以相同剂量免疫7 d,免疫剂量均为每天100μL疫苗菌(1×10^10 CFU/mL),同时设置空载体酵母菌免疫组和PBS模拟免疫组,通过免疫相关基因定量、中和抗体滴定及攻毒后IPNV病毒载量分析口服疫苗的保护效果。结果表明:疫苗株免疫组虹鳟头肾、后肠中的免疫相关基因IgM、IgT、CD4、CD8在各时间点的表达量均显著高于空载体酵母菌免疫组和PBS模拟免疫组(P<0.05),且与单次免疫组相比,多次免疫组免疫相关基因表达量显著升高(P<0.05);在疫苗株免疫组虹鳟血清中均发现了中和抗体,其中,多次免疫组各时间点血清中和抗体效价均高于单次免疫组,免疫后第49天时IPNV中和抗体效价达到最高(39.28);病毒载量分析显示,各时间点疫苗株免疫组VP1和VP2基因表达量显著低于空载体酵母免疫组(P<0.05),并且在第14天、第21天时,疫苗株单次免疫组VP1和VP2基因表达量分别为疫苗株多次免疫组基因表达量的2.25、3.33倍(VP1)和2.67、2.80倍(VP2)。研究表明,该口服疫苗可诱导虹鳟产生非特异性和特异性免疫应答,对虹鳟具有显著的免疫保护作用。

水产动物亮氨酸营养研究进展

亮氨酸作为支链氨基酸中唯一的生酮氨基酸,是水产动物的必需氨基酸之一,对水产动物的营养生理作用至关重要。本文综述了水产动物亮氨酸需求量、亮氨酸与其他氨基酸的相互作用、亮氨酸对蛋白质代谢、抗氧化能力、免疫功能、肠道发育的影响,以期为亮氨酸在水产动物营养需求、功能机理与健康养殖方面的深入研究提供参考。

水产动物缬氨酸营养研究进展

缬氨酸为支链氨基酸,是水产动物的必需氨基酸之一,对水产动物的营养生理作用至关重要。本文综述了水产动物缬氨酸的需要量、缬氨酸与其他支链氨基酸的相互作用以及缬氨酸对蛋白质代谢、免疫性能、抗氧化功能、肠道健康的影响,并进行了水产动物对缬氨酸需要量的剂量响应分析,以期为缬氨酸在水产动物营养需求、功能机理与健康养殖方面的深入研究提供参考。

水产动物苯丙氨酸研究进展

苯丙氨酸(Phe)是鱼类不能靠自身代谢合成的几种必需氨基酸之一,属芳香族氨基酸。Phe的营养和生理活性已被广泛应用于畜牧、医药和食品等领域,但Phe在水产动物中的生理活性机制尚不明晰。本文对Phe的合成与代谢、水产动物需求量及其在水产养殖中的应用作一综述,为全面了解各类水产动物对Phe的营养需求、代谢机制提供参考。

水产动物牛磺酸营养研究进展

牛磺酸在水产动物体内常以含硫游离氨基酸或小分子二肽或三肽的形式存在,其主要生物学功能在于调节机体正常生理机能,如形成结合胆汁酸、调节渗透压、维持细胞膜稳定性及提升抗氧化能力等。在“缺乏牛磺酸的植物性蛋白源及某些新型蛋白源广泛应用于水产饲料”的背景下,水产动物牛磺酸营养研究逐步受到重视。文章综述了水产动物牛磺酸的来源、水产动物牛磺酸的合成能力、水产动物牛磺酸营养需求量、牛磺酸参与水产动物营养物质代谢、牛磺酸对水产动物健康的影响、牛磺酸与其他营养物质的相互作用,以期为牛磺酸在水产动物营养免疫与健康养殖方面的进一步研究提供科学理论基础。

