腺病毒介导的野生型p53基因逆转乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A耐药性的研究

目的探讨野生型p53基因对乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A耐药性的逆转作用及其机制。方法选用含野生型p53基因的重组腺病毒载体，转染乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A，绘制细胞生长曲线，利用流式细胞计数仪检测细胞周期分布及凋亡分析、TUNEL法检测细胞凋亡的发生，并采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot印迹转移检测p53基因的表达情况。结果野生型p53基因转染MCF-7／A后的24、48h均检测到p53基因的表达，并显著抑制MCF-7／A细胞的增殖；细胞周期发生改变，转染后的MCF-7／A的G0～G1期DNA百分含量（76．22％）明显高于对照组（43．64％，P〈0．05），凋亡率（10．76％）与对照组（1．48％）之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论重组腺病毒介导的野生型p53基因对乳腺癌耐药细胞株MCF-7／A的耐药性有明显的逆转作用，其机制可能是引起明显的G1期阻滞并诱导细胞凋亡。

人乳腺癌组织中p53基因单核苷酸多态性位点变异的研究

目的观察乳腺癌患者p53基因的单核苷酸多态性位点（SNPs）变异，探讨p53基因在乳腺癌癌基因学中的意义。方法选取p53基因位于外显子及内含子的共3对引物，利用SSCP（单链多肽构象）分析方法对30例乳腺癌样品进行分析及DNA测序。结果在检测的30例乳腺癌组织样品中，p53基因在第一内含子和第七内含子中共有4个碱基替换被检测出，其中3个为Hapmap（Hapolotype Map Project，国际单倍型图谱计划）中已公布的SNP位点，另外1个从未被确认。在p53第7内含子位置处发现一高突变率（20％）的G—A（rs12947788）类型基因替换，在其上游20个碱基位置处存在另一已知高突变率的SNP位点A→C（rs12951053），此两者联合出现，在所检测的30例乳腺癌组织样本中共发现6例，占所检测标本的20％。结论p53基因的SNPs分析对乳腺癌的早期发现、治疗和预后有一定意义。