虹鳟fabp10基因真核表达载体构建、生物信息学及组织表达分析

为探究虹鳟(Oncorhynchus mykiss)脂肪酸结合蛋白10(fatty acid binding protein 10,fabp10)基因序列信息及其所编码蛋白的结构和功能等,本试验根据Gen Bank数据库公布的河鳟(Salmo trutta)fabp10基因的CDS序列信息设计引物,通过RT-PCR获得fabp10基因片段,将目的片段与pMD-18-T载体连接转化DH5α感受态细胞,构建pMD-18-T-fabp10克隆载体,双酶切回收基因片段,构建pcDNA3.1-fabp10真核表达载体,分析fabp10基因在虹鳟不同组织中的表达,经双酶切、测序鉴定构建成功。将表达载体转染至EPC细胞,分别于24h、36 h、48 h后收集细胞进行荧光定量PCR检测。结果显示:虹鳟fabp10基因CDS区与Gen Bank数据库中Salmo trutta fabp10基因CDS区同源性高达100%。生物信息学分析发现,fabp10基因编码区全长378 bp,编码126个氨基酸。Fabp10蛋白主要分布在细胞质中,存在23个潜在磷酸化位点。转染pcDNA3.1-fabp10可显著提高EPC细胞中fabp10 m RNA的表达(P<0.05)。RT-q PCR结果显示:fabp10基因在肝脏中表达丰度最高,随之为肾脏、肌肉、肠、脾脏、心脏,在脑中表达量最低。本试验成功扩增出fabp10基因CDS区并构建了真核表达载体,成功预测分析了其结构和功能,为研究虹鳟机体脂质代谢过程提供了基础。

鱼源抗菌肽的分子设计与优化策略及其应用研究进展

抗菌肽因广谱抗菌性、热稳定性、不易产生耐药性等优点成为极具潜力的抗生素替代物。然而,天然抗菌肽活性差、毒性高、合成成本昂贵等问题限制了其进一步应用。近年来,天然抗菌肽的分子改造与设计成为国内外学者的研究热点。鱼类是天然抗菌肽的重要来源,本文综述了近年来鱼源抗菌肽的作用机制、分子设计与优化策略和在水产养殖中的应用,旨在提供对鱼源抗菌肽的全面了解和认识,为鱼源抗菌肽的开发和应用提供新思路。

饲料浮萍水平对黄金锦鲤形体及体色的影响

本试验以初重(52.99±1.95)g黄金锦鲤为研究对象,研究浮萍对其形体及体色的影响。在饲料中分别添加0%、3%、6%、9%、13%、14%的浮萍,相应替代同等水平的菜籽粕,制成6组等氮(粗蛋白质:38.5%~38.6%)等能(12.2 MJ/kg)饲料,分别记为D1、D2、D3、D4、D5、D6。将540尾健康的黄金锦鲤随机分成6组(每组3个平行,每个平行30尾鱼),养殖时间8周。形体指标的结果表明:D4组与D6组的体长/体高表现最为理想,显著低于其他各组(P<0.05)(D6组相比D1组显著降低6.67%);空壳率(DOR)与肥满度(CF)均以D6组显著高于其他组(P<0.05)(显著提高17.14%~20.82%);色素指标结果显示:体表白度值(L^(*))随养殖时间的增长呈现下降的趋势,黄度值(b^(*))在养殖第四周时显著高于其他阶段(P<0.05),体表各组织总类胡萝卜素含量高低顺序为背鳍>皮肤>鳞片>肌肉,且各组织总类胡萝卜素含量随紫背浮萍添加量提高呈上升趋势,D6组显著高于其他组(P<0.05)(相较于D1组上升50.00%~587.27%)。研究表明,本试验条件下,饲料浮萍添加水平在14%时,有利于黄金锦鲤体型趋于美观,达到体表增色的效果。

饲料精氨酸水平对松浦镜鲤幼鱼生长、抗氧化能力和肠道消化酶活性及其组织学结构的影响

在水温(23±1)℃下,将360尾初始体质量为(6.84±0.02)g的松浦镜鲤(Cyprinus carpio Songpu),随机分为5组,每组4个重复,饲养在200 L控温循环水族箱中,饲喂以鱼粉和酪蛋白为蛋白源(含蛋白32.24%)、鱼油和豆油为脂肪源(含6.12%)、用甘氨酸调节氮平衡的等氮等能饲料精氨酸水平分别为0%(A0)、0.6%(A0.6)、1.2%(A1.2)、1.8%(A1.8)和2.4%(A2.4),探讨饲料精氨酸水平对松浦镜鲤幼鱼生长、肠道消化酶活性、抗氧化能力及肠道组织形态的影响。结果表明:添加精氨酸各组松浦镜鲤的特定增长率(SGR)和末体质量(FBW)显著高于对照组;A1.2组和A1.8组肠体指数显著高于A0组(P<0.05),A1.8和A2.4组的肠长指数显著高于A0组(P<0.05);A2.4组松浦镜鲤前肠蛋白酶活性显著高于A0、A0.6和A1.2组(P<0.05),A1.8和A2.4组后肠蛋白酶活性显著高于A0组(P<0.05);A1.8和A2.4组前肠和中肠脂肪酶活性显著高于A0组(P<0.05)。A1.8组中肠淀粉酶活性显著高于A0组(P<0.05);A1.2组前肠和中肠过氧化氢酶(CAT)活性显著高于A0组(P<0.05);A2.4组前肠总抗氧化能力(T-AOC)显著高于其他各组(P<0.05),A2.4组后肠和A1.8组中肠T-AOC显著高于A0组(P<0.05);A2.4组前肠和中肠超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组(P<0.05);A1.8和A2.4组前肠和后肠谷胱甘肽(GSH)含量显著高于对照组(P<0.05),A2.4组中肠GSH含量显著高于A0、A0.6和A1.2组(P<0.05)。A2.4组前肠和中肠一氧化氮合酶(NOS)活性显著高于其他各组(P<0.05),各添加组后肠NOS和SOD活性显著高于对照组(P<0.05)。添加精氨酸显著增加了前肠皱襞高度(P<0.05),A1.8组和A2.4组中肠和后肠皱襞高度显著高于A0组(P<0.05);A1.8和A2.4组的中肠绒毛宽度显著高于A0组(P<0.05)。A1.2组中肠肌层厚度显著高于其他各组(P<0.05),A1.8组后肠肌层厚度显著高于A0组(P<0.05)。综上,饲料中添加1.8%~2.4%的精氨酸可以提高松浦镜鲤幼鱼肠道消化吸收能力和抗氧化能力,促进松浦镜鲤的肠道发育。

11株鲑源嗜冷黄杆菌药物敏感性分析

【目的】由嗜冷黄杆菌(Flavobacterium psychrophilum)引起的细菌性冷水病是造成国内外鲑科鱼类养殖巨大经济损失的细菌性疾病之一。通过对我国东北地区临床分离的鲑源嗜冷黄杆菌的药敏特性进行比较分析,以期对该菌引发疾病的防治提供基础数据和用药指导。【方法】采用微量肉汤稀释法检测11株嗜冷黄杆菌分离株对20种抗菌药物的敏感性,并进一步探讨其药物敏感性与时空分布和宿主的关联性。【结果】分离株普遍对链霉素、甲氧苄啶敏感性低,对利福平、呋喃唑酮等敏感;分离自黑龙江省的菌株对链霉素和甲氧苄啶的药物敏感性较低,MIC值分别达到32μg/mL(50%)和16μg/mL(75%);吉林省菌株对链霉素、甲氧苄啶的药物敏感性较低,分别达到32μg/mL(33.3%)和16μg/mL(66.7%)。白点鲑源、美洲红点鲑源和亚东鲑源分离株对链霉素和甲氧苄啶药物敏感性较低,MIC均达到16μg/mL以上;白点鲑源分离株对新霉素和氯霉素表现出较低的药物敏感性,美洲红点鲑源分离株则对甲砜霉素、氟甲喹和恶喹酸表现出较低的药物敏感性。【结论】2019—2020年我国东北地区临床分离的嗜冷黄杆菌分离株对氟甲喹、恶喹酸、左氧氟沙星、庆大霉素、四环素、氨苄西林、氟苯尼考等药物的敏感性均呈现升高趋势,建议选用恩诺沙星对嗜冷黄杆菌引起的细菌性冷水病进行防治。

嗜冷黄杆菌及细菌性冷水病的研究进展

嗜冷黄杆菌Flavobacterium psychrophilum是细菌性冷水病(Bacterial cold water disease,BCWD)或虹鳟鱼苗综合征(Rainbow trout fry syndrome,RTFS)的病原,主要感染鲑科鱼类幼鱼并可导致较高的死亡率,该菌地理分布广泛,亦可感染非鲑科鱼类并造成疾病。BCWD又称低温病,通常在3~15℃时发生流行,其典型的临床症状包括尾柄部腐蚀、皮肤溃疡、鳃苍白、脾肿大、腹水和螺旋式游泳行为等。目前,对嗜冷黄杆菌及BCWD的研究主要集中在遗传多样性、耐药性、致病性和免疫防控等方面,而关于嗜冷黄杆菌的致病机制仍不够清晰。本文综述了嗜冷黄杆菌的分类地位、生物学性状、致病机制,以及BCWD的流行病学和防控技术,以期为BCWD的防控提供科学参考。

一株虹鳟源枯草芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为筛选对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)有潜在益生效果的菌株,本研究从健康虹鳟幼鱼肠道中分离到1株潜在益生菌株RT-BS07,采用形态学观察和分子特征分析对该菌株进行了鉴定,并评价了该菌株的抑菌性、耐受性、黏附性和安全性。形态学观察显示,菌株RT-BS07为革兰氏阳性杆菌,有圆形或椭圆形芽孢。16S rRNA比对结果显示,该菌株与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)NCBI3610株的同源性为99.86%。结合16S rRNA基因序列分析和形态学观察结果,确定菌株RT-BS07为枯草芽孢杆菌。菌株RT-BS07具备产蛋白酶和纤维素酶能力,其酶活力分别为(0.039±0.002)和(0.393±0.002)U/mg;该菌株可有效抑制温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、杀鲑气单胞菌(A.salmonicida)和鲁氏耶尔森氏菌(Yersinia ruckeri)等致病菌。菌株RT-BS07在pH为2~10 LB液体培养基中均可存活;在盐度为2%~8%条件下存活率为5.70%~93.28%,其存活率随盐度升高而降低。体外黏附试验结果表明,菌株RT-BS07可大量黏附在虹鳟前肠黏膜,不破坏肠道组织完整性,对左氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星和链霉素等18种抗菌药物敏感。本研究分离筛选得到的枯草芽孢杆菌RT-BS07株具有产消化酶性能,其抗逆性能强,对虹鳟无毒害作用,可作为虹鳟健康养殖及益生菌制剂研发源益生菌候选株。

益生菌在虹鳟养殖中的研究与应用

当前,针对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)疫病的防治仍主要依赖药物,抗菌药物的滥用导致微生物耐药性及生态环境安全等问题,环保有效的益生菌制剂已在水产养殖行业中得到广泛应用。尽管乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等益生菌在虹鳟养殖中可明显促进鱼体生长,提高消化酶活性,改变肠道菌群结构,增强机体免疫力,但是对益生菌的益生效果和机制尚缺乏系统总结。本文概述了目前虹鳟养殖中使用益生菌的种类、补充方式、益生效果和益生机制,以期为虹鳟绿色可持续养殖提供参考。

传染性胰脏坏死病毒敏感细胞系比较及其在CHSE-214细胞上的增殖特性

大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(Chinook salmon embryo cells,CHSE-214)和虹鳟性腺细胞(Rainbow trout gonad cells,RTG-2)是传染性胰脏坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)检测的国家标准所推荐使用的鲑鳟鱼源细胞系。本研究选用24株IPNV毒株,以1000倍半数组织培养物死亡剂量(50%tissue culture infective dose,TCID_(50))分别接种于CHSE-214和RTG-2细胞,以细胞病变情况比较这两种细胞对IPNV的敏感性。将IPNV以10 TCID_(50)和100 TCID_(50)接种在筛选出的最敏感细胞系上,每天观察细胞的病变及变化,收获病毒培养物。利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-q PCR)及病毒滴度测定法分析IPNV在敏感细胞上的增殖状况。结果显示,接毒后7 d时,全部毒株均能在CHSE-214细胞上增殖,并导致细胞病变,而仅有8株IPNV能在RTG-2细胞上增殖,导致细胞病变,表明CHSE-214细胞对IPNV的敏感性高于RTG-2细胞。利用RT-q PCR和TCID_(50)法分析IPNV在CHSE-214上的增殖情况发现,随着接毒时间的增加,病毒量整体呈现先升高后降低的趋势,接毒后3 d时达到最大值。该增殖趋势均出现在不同接毒剂量组,除接毒后1 d时,其余各时间点10 TCID_(50)剂量组的病毒量均显著高于100 TCID_(50)剂量组(P<0.05)。本研究结果表明,CHSE-214细胞比RTG-2更适合用于IPNV的体外分离培养,且在多数细胞出现典型细胞病变而尚未完全脱落时病毒含量最高,此时适合收集病毒培养物进行病毒检测。本研究可为IPNV的检测提供科学指导